飼料中硒的測定國標方法改進

■袁燕平 姚亞軍 倪自利 黎 勇

(長沙興嘉生物工程股份有限公司技術中心)

硒是飼料里必需添加的一種重要微量元素，參與動物體內蛋白質、氨基酸、核酸、脂肪、碳水化合物和維生素以及微量元素等營養物質的代謝，在提高動物免疫力、生產性能及改善肉品質方面也有重要的作用。目前飼料中硒的檢測基本依照國標方法GB/T13883-2008中的氫化物原子熒光光譜法（仲裁法）進行，興嘉生物技術中心經過多年的實踐經驗卻發現，此方法中的處理方式主要針對配合飼料樣品，而針對于復合多礦的檢測，還需在此基礎上做出諸多改進，才能使操作方便，結果準確。

本文旨在將本實驗室所總結出來的改進經驗分享給同行，希望對大家有幫助。

1 實驗方案

1.1 材料與儀器

硒原始標準溶液（1 000 μg/ml，有國家證書），硝酸（優級純），高氯酸（優級純），鹽酸（優級純），氫氧化鈉（優級純），鐵氰化鉀等（優級純），氬氣（99.9%）。

硒標準儲備液：準確移取1 ml硒原始標準溶液于100 ml，用水稀釋至刻度，此標準儲備液濃度為10 μg/ml。

硒標準工作液：準確移取5 ml硒標準儲備液于50 ml，用水稀釋至刻度，此標準儲備液濃度為1 μg/ml，現用現配。

混合酸溶液：硝酸+高氯酸=4+1。

5%鹽酸溶液：鹽酸+水=5+95。

200 g/l鐵氰化鉀：稱取20.0 g鐵氰化鉀，溶于100 ml水中，搖勻。

20 g/l硼氫化鈉溶液：稱取20.0 g硼氫化鈉，溶于氫氧化鈉中（5 g/l）中，定容至1 L。

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AR2140電子分析天平（感量為0.000 1 g），原子熒光分光光度計（北京吉天，AFS-8230），DL-1電爐。

1.2 實驗方法

1.2.1 樣品處理

稱取試樣0.25 g，準確到0.000 2 g，置于100 ml高型燒杯中，加8 ml混合酸，蓋上表面皿于電爐上加熱，當溶液高氯酸冒煙時，再繼續加熱至溶液不再產生棕色氣體。冷卻，再加2.5 ml鹽酸，用水吹洗表面皿和杯壁，繼續加熱微沸約5 min即可，冷卻，移入50 ml容量瓶，用水稀釋至刻度，搖勻，作為試樣消化液。根據實際情況將此試樣消化液稀釋至含硒0.02～0.05 μg/ml，并且需加入5%鹽酸（體積比）和4%（體積比）200 g/l鐵氰化鉀溶液。

1.2.2 儀器參考條件

光電倍增管負高壓：260 V，硒空心陰極燈電流：60 mA，原子化溫度：800℃，爐高：8 mm，載氣流速：300 ml/min，屏蔽氣流速：800 ml/min；載液：5%鹽酸溶液；測量方式：標準曲線法；讀數方式：峰面積；延遲時間：1 s；讀數時間：15 s；加液時間：8 s；進樣體積：2 ml。

1.2.3 標準曲線

分別準確移取0.0、0.25、0.50、1.00、2.00、3.00 ml標準儲備液2于50 ml容量瓶中，加入10 ml水，加入2.5 ml鹽酸，加2 ml鐵氰化鉀溶液，用水稀釋至刻度，搖勻。

1.2.4 改進方法與國標法對比（見表1）

表1 改進方法與國標法對比

1.3 實驗結果與討論

1.3.1 標準曲線

在硒標準溶液濃度與熒光值之間繪制標準工作曲線，結果顯示，在硒濃度為0～0.060 μg/ml范圍內，硒的標準溶液濃度與其熒光值之間存在良好的線性關系，所得結果見表2。

表2 標準曲線的線性關系

1.3.2 精密度

按照1.2節中所述方法對3個不同多礦樣品分別進行3次平行檢測，實驗結果列于表3。結果表明該方法能將多礦中硒檢測出來，且平行樣極差相對值和變異系數均在5%以下，說明用此方法檢測多礦樣品中的硒，平行性和精密度較好。

表3 精密度實驗

1.3.3 重復性

按照1.2中所述方法，兩個月內不同時間對這3個多礦分別進行3次檢測，結果列于表4。兩個月內測得結果的極差相對值最高只有4.98%，變異系數在3%以下，說明用此方法檢測多礦樣品中的硒，穩定性良好。

表4 重復性實驗

1.3.4 回收率

在多礦樣品中加入硒標液，按照1.2節中所述方法，進行回收率實驗，所得結果列于表5。由表5可看出，最小回收率為95.11%，最大回收率為104.40%，說明該方法可靠，準確性高，可以滿足檢測要求。

表5 回收率實驗

1.3.5 與2，3-二氨基奈熒光法對比

實驗小組亦將本實驗中的3個樣送到某外檢機構，其采用2，3-二氨基奈熒光法進行了檢測，所得結果列于表6。由數據可知，2，3-二氨基奈熒光法所得結果重復性相當差，方法不穩定，所得結果不可靠?；诖朔N情況，建議采用氫化物原子熒光光譜法檢測飼料中的硒（即國標中的仲裁法），如果針對符合多礦，則可以采用本文中的條件進行檢測。

表6 2，3-二氨基奈熒光法重復性

2 結論

①對國標中氫化物原子熒光光譜法的各個條件進行優化后，此方法更加適合復合多礦的檢測，不僅可得到良好的精密度和準確度，結果穩定可靠，操作也更加方便簡單。

② 2，3-二氨基奈熒光法重復性很差，操作得不好，很容易導致較大誤差，所以不推薦采用。

③建議飼料同行在檢測復合多礦原料時，采用此方法。