氣相色譜—質譜法測定醬菜中的丙酸殘留

焦 陽 鄭鵬宇 于 兵

(丹東出入境檢驗檢疫局 遼寧丹東 118000)

1 前言

丙酸鈣和丙酸鈉是面食、醬菜等食品中常用的食品防腐劑，檢驗時多將其轉變為丙酸以液相色譜進行測定［1］。由于近幾年丹東局在出口韓國的鹽漬辣椒、醬黑豆、鹽漬沙參、鹽漬蘇葉等醬菜中曾檢出丙酸超標，而韓國近期又提高了技術壁壘，其食品藥品管理局規定［2］除面包、奶酪果醬類食品外其他類食品不得使用丙酸，且丙酸檢出限量為10 mg/kg(我國國家標準丙酸鹽檢出限為30 mg/kg)。因此，根據我國現行標準和進口國的限量要求，為了提高判定準確度和檢測靈敏度，使檢出的結果更加可靠，減少出口企業的經濟損失，本方法在原國家標準的基礎上進行了改進，采用氣相色譜質譜法測定醬菜中的丙酸殘留量并以乙酸為內標計算測定結果，現將結果報告如下。

2 材料與方法

2.1 材料

2.1.1 樣品

樣品為出口韓國腌漬辣椒，由丹東三元食品有限公司按照韓國傳統工藝制備，鹽水濃度11%，食用醋酸濃度1.0%。

2.1.2 儀器

7890－5975C型氣相色譜－質譜儀:美國Agilent公司，配電子轟擊源;Distillation Unit K－355水蒸汽蒸餾裝置:瑞士BUCHI公司。

2.1.3 試劑

丙酸標準品:SUPELCO公司，批號LB63094 44－2769;乙酸:市售品，含量大于99.7%;實驗用水:均為Milli－Q高純水。

2.1.4 標準儲備溶液和標準工作溶液

準確稱取適量的丙酸標準品用水配成質量濃度為1mg/mL的標準儲備溶液，于4℃冰箱保存。根據需要用水將儲備液稀釋成10μg/mL的標準工作溶液。

1．教學方式滿意度評分比較：LBL+CBL組滿意度明顯高于LBL組和CBL組，尤其在學習自主能力培養、分析問題能力方面，差異有統計學意義(P值均<0.05)；在專業知識提升方面，LBL組與CBL組間差異無統計學意義(表1)。

2.1.5 內標溶液

準確量取乙酸0.5mL，置100mL容量瓶中，以水稀釋至刻度，搖勻。

2.2 方法

2.2.1 GC －MS 條件

2.2.1.1 GC 條件

HP－INNOWAX石英毛細管柱:30m×0.25mm×0.25μm;載氣:氦氣，恒流流速為 1.0mL/min;柱溫升溫程序:初始溫度60℃，以10℃/min的速率升至200℃，保持10min;進樣口溫度:200℃;接口溫度:280℃;不分流進樣，進樣量:1μL。

2.2.1.2 MS 條件

四極桿溫度:150℃;離子源溫度:230℃;電子能量:70ev;數據采集模式:選擇離子監測(SIM)選擇離子(相對豐度)為:m/z 44(100%)。

取樣品于均質器中高速均質2min，然后準確稱取均質后的樣品10g(精確到0.1g)于蒸餾管中，加水100 mL、磷酸10 mL，調節蒸餾時間為15min，蒸汽壓為80%;收集蒸出液于250mL量瓶中;待收集留出液尚余約5mL時，停止蒸餾;準確加入內標溶液2.5mL后再加水至刻度，搖勻。

2.2.3 測定

取上述樣品處理液1μL注入氣相色譜儀，按2.2.1.1和 2.2.1.2 條件測定，并以內標法計算丙酸的殘留量。

3 結果與討論

3.1 樣品提取方法的優化

丙酸測定的標準是采用水蒸氣蒸餾法對丙酸進行提取，該方法提取效率高而且樣品同時得到凈化。本方法采用瑞士BUCHI公司產水蒸氣蒸餾裝置，經過實驗，選擇蒸餾時間15min，蒸汽壓為80%。

3.2 選擇離子的確定

本方法通過對丙酸和乙酸的全掃描質譜圖以及實際測定中的情況確定了丙酸質譜的定性、定量離子分別為 m/z74、57、45、28，見圖 1 － 圖 5;以丙酸m/z74為定量離子，以乙酸m/z60為內標離子。

圖1 丙酸的全掃描質譜圖

圖2 乙酸的全掃描質譜圖

圖3 丙酸的SIM質譜圖

圖4 丙酸及內標的SIM－TIC圖(Tr=9.272min內標;Tr=10.534 min丙酸)

圖5 樣品及內標的SIM－TIC圖(Tr=9.271min內標;Tr=10.551 min丙酸)

3.3 線性關系和檢出限

準確量取丙酸儲備液 1.0 mL、2.0 mL、3.0 mL、5.0 mL、10.0 mL，分別置于 100mL 容量瓶中，再準確加入內標溶液2.5mL，以水稀釋至刻度，搖勻。準確吸取上述各濃度的標準溶液各1μL，注入色譜儀，按2.2.1.1 和2.2.1.2 條件測定，記錄色譜峰面積，結果表1。

表1 線性關系實驗結果

以峰面積比為縱坐標Y，標準品濃度X(μg/mL)為橫坐標進行線性回歸，得回歸方程為:Y=0.1469+0.04217X，r=0.9995。

丙酸檢出限(LOD)是在10mg/kg添加水平下，以3倍的信噪比計算，可達到1mg/kg，能滿足進口國技術要求。

3.4 回收率和精密度

準確稱取已經粉碎不含丙酸的腌漬辣椒10g共8份，分成4組，每組2份，丙酸的添加量分別為100μg、50μg、20μg、10μg，按樣品處理同法操作，并按上述條件測定以內標法計算回收率，結果見表2。

表2 回收率測定結果

3.5 穩定性試驗

取線性關系試驗樣品1份(濃度30μg/mL)，于室溫條件下放置，并在 1h、2h、4h、6h、8h 后取樣測定，結果見表3。

表3 穩定性試驗結果

3.6 樣品測定

按上述實驗條件共檢驗鹽漬辣椒、醬黑豆、鹽漬沙參、鹽漬蘇葉84批次，其中鹽漬辣椒2批檢出丙酸，含量分別為246mg/kg、200mg/kg;鹽漬黃豆葉1批檢出丙酸含量為143mg/kg。

4 討論

本方法除了采用保留時間定性以外，還通過定性離子與定量離子的峰強度比值進行定性，這樣增加了定性結果的可靠性，在降低本底的同時提高了分析的靈敏度。

以氣質聯用方法測定醬菜樣品種中丙酸的含量，可大大提高檢測的靈敏度，滿足了對某些國家出口檢驗的特殊需求。由于丙酸的最終測定溶液為水溶液，實驗證明以外標法定量重現性較差，而改用內標法，以峰面積比值計算測定結果，可有效地改善測定的重現性，使測定結果準確可靠。

［1］ GB/T 23382－2009食品中丙酸鈉、丙酸鈣的測定高效液相色譜法［S］.

［2］ Korea Food＆ Drug Administration Inspection of Imported Food.2007.