米糠提取物二十八烷醇對斷奶仔豬生產性能和血液指標的影響

龍 蕾 高木珍 彭 凱 孫 靜 王順喜

（中國農業大學工學院1，北京 100083）

（天津納爾生物科技有限公司2，天津 300457）

（天津市獸藥飼料監察所3，天津 300402）

米糠提取物二十八烷醇對斷奶仔豬生產性能和血液指標的影響

龍 蕾1，2高木珍3彭 凱1孫 靜2王順喜1

（中國農業大學工學院1，北京 100083）

（天津納爾生物科技有限公司2，天津 300457）

（天津市獸藥飼料監察所3，天津 300402）

將米糠提取物二十八烷醇應用于斷奶仔豬教槽料中，探索二十八烷醇對斷奶仔豬生產性能和血液指標的影響，并與抗生素泰妙菌素效果進行比較，旨在探索二十八烷醇替代抗生素的可能性。選取105頭21日齡、初始體重為（5.70±1.41）kg的健康“杜×長×大”斷奶仔豬，隨機分為3組，即對照組、泰妙菌素組和二十八烷醇組，每組7個重復，每個重復5頭豬，進行飼養試驗，試驗期42 d，分別測定各組仔豬的生長性能、日糧中養分消化率、腹瀉程度和血液指標。結果表明，整個試驗期內，與對照組相比，二十八烷醇組仔豬的日增重、飼料轉化率、腹瀉程度和血液指標均顯著優于對照組（P＜0.05），并可提高日糧中干物質和粗蛋白質的表觀消化率；與泰妙菌素組相比，二十八烷醇組仔豬的血液指標與泰妙菌素組存在顯著性差異（P＜0.05），日增重、飼料轉化率、營養成分消化率和腹瀉程度指標與泰妙菌素組效果無顯著差異（P＞0.05）。因此，二十八烷醇可替代抗生素用于斷奶仔豬教槽料中，為開發安全、高效、無殘留的畜禽促生長飼料添加劑提供參考。

二十八烷醇 斷奶仔豬 生產性能 血液指標

近年來，許多國家都在立法控制飼料中抗生素類添加劑的使用，因此，抗生素替代品的研發已成為愈來愈熱的研究課題。植物提取物作為新一代飼料添加劑，作用方式獨特、效果良好，同時具備綠色、安全、高效、穩定、可靠等特點，可完全替代抗生素，消除化學合成藥物弊端，日益被飼料工業所重視［1］。

米糠是稻米加工的副產品，因其營養豐富，被譽為“天賜營養源”，含有脂多糖、谷維素、二十八烷醇、植物甾醇、生育酚等多種天然生物活性物質，這些物質具有促進生長、改善腸胃功能、調節脂類代謝、降低膽固醇、抗氧化等功能，在營養學上是十分優良的功能性原料［2－3］。因此，米糠是保健功能因子的寶庫。米糠中的活性成分二十八烷醇是一種純天然且具有生理活性的一元高級脂肪醇，主要存在于糠蠟中［4］。研究表明，二十八烷醇具有增進耐力、精力，提高反應靈敏性和應激能力，提高機體代謝率，改善心肌功能，降低血清膽固醇和三酰甘油含量等功能［5］，且安全性很高。根據小鼠口服試驗［6］，二十八烷醇的LD50值在18 000 mg／kg以上，安全性比食鹽（LD50＝3 000 mg／kg）還高，同時經小鼠精子畸變試驗、小鼠骨髓微核試驗和Ames試驗等均呈現陰性，古巴天然產物中心Aleman等學者的論證也證實了這一點［7］。鐘耕等［8］試驗研究也表明，高純度（90%）的二十八烷醇仍十分安全。因此，二十八烷醇是一種安全有效的功能性因子，且用量極微而生理活性顯著。

