食管鱗癌組織中Survivin、Caspase-3和Caspase-8的表達及其臨床意義

曹　婧，任　美

(鄭州鐵路職業技術學院，河南 鄭州 450052)

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食管鱗癌組織中Survivin、Caspase-3和Caspase-8的表達及其臨床意義

曹婧，任美

(鄭州鐵路職業技術學院，河南 鄭州 450052)

[摘要]目的探討食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的表達及臨床意義，并探討三者的相互關系。方法采用免疫組化S-P法檢測105例食管鱗癌和50例癌旁正常食管黏膜組織中survivin、caspase-3和caspase-8。結果食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的陽性率分別為74.3%(78/105)、37.1%(39/105)、39.0%(41/105)，癌旁正常食管黏膜組織中分別為4.0%(2/50)、84.0%(42/50)、80.0%(40/50)，2組比較差異均有統計學意義(P均<0.05)。食管鱗癌組織中survivin的表達與分化程度、臨床分期、淋巴結轉移有關(P均<0.05)；食管鱗癌組織中caspase-3和caspase-8的表達均與臨床分期、淋巴結轉移有關(P均<0.05)。食管鱗癌組織中survivin與caspase-3和caspase-8均呈負相關關系(r=-630、-556，P均<0.05)，而caspase-3和caspase-8呈正相關關系(r=0.718，P<0.05)。結論Survivin、caspase-3和caspase-8在食管鱗癌組織中均存在異常表達，survivin可能通過抑制caspase-3、caspase-8表達而促進腫瘤的進展，三者聯合檢測可用于食管鱗癌的病情和預后評估。

[關鍵詞]食管鱗癌；survivin；caspase-3；caspase-8

細胞凋亡是一種細胞的程序性死亡的生物學過程，其受促進凋亡基因和凋亡抑制基因的調控，正常機體內這種調控處于一種動態的平衡狀態，保證機體各器官和組織的正常運行，而腫瘤發生的過程則往往伴隨著細胞凋亡調控的失衡。Survivin是凋亡抑制蛋白家族成員之一，可以通過caspase依賴性和非依賴性途徑發揮細胞凋亡的調控作用，是細胞凋亡的主要調控效應因子[1-2]。Caspase-3和caspase-8是2種參與細胞凋亡促進作用的核心蛋白[2-4]。本研究通過檢測食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的表達，探討細胞凋亡在腫瘤發生和進展中作用，以及調控因素，以期為食管鱗癌的診斷、預后評估提供一定參考數據，并為食管鱗癌的靶向治療提供靶點選擇方向。

1材料與方法

1.1標本來源入組鄭州大學第一附屬醫院腫瘤科2013年1月至2015年1月收治的經病理學確診的食管鱗癌患者105例，其中男69例，女36例；年齡30~76歲，中位年齡53歲；分化程度：高分化40例，中分化39例，低分化26例；臨床分期：Ⅰ期19例，Ⅱ期39例，Ⅲ期37例，Ⅳ期10例；淋巴結轉移：無43例，有62例。同時收集50例癌旁正常食管黏膜組織標本作為對照。

1.2Survivin、caspase-3和caspase-8的檢測采用免疫組化S-P法檢測105例食管鱗癌和50例癌旁正常食管黏膜組織中survivin、caspase-3和caspase-8，以已知陽性組織作為陽性對照，以PBS代替一抗作為陰性對照。鼠抗人survivin、caspase-3和caspase-8抗體以及S-P免疫組化試劑盒等均購自福州邁新生物工程技術有限公司。

1.3結果評判隨機選取5個高倍鏡(×400)視野，綜合染色強度和陽性細胞比例進行評分，陽性細胞數≤5%計0分，6%~25%計1分，26%~50%計2分，51%~75%計3分，76%~100%計4分；染色強度：無染色計0分，淡黃色計1分，棕黃色計2分，棕褐色計3分。然后兩者乘積作為結果，0分為(-)，1~3為(±)，4~6為(+)，7~12為(++)，其中前兩者為陰性，后兩者為陽性。所有染色評判均有2位病理科醫生獨立評判，然后綜合評判。

1.4統計學處理采用SPSS 17.0進行統計分析，計數資料用百分數表示，比較采用χ2檢驗，檢驗水準α=0.05。

2結果

2.1不同食管組織中survivin、caspase-3和caspase-8的表達食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的陽性率分別為74.3%(78/105)、37.1%(39/105)、39.0%(41/105)，癌旁正常食管黏膜組織中分別為4.0%(2/50)、84.0%(42/50)、80.0%(40/50)，2組比較差異均有統計學意義(P均<0.05)。

