李星芝,李凡,李雪青,王俊全
(天津優標技術檢測服務有限公司,天津 301700)
VC又稱抗壞血酸,是人體每天需要量最多的維生素,它具有廣泛的生理功能,是人體內重要的抗氧化劑,對維持肌體正常代謝、促進細胞生長有著十分重要的作用。鑒于VC對人類的重要性,人們對VC的測定一直都很重視[1]。目前,保健食品中VC多采用GB/T 5009.86 進行測定[2]。該方法對于固體飲料存在著過濾時間長,濾液不清澈,且由于過濾時間長而致使方法重復性差等缺點[3]。故本文通過采用不同方法處理濾液進行實驗改進,使得結果重復性RSD%、回收率結果良好。
熒光分光光度計:瓦里安CARY eclipse;高速離心機:SIGMA 3K15。
超純水,偏磷酸、硫酸、硼酸均為分析純,抗壞血酸對照品(純度)、固體飲料。
1.3.1 試樣的制備
1)精密稱取固體飲料約2 g 于100 mL 容量瓶中,用偏磷酸-乙酸溶液溶解并定容,將樣品溶液與標準品溶液分別轉入裝有2 g 酸洗處理活性碳的三角瓶中,劇烈振動1 min 進行還原型VC的氧化。然后先將溶液轉移至50 mL 離心管中,于10 000 r/min 離心10 min,再進行過濾,得此試樣濾樣備用。取續濾液5 mL 于放有5 mL 硼酸-乙酸鈉溶液的25 mL 容量瓶中,靜置30 min 后,用超純水定容,此為試樣空白溶液。
2)在此30 min 內另取續濾液5 mL 于放有乙酸鈉溶液的25 mL 容量瓶中,用超純水定容,此為試樣反應溶液。
3)精密量取試樣濾液和試樣空白液各2 mL 于10 mL 帶蓋比色管中,于暗室迅速加入5 mL 鄰苯二胺液,振搖混合反應1 小時后進行測定。
1.3.2 標準品溶液的制備
精密稱取VC標準品0.050 0 g,用偏磷酸-乙酸溶液溶解并定溶至50 mL,吸取該溶液10 mL 于100 mL容量瓶中,然后轉移至裝有2 g 酸洗處理過的活性碳的三角瓶中,后同試樣制備操作,取續濾液5 mL 兩份分別放入裝有5 mL 硼酸-乙酸鈉溶液和5 mL 乙酸鈉的50 mL 容量瓶中,靜置30 min 后,用超純水定容,分別得到標準品溶液反應液和標準品空白液。
取標準溶液0.5、1.0、1.5、2.0 mL 于10 mL 帶蓋試管中,補水至2ml,同時取標準品空白2 mL 于10 mL帶蓋比色管中,同試樣反應液操作,于暗室迅速加入5 mL 鄰苯二胺液,振搖混合反應1 h 后進行測定,繪制標準曲線[4]。
1.3.3 光譜條件
激發波長350 nm,發射波長430 nm,激發和發射狹縫均為5 nm。
標準曲線見表1、圖1。
表1 線性結果Table 1 The linear results
圖1 VC標準曲線Fig.1 Standard curve of vitamin C
線性回歸方程為Int=3.462 69×Conc +4.487 12,相關系數r=0.999 62。
由表1 可知,在5.0 μg/mL~20.0 μg/mL 濃度下,標準曲線線性良好。
重復性實驗結果見表2。
由表2 可知,平行測定6 次,計算重復性RSD%為2.23%,重復性良好。
表2 重復性實驗結果Table 2 Repetitive experimental results
回收率實驗結果見表3。
表3 回收率實驗結果Table 3 The recovery experiment results
由表3 可知,回收率范圍為97.4%~98.6%,說明本方法具有較高的準確度。
VC具有光不穩定性,操作過程要求避光進行[5],所以時間越短對實驗結果穩定性越好。本方法縮短了實驗時間,從而提高實驗穩定性。
經過線性、重復性和回收率實驗表明,采用在稱樣過程中加入活性碳的辦法,操作時間縮短,同時過濾前加入離心的操作,使得整個實驗過程縮短2 h。從方法的重復性、標準曲線和回收率來看,本方法穩定性好,操作快捷,適用于固體飲料中VC的測定。
[1]程小華,陳明之,李玉葳.烹調對蔬菜中硝態氮及VC含量影響的研究[J].食品研究與開發,2013,34(5):107-110
[2]高申.食品中維生素C 的測定[J].天津化工,2002(4):39-40
[3]張明晶,柴寶麗,關士海.國標法測定保健食品中維生素C 含量方法的改進[J].海峽醫藥,2008,20(3):68-69
[4]中國標準出版社第一編輯室.GB/T 5009.86-2003 中國食品工業標準匯編:蔬菜、水果及其制品卷下[S].北京:中國標準出版社,2009:853-856
[5]劉奕博,任國譜.乳制品中維生素C 穩定性的研究進展[J].中國乳品工業,2013(3):37-39