目前，國內外對二十八烷醇在功能性食品、各種營養補助品、醫藥產品等領域中的研究和應用較多，日本厚生省早在1988年就將其列入日本《機能性食品的開發》目錄，FDA于2001年7月批準二十八烷醇可以作為保健食品添加劑，然而將其作為飼料添加劑的相關研究卻很少。日本專利報道［9］，將含有C26～C32的長鏈脂肪醇或二十八烷醇添加入飼料中，動物攝取后體力、特別是耐久力得到增強。本研究通過探討二十八烷醇對斷奶仔豬生長性能、營養成分消化率、腹瀉程度和血液指標影響，與抗生素的效果進行比較，旨在探索其替代抗生素的可能性，提高仔豬養殖安全水平并提升米糠副產品的利用效率，為二十八烷醇作為天然活性成分改善畜禽動物健康水平、確保畜禽食品安全提供參考。

1 材料與方法

1.1 二十八烷醇含量的測定

二十八烷醇標準品：Sigma公司，純度≥99%。以二十八烷醇標準品為標樣，采用氣相色譜法測定二十八烷醇含量［10－11］。

1.2 米糠中二十八烷醇的提?。?2－14］

將新鮮米糠于105℃烘1 h鈍化脂酶的活性，冷卻。采用CO2超臨界流體萃取，萃取壓力為50 MPa，萃取溫度為40℃，萃取50min得到米糠蠟。采用濕性氧化鈣或氫氧化鈣，以適當比例與水混合，在100℃以上與米糠蠟混合反應4 h，反應結束，待完全冷卻后得到的固體反應產物即為脂肪醇與脂肪酸鈣的混合物。將得到的產物粉碎至粉末狀，與食用級乙醇充分混合，萃取6 h，再過濾除去不溶的脂肪酸鈣，剩下的母液為包含溶劑的脂肪醇溶液，從母液中回收溶劑得產物高碳脂肪醇，得率為65.32%。采用二級高真空分子蒸餾系統，一級蒸餾溫度為180℃，真空度為173.3 Pa，二級蒸餾溫度為150℃，真空度為66.7 Pa，得到產物中二十八烷醇質量分數為53.7%。

1.3 試驗設計與飼養管理

選取105頭健康的21日齡“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬，初始體重為（5.70±1.41）kg，根據性別和體重隨機分為3組，每組7個重復，每個重復5頭豬，試驗期42 d。豬舍溫濕度可控，自由采食和飲水。試驗日糧參照NRC（2012）仔豬營養需要進行設計和配制，日糧組成及營養水平見表1。

表1 日糧組成及養分含量／%

表1 （續）

根據日本專利［9］中的推薦用量和 Roberto等［15］研究，設計二十八烷醇在飼料中的添加量為8 mg／kg，試驗設計見表2。

表2 試驗設計

1.4 評定指標

1.4.1 生長性能測定

在第1天、第14天、第42天時，稱量仔豬空腹體重，記錄試驗期間每天每組豬的采食量，以確定平均日增重（ADG），平均日采食量（ADFI）和飼料轉化率（G／F）。

1.4.2 日糧營養成分消化率測定

分別于試驗第7天～第14天和第35天～第42天，用三氧化二鉻（0.2%）作為指示劑測定日糧中干物質、粗蛋白質和能量的表觀消化率，預飼期4 d，正飼期3 d。正飼期間，每天分3次收集糞便，加入10mL 10%的稀硫酸后放入－20℃冰箱保存，試驗結束后，將所有糞便解凍后混勻，取300 g糞樣在70℃烘箱中烘干72 h，粉碎，過40目篩。依據楊勝［16］的方法測定飼料和糞樣中干物質和粗蛋白質，飼料和糞樣經濕法消化后，參考Caton等［17］的方法測定其中Cr的含量。飼糧和糞樣的能量消化率用美國PARR公司的1281型能量測定儀測定。

