熱敏灸“大椎”穴對哮喘大鼠行為學及病理學的影響*

★ 張偉 熊俊 張琳

(江西中醫藥大學附屬醫院 江西南昌330006)

支氣管哮喘(bronchial asthma，簡稱哮喘)是由多種細胞(如嗜酸性粒細胞、肥大細胞、T細胞、中性粒細胞、氣道上皮細胞等)和細胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾?。?］。目前，全球哮喘患者約3億人，中國哮喘患者約3 000萬。哮喘是影響人們身心健康的重要疾病。氣道炎癥幾乎是所有類型哮喘的共同特征，也是臨床癥狀和氣道高反應性的基礎，氣道炎癥存在于哮喘的所有時段。目前西醫用藥主要以激素、β2-受體激動劑、白三烯受體拮抗劑、茶堿、抗膽堿藥物、抗IgE治療，但需要規范化長期治療，只能控制不能根治，且給患者造成較大經濟負擔。熱敏灸療法［2-7］是一種新型的中醫灸療方法，它以腧穴的熱敏化為技術核心，施以人體需要的飽和灸量，最大限度調動人體的自我調控能力，從而提高人體自我修復能力，以達到治療疾病的目的。熱敏灸療法用時短，直接提高人體正氣，療效顯著且經濟實惠，值得臨床推廣?，F就熱敏灸改善哮喘大鼠的行為學、病理學情況作以下詳細研究。

1 材料與方法

1.1 動物與分組 SD雄性大鼠40只，體重220～250g，由湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供，許可證號:SCXK(湘)2009-0004，動物在實驗前適應性馴養1周，飼養環境為江西中醫學院熱敏灸重點實驗室，室溫25℃，空氣濕度為50%，通風條件良好。按隨機數字表法，空白組、模型組每組各10只、治療組20只，根據“大椎”穴是否被熱敏化自動分為普通懸灸組(未熱敏化)和熱敏灸組(熱敏化)。

1.2 主要試劑和儀器 TSI-21型熱掃描成像系統(北京貝億醫療器械有限公司)，卵清蛋白(生產商:Sigma公司，北京索萊寶科技有限公司分裝)、氫氧化鋁干粉500g/瓶(廣州化學試劑廠)、滅菌注射用水(運城市天源制藥有限公司)、超聲霧化器(型號:402AI，上海魚躍醫療設備有限公司)，0.5% ～1%的伊紅酒精溶液、蘇木素染液、1%鹽酸酒精分化液、奧林巴斯OLYMPUS BX41研究顯微鏡、秒表、艾條(0.4cm×10cm，江西省中醫院生產)。

1.3 造模方法 大鼠于第1、8天腹腔注射致敏混懸劑(含卵蛋白100mg、氫氧化鋁干粉100 mg、滅活百日咳桿菌5×109個)1mL，第15天開始用1%卵白蛋白生理鹽水霧化吸入激發哮喘，每天1次，每次20min，共1周。正常對照組用滅菌注射用水代替卵清白蛋白液進行注射和霧化吸入。

1.4 造模成功標準 以大鼠出現煩躁、嗆咳、打噴嚏，呼吸頻率加快、幅度加大、腹式呼吸明顯和點頭運動，嚴重者呼吸減慢或節律不整，四肢癱軟，行動遲滯或俯伏不動，反應遲鈍等癥狀為激發成功。

1.5 穴位熱敏化標準 用固定夾將大鼠固定后，選取大鼠大椎穴，定位取穴按照國家十一五規劃教材李忠仁主編的《實驗針灸學》，以及胡元亮編《實驗動物針灸手冊》，取第7頸椎與第1胸椎之間背部正中。用艾條懸于大椎穴上約2mm處先回旋灸2 min預熱局部皮膚，再固定于大椎穴施行溫和灸。艾灸“大椎”穴10min后，對大鼠進行紅外熱像檢測，紅外熱成像產生沿脊柱縱向擴散或橫向擴散的紅外輻射增強區域(溫度升高0.5℃以上)長徑≥3cm被視為腧穴的熱敏化陽性。