2.2食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的表達與其臨床病理參數的關系食管鱗癌組織中survivin的表達與分化程度、臨床分期、淋巴結轉移有關(P均<0.05)；食管鱗癌組織中caspase-3和caspase-8的表達均與臨床分期、淋巴結轉移有關(P均<0.05)。見表1。

表1　食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的表達與其臨床病理參數的關系 　n(%)

2.3食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8表達相互關系食管鱗癌組織中survivin的表達與分化程度、臨床分期、淋巴結轉移有關(P均<0.05)；食管鱗癌組織中caspase-3和caspase-8的表達均與臨床分期、淋巴結轉移有關(P均<0.05)。見表2~4。

表2　食管鱗癌組織中survivin與caspase-3的相關性

注：r=-0.630，P<0.05

表3　食管鱗癌組織中survivin與caspase-8的相關性

注：r=-0.556，P<0.05

表4　食管鱗癌組織中caspase-3與caspase-8的相關性

注：r=0.718，P<0.05

3討論

細胞凋亡是一種細胞程序性死亡過程，正常機體內一定的細胞凋亡有利于機體的新陳代謝，屬于正常的生物學過程。正常機體內，細胞凋亡受凋亡基因和凋亡抑制基因的雙向調控，維持動態平衡狀態。腫瘤的發生同樣是一種受多因素、多基因調控的多階段的過程，這一過程受到癌基因和抑癌基因的雙向調控，而且腫瘤的發生過程中一個重要的生物學行為就是細胞的異常增殖，而細胞凋亡受到抑制[5-6]。Survivin是凋亡抑制蛋白家族成員之一，具有抑制細胞凋亡和調控細胞周期的雙重作用，正常機體僅表達于胚胎組織以及未分化或低分化的組織中，成年人機體內一般不表達或低表達。在細胞凋亡這一生物學過程中，survivin可以通過caspase依賴性和非依賴性途徑發揮細胞凋亡的調控作用，是細胞凋亡的主要調控效應因子[1-2,7]。而caspase-3和caspase-8是2種參與細胞凋亡促進作用的核心蛋白[2-4]。Caspase-3是細胞凋亡的關鍵蛋白酶，是細胞凋亡過程的主要執行者，也是細胞凋亡蛋白酶發生級聯反應的關鍵步驟，其受到抑制是導致細胞凋亡停止的主要因素，這也是腫瘤發生、發展過程中其表達降低的原因[8]。Caspase-8是細胞凋亡程序的啟動因子，能夠通過自身活化啟動細胞凋亡的發生，并通過調節caspase-3的表達而達到導致細胞凋亡的目的，在腫瘤發生過程中，caspase-8通過甲基化、基因突變等降低其蛋白的表達，進而誘導腫瘤細胞逃脫細胞凋亡程序的監控[9-10]。

本文結果顯示，食管鱗癌組織中survivin、caspase-3和caspase-8的陽性率分別為74.3%、37.1%、39.0%，癌旁正常食管黏膜組織中分別為4.0%、84.0%、80.0%，2組比較差異均有統計學意義，提示食管鱗癌組織中三者存在異常表達。本研究通過分析survivin、caspase-3和caspase-8與食管鱗癌臨床病理參數的關系發現，食管鱗癌組織中survivin的表達與分化程度、臨床分期、淋巴結轉移有關，且隨著分化程度的進展、臨床分期的加深、淋巴結轉移的發生而陽性率增加，提示survivin可能與食管鱗癌的疾病進展和浸潤轉移有關，能夠促進其進展；食管鱗癌組織中caspase-3和caspase-8的表達均與臨床分期、淋巴結轉移有關，且兩者的陽性率隨臨床分期的加深和淋巴結轉移的發生而下降，提示caspase-3和caspase-8是食管鱗癌的疾病進展阻止因子。本研究還發現，食管鱗癌組織中survivin與caspase-3和caspase-8均呈負相關關系(r=-630、-556，P均<0.05)，而caspase-3和caspase-8呈正相關關系(r=0.718，P<0.05)，這提示三者在食管鱗癌的疾病進展的生物學進程中相互影響。

綜上所述，survivin、caspase-3和caspase-8在食管鱗癌組織中均存在異常表達，survivin 可能通過抑制caspase-3、caspase-8表達而促進腫瘤的進展，三者聯合檢測可