養分消化率的計算公式為：

養分消化率／% ＝100－100×（A1×F2）／（A2×F1）。

式中：A1為飼料中三氧化二鉻質量分數／%；A2為糞樣中三氧化二鉻質量分數／%；F1為飼料中養分質量分數／%；F2為糞樣中該養分質量分數／%。

1.4.3 斷奶仔豬腹瀉情況

試驗期間每天觀察并記錄各仔豬腹瀉情況，在試驗第1天～第10天和第33天～第42天進行腹瀉評分，使用5級評分系統測定每一欄5頭豬的糞便分值，取平均值，評分標準見表3。統計腹瀉率、腹瀉頻率和腹瀉指數。

其中，腹瀉率＝腹瀉頭數／總頭數×100%；腹瀉頻率＝（腹瀉頭次）／（供試豬總頭數×試驗時間／天）×100%；腹瀉指數＝糞便評分之和／供試豬總頭數。該指數越高，代表腹瀉越嚴重。

表3 腹瀉評分標準

1.4.4 血液指標的檢測

試驗結束時，每欄隨機選取2頭豬通過前腔靜脈穿刺采血。進行血常規測定的血液用0.5mL肝素抗凝，其余的自然凝固后立即離心（3 000 r／min，15min）取血清，保存于－20℃備用。比色法測定血清堿性磷酸酶（ALP）活力，考馬斯亮藍法測定血清總蛋白（TP）含量，溴甲酚綠比色法測定血清白蛋白（ALB）含量，二乙酰－肟法測定血清尿素氮（BUN）含量，比色法測定血清總抗氧化能力（T－AOC），黃嘌呤氧化酶法測定血清超氧化物歧化酶（SOD）活力，硫代巴比妥法測定血清丙二醛（MDA）含量。試劑盒購自南京建成生物工程研究所，操作按試劑盒說明書進行。

1.5 數據分析

試驗數據采用Excel 2010進行整理，采用SPSS 17.0統計軟件對數據進行方差分析，以P＜0.05為差異顯著性判斷標準。

2 結果與分析

2.1 二十八烷醇對仔豬生長性能的影響

各組仔豬初始體重無顯著差異（P＜0.05）。從表4可知，試驗第1天～第14天，二十八烷醇組和泰妙菌素組的仔豬日增重均顯著高于對照組（P＜0.05），二十八烷醇組的飼料轉化率與對照組差異不顯著（P＞0.05），但比對照組提高了3.80%。第15天～第42天，二十八烷醇組和泰妙菌素組的日增重和飼料轉化率也較對照組顯著提高（P＜0.05）。

整個試驗期間，二十八烷醇組的平均日增重和飼料轉化率分別比對照組提高了6.45%（P＜0.05）和6.35%（P＜0.05）；泰妙菌素組的平均日增重和飼料轉化率分別比對照組提高了6.01%（P＜0.05）和6.35%（P＜0.05），各組之間平均日采食量無顯著差異（P＞0.05）。二十八烷醇組仔豬各項生長性能指標與泰妙菌素組無顯著差異（P＞0.05）。試驗結果表明，二十八烷醇能夠顯著提高斷奶仔豬的生長性能，且與抗生素泰妙菌素具有相同的促生長效果。

表4 二十八烷醇對斷奶仔豬生長性能的影響

2.2 二十八烷醇對仔豬日糧中養分消化率的影響

從表5可知，試驗第7天～第14天，二十八烷醇組仔豬日糧干物質和粗蛋白質表觀消化率分別比對照組提高了 3.36%（P＜0.05）和 4.21%（P ＜0.05），比泰妙菌素組分別提高了2.95%（P＜0.05）和1.98%（P＞0.05）。泰妙菌素組與對照組無顯著差異（P＞0.05）。

在第35天～第42天，3組間無顯著差異（P＞0.05），但二十八烷醇組日糧干物質和粗蛋白質表觀消化率要高于對照組和泰妙菌素組。試驗期間，各組之間能量消化率無顯著差異（P＞0.05）。