1.6 治療方法 造模成功后，開始介入艾灸治療。每日于早9∶00開始，普通懸灸組與熱敏灸組各灸20min，每日1次，共治療7天。

1.7 樣本采集及檢測 治療結束后，模型組、普通懸灸組、熱敏灸組做最后一次霧化激發實驗，之后將所有大鼠乙醚麻醉后于股動脈取血并處死。取大鼠右肺中葉，10%緩沖福爾馬林固定液固定，再進行脫水、透明、石蠟包埋、切片和HE染色，最后在光鏡下觀察結果。

1.8 統計方法 用SPSS 13.0軟件包處理，所有數據用平均數±標準差(±s)表示，進行多個樣本均數的方差分析以及均數間兩兩比較(SNK-q檢驗)，如果出現方差不齊，經數據轉換后使方差齊，再進行檢驗。

2 結果

2.1 哮喘大鼠行為學觀察 (1)最后一次激發實驗各組大鼠行為變化。模型組在激發后出現明顯鼻部瘙癢抓鼻，進而呼吸加深、加快，跌倒，少動，點頭呼吸，呈哮喘樣表現;熱敏化組、普通懸灸組癥狀明顯減輕，且熱敏化組優于普通懸灸組。

(2)大鼠20min引喘潛伏期、發作總持續時間比較。見表1。

表1 大鼠20min引喘潛伏期、發作總持續時間比較

說明:■P ＜0.01，說明造模成功;▲P ＜0.01，說明熱敏灸與普通懸灸對于減輕哮喘大鼠的發作，改善哮喘大鼠的行為學指標皆有非常顯著的療效;●P＜0.01，說明熱敏化組對于改善哮喘大鼠的行為學指標明顯優于普通懸灸組。

(3)大鼠20min發作次數、打噴嚏次數、鼻癢抓鼻次數比較。見表2。說明:■P ＜0.01，說明造模成功;▲P ＜0.01，說明普通懸灸組及熱敏化組對于減輕哮喘大鼠的發作，改善哮喘大鼠的行為學指標皆有非常顯著的療效;●P＜0.01，說明熱敏化組對于改善哮喘大鼠的行為學指標明顯優于普通懸灸組。

表2 大鼠20min發作次數、打噴嚏次數、鼻癢抓鼻次數比較

2.2 病理組織學觀察 (1)正常肺組織切片。正常對照組肺組織顯示細支氣管管壁光滑，支氣管平滑肌細胞未見增生，支氣管粘膜皺壁無增生，管腔通暢，管內無炎性滲出物，小動脈管壁厚薄均勻，肺泡壁厚薄均勻一致，肺泡大小均勻一致，肺泡無溶合(見圖1、2)。

圖1 、2 為正常肺組織切片

(2)模型組肺組織切片。病理組織學改變:氣管管壁周圍有大量炎性細胞浸潤;支氣管粘膜皺裳增多延長，杯狀細胞增生明顯，平滑肌增厚，管腔縮窄，內有粘液栓;伴行小動脈管壁增厚縮窄，管腔閉塞;部分肺泡壁變薄或斷裂，融合成肺氣腫(見圖3、4)。

圖3 、4 為模型組肺組織切片

(3)普通懸灸組肺組織切片。病理組織學改變:氣管管壁周圍有較多炎性細胞浸潤;支氣管粘膜皺裳有增多延長，杯狀細胞有增生，平滑肌中度增厚，管腔中度縮窄，內有少量粘液栓;伴行小動脈管壁中度增厚縮窄，管腔狹窄;少量肺泡壁變薄或斷裂，融合成肺氣腫(見圖5、6)。

圖5 、6 為普通懸灸組肺組織切片

(4)熱敏灸組肺組織切片。病理組織學改變:氣管管壁周圍有少量炎性細胞浸潤;支氣管粘膜皺裳少許增多延長，杯狀細胞少量增生，平滑肌輕度增厚，管腔稍有縮窄，內有少量粘液栓;伴行小動脈管壁輕度增厚縮窄，管腔稍狹窄;少量肺泡壁變薄或斷裂，融合成肺氣腫(見圖7、8)。