表5 二十八烷醇對斷奶仔豬日糧養分消化率的影響／%

2.3 二十八烷醇對仔豬腹瀉程度的影響

仔豬的腹瀉程度用腹瀉率、腹瀉頻率和腹瀉指數來表示。腹瀉率反映發病率，腹瀉頻率、腹瀉指數反映腹瀉的嚴重程度。3項指標結合使用，可較為全面地反映仔豬在試驗期內的腹瀉情況。從表6可以看出，二十八烷醇組和泰妙菌素組的腹瀉率、腹瀉頻率和腹瀉指數與對照組均顯著降低（P＜0.05）。其中，在第1天～第10天，二十八烷醇組的腹瀉率、腹瀉頻率和腹瀉指數比對照組分別降低了60.00%、60.14%和10.31%，在第33天～第42天，分別降低了57.15%、57.00%和6.14%，表明二十八烷醇對緩解斷奶仔豬的腹瀉有顯著的效果。從試驗結果上看，雖然二十八烷醇和泰妙菌素對斷奶仔豬腹瀉程度的影響無顯著性差異（P＞0.05），但二十八烷醇抗腹瀉效果要優于泰妙菌素。

表6 二十八烷醇對斷奶仔豬腹瀉程度的影響

2.4 二十八烷醇對仔豬血液指標的影響

由表7可知，二十八烷醇組血液中ALP、TP和ALB含量比對照組分別升高了32.34%（P＜0.05）、28.63%（P＜0.05）和30.60%（P＜0.05），比泰妙菌素組分別升高了26.41%（P＜0.05）、25.79%（P＜0.05）和22.10%（P＜0.05）；BUN含量比對照組降低了9.46%（P＜0.05），比泰妙菌素組降低了9.98%（P＜0.05）。泰妙菌素組與對照組無顯著性差異（P＞0.05）。

表7 二十八烷醇對斷奶仔豬血液生化指標的影響

從表8可得出，二十八烷醇組血液抗氧化能力與對照組和泰妙菌素組均存在顯著差異（P＜0.05），SOD和T－AOC活力分別比對照組提高了9.63%和34.38%，比泰妙菌素組提高了9.30%和39.67%，MDA含量比對照組降低了11.05%，比泰妙菌素組降低了5.47%。泰妙菌素與對照組無顯著差異（P＞0.05）。

表8 二十八烷醇對斷奶仔豬血液抗氧化指標的影響

3 討論

3.1 二十八烷醇對仔豬生長性能的影響

二十八烷醇的促生長作用可能與其對動物體內能量代謝的調節功效有密切關系。生長激素（HGH）是腺垂體細胞分泌的一種肽類激素。目前已有的研究證實，生長激素對于機體具有重要的生理調節作用，對于機體內的中間代謝過程及能量代謝過程有重要影響，比如可以促進蛋白質合成，增強對鈉、鉀、鈣、磷、硫等重要元素的攝取與利用，同時通過抑制糖的消耗，加速脂肪分解，使能量來源由糖代謝轉向脂肪代謝。楊浩等［18］通過大鼠試驗證實，補充二十八烷醇可以有效地促進大鼠機體生長激素的分泌，從而促進動物的快速生長。劉元法等［19］通過動物常規性能研究證實，二十八烷醇可以促進大鼠的生長。

另外，二十八烷醇進入動物體后，參與脂肪動員作用，提高肌肉中游離脂肪酸的轉移活性，使長鏈脂肪酸得到充分氧化，增加蛋白質、脂肪和糖元的合成，抑制蛋白質分解，從而可以促進動物生長［20］。加藤茂明［21］發現，二十八烷醇具有增進大鼠脂肪氧化分解的能力。Perez等［22］的試驗也表明，二十八烷醇可以促進大鼠肌糖元在運動過程中的消耗。向洋等［23］通過研究表明，飼喂大鼠適中劑量的二十八烷醇可有效地增加大鼠的平均日采食量和平均日增重，提高飼料轉化率。因此，二十八烷醇對于斷奶仔豬的促生長作用可能是由于二十八烷醇通過促進體內生長激素的分泌，來調節體內的能量代謝，加速脂肪轉變為能量，促進體內蛋白質的合成和糖的利用，從而達到促進生長、提高飼料轉化率的功效。

3.2 二十八烷醇對仔豬日糧中養分消化率的影響

仔豬斷奶會引起小腸形態結構發生變化，如腸道絨毛萎縮、隱窩增生等，這些變化將會減少腸道的吸收面積，影響飼料養分的消化吸收［24］。因此，保持仔豬小腸腸道形態結構的完整性對促進飼料營養物質的消化吸收有重要意義。Taylor等［25］研究表明，二十八烷醇有細胞保護的功能，可維持小腸內成熟的上皮細胞數量，抵御外界對胃腸刺激的不良反應。Arruzazabala等［26］研究也證明，口服長鏈脂肪醇對胃腸黏膜具有溫和的抗炎和保護效果，對不同誘因的胃腸疾病均有顯著的抑制效果。因此，二十八烷醇可能對仔豬胃腸道黏膜具有保護作用，能夠有效維持胃腸黏膜的完整性，從而提高仔豬對日糧的消化吸收功能。

本試驗結果也表明，二十八烷醇對日糧中干物質和粗蛋白質的消化吸收具有促進作用，但后期效果不明顯，需要進一步試驗證實。

3.3 二十八烷醇對仔豬腹瀉程度的影響

造成仔豬腹瀉的原因之一是斷奶應激，主要分為心理應激、營養應激和環境應激，緩解斷奶應激則是解決仔豬腹瀉的最好辦法。腎上腺素（AD）是一種由腎上腺髓質分泌的激素，是一種重要的生理調節激素和神經傳送體，由腎上腺釋放至血液中進行生理調節［27］。目前已經發現［28］，腎上腺素對于心臟收縮力上升，心臟、肝和筋骨的血管擴張和皮膚、粘膜的血管收縮、心輸出量等有重要作用，當人或動物處于一種刺激的環境下時，如興奮、恐懼、緊張等情況都會促進腎上腺素分泌量的增加，伴隨出現呼吸頻率加快，心跳加速與血液流動加速，瞳孔放大等生理現象。向洋等［29］通過糖代謝激素調節研究發現，二十八烷醇對于糖原的代謝調控主要是通過增加機體內腎上腺素和胰高血糖素的分泌量而調節糖原的合成，從分子水平說明了補充二十八烷醇后，GS合成酶的GSmRNA表達量增加，能夠調節機體內糖原的代謝，從而緩解動物應激。楊浩等［18］也通過大鼠試驗證實，補充二十八烷醇可以促進大鼠機體的腎上腺素分泌量的增加，提高大鼠機體的應激反應能力，從而增加大鼠的反應敏銳性。

另外，二十八烷醇屬于長鏈脂肪醇，進入動物體后，在肝臟、脂肪組織和肌肉中都有分布，由于肌肉中可以儲藏相當量的二十八烷醇，能參與脂肪動員作用，提高肌肉中游離脂肪酸的轉移活性，同時被氧化為脂肪酸后形成多種酯，經β－氧化轉化成能量而直接被肌細胞利用，節省了動物在應激、饑餓或長時間運動時對糖的利用，保持體內血糖平衡，維持機體正常機能［30］。因此，二十八烷醇具有顯著抗應激的功效，可緩解仔豬斷奶應激，這就在一定程度上控制了仔豬斷奶的腹瀉程度。本試驗結果也表明，二十八烷醇對預防斷奶仔豬腹瀉具有良好的效果。

3.4 二十八烷醇對仔豬血液指標的影響

研究表明，高水平的血清總蛋白（TP）和白蛋白（ALB）是蛋白質代謝旺盛的表現，反應機體免疫機能，有利于動物生長［31］。堿性磷酸酶（ALP）活性在生理范圍內適量提高，可以促進仔豬體內蛋白質的合成，加快日增重，從而提高動物的生長速度，提高飼料轉化率。血尿素氮（BUN）是體內蛋白質降解的產物，BUN降低可增加氮沉積，提高蛋白質合成量，其含量直接反映機體的營養狀況和蛋白質的代謝水平［32］。本試驗中，通過對仔豬血液中 TP、ALB和ALP生化指標的測定得出，二十八烷醇能顯著提高仔豬血清TP、ALB含量和ALP活力，有效降低BUN水平，表明二十八烷醇的添加可增強動物機體的新陳代謝水平，提高進入豬體內的蛋白質利用率，從而顯著提高生長性能，且效果優于泰妙菌素。