圖7 、8 為熱敏灸組肺組織切片

綜上所述，普通懸灸組、熱敏灸組與模型組比較，說明艾灸可改善肺組織的形態學結構，減輕肺組織的炎癥反應和氣道高反應性，對哮喘有明顯的改善作用;而熱敏灸組與普通懸灸組比較，肺組織形態學方面亦有非常明顯的改善，說明熱敏灸“大椎穴”可明顯改善哮喘大鼠的炎癥反應和氣道高反應性，減輕哮喘發作。

3 討論

哮喘是臨床常見病多發病，目前，西醫學有關支氣管哮喘的基礎研究已進入細胞和分子研究水平，但在治療方面只能控制病情，所以在遠期療效和預后的評價上仍不令人十分滿意。艾灸是使用灸火給人體以溫熱性刺激，通過經絡腧穴的作用，以達到防治疾病目的的一種方法［8］，能溫經散寒、活血通絡、扶陽固脫?！夺t學入門·針灸》載:“藥之不及，針之不到，必須灸之?！笔侵嗅t學治療哮喘的常用手段。熱敏灸療法是利用某些穴位喜熱、嗜熱的特性，溫和灸產生一個“小刺激大反應”，通過穴位的六種熱敏化形式產生經氣感傳并達到飽和灸量，從而使治療效果達到最大化的治療手段。

大量研究說明艾灸能調節機體免疫功能，并對改善肺通氣功能有顯著效果，尤其適用于變態反應性疾病和氣道反應性疾病，能有效控制哮喘發作。本人以前的研究［9，10］亦發現艾灸哮喘大鼠“大椎穴”可降低血清中IL-4、IgE含量，提高IFN-γ含量，從而提高TH1/TH2，減輕氣道炎癥及高阻性。本研究熱敏灸組與非熱敏灸組對哮喘大鼠行為學、病理學均有顯著改善，說明艾灸對改善哮喘大鼠的行為學、病理學有較好療效;而熱敏灸組與非熱敏灸組比較，熱敏灸組對哮喘大鼠行為學、病理學方面較非熱敏灸組有非常顯著性改善，說明熱敏灸通過穴位的熱敏化治療提高療效。

“灸之要，氣至而有效”，此研究說明艾灸同樣需要重視穴位的狀態，而熱敏化腧穴正是處于敏化狀態的喜熱、嗜熱穴位，艾灸熱敏化腧穴可發動經氣感傳甚至氣至病所，可大大提高療效，值得臨床推廣應用。

［1］葉任高.內科學［M］.第6版.北京:人民衛生出版社，2004:64.

［2］陳日新，陳明人，康明非.熱敏灸實用讀本［M］.北京:人民衛生出版社，2009:3-16.

［3］陳日新，康明非.腧穴熱敏化的臨床應用［J］.中國針灸，2007，27(3):199-202.

［4］陳日新，康明非.腧穴熱敏化艾灸新療法［M］.北京:人民衛生出版社，2006:10.

［5］陳日新，陳明人，康明非，等.重視熱敏灸感是提高灸療療效的關鍵［J］.針刺研究，2010，35(4):311-314.

［6］陳日新，康明非，陳明人.岐伯歸來-論腧穴“敏化狀態”說［J］.中國針灸，2011，31(2):134-138.

［7］陳日新，康明非，陳明人.《內經》腧穴概念在熱敏灸中的重要指導作用［J］.江西中醫學院學報，2010，22(3):36-38.

［8］石學敏.針灸學［M］.第2版.北京:中國中醫藥出版社，2007:152.

［9］張偉，陳明人，熊俊.懸灸“大椎”穴對哮喘大鼠血清IL-4、IFN-γ 的影響［J］.中國中醫基礎醫學雜志，2012，18(5):541-542.

［10］張偉，陳明人，熊俊.不同灸量懸灸“大椎”穴對哮喘大鼠細胞免疫學機制的影響［J］.針刺研究，2012，37(3):202-205.