動物機體內SOD在清除自由基、氧化損傷和維持細胞結構方面起著重要作用。T－AOC是近幾年研究發現的用于衡量機體抗氧化酶系統（包括GSH、SOD及過氧化氫酶等）對外來刺激的代償能力以及機體自由基代謝狀態、反映機體抗氧化機能的一項重要指標，MDA作為脂質過氧化的終產物之一，生物體內自由基的指示物，廣泛地作為各種氧自由基損傷機體的指標。在應激狀態下，SOD活性降低，而血液中脂質過氧化物MDA含量升高。試驗結果表明，與對照組和泰妙菌素組相比，二十八烷醇提高了斷奶仔豬血液中SOD和T－AOC的活性，降低了血清中MDA的含量，說明二十八烷醇可提高斷奶仔豬機體內抗氧化系統活力，從而使機體的抗氧化能力整體上顯著提高，從而對斷奶仔豬機體起到顯著的免疫調節作用。

4 結論

日糧中添加二十八烷醇可提高斷奶仔豬的日增重、飼料轉化率，促進營養成分消化吸收。同時，可減緩仔豬斷奶應激，緩解斷奶仔豬腹瀉的發生，使仔豬正常生長。此外，二十八烷醇具有生理活性，可有效提高機體的免疫功能和抗氧化能力，對預防疾病、促進生長有顯著功效。通過與抗生素泰妙菌素進行效果對比試驗得出，二十八烷醇作為抗生素替代品的應用前景廣闊。

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Effects of Octacosanol Extracted from Rice Bran on Production Performance and Blood Parameters in Weanling Piglets

Long Lei1，2Gao Muzhen3Peng Kai1Sun Jing2Wang Shunxi1

（College of Engineering，China Agricultural University1，Beijing 100083）
（Tianjin Naer Biotechnology Co.，Ltd.2，Tianjin 300457）
（Tianjin Veterinary Drugs and Feed Monitor Institute3，Tianjin 300402）

In order to explore the effects of octacosanol on production performance and blood parameters of weanling piglets and the possibility of octacosanol alternative antibiotics，adding octacosanol extracted from rice bran to feed ofweanling piglets and comparison of effects of octacosanol and antibioticswere accomplished.A total of105 21－day－old piglets selected（initial weight of（5.70±1.41）kg in good health）were randomly divided into three groups，including control group，tiamulin group（no antibiotic group＋33 mg／kg of tiamulin）and octacosanol group（no antibiotic group＋8 mg／kg octacosanol）.The effects of octacosanol supplementation on growth performance，nutrient digestibility，diarrhea degree and blood profiles in weanling pigletswere evaluated.The results showed that octacosanol group had significant differences on ADG，G／F，diarrhea degree and blood parameters（P＜0.05）with controlled group，and improved nutrient digestibility of drymatter and nitrogen.Compared with tiamulin group，octacosanol group showed greater differences in blood parameters（P＜0.05），but there were no significant difference in ADG，G／F，nutrient digestibility and diarrhea degree（P＞0.05）.These results indicated that the supplementation of octacosanolmight replace antibiotics in weanling piglets feed，which could provide a reference for the development of safe，efficient，no residual animal feed additives.

octacosanol，weanling piglets，production performance，blood parameters

S816.79

A

1003－0174（2015）06－0094－07

公益性行業（農業）科研專項（201203015）

2014－01－13

龍蕾，女，1981年出生，博士，農產品加工工程

王順喜，男，1959年出生，教授，農產品加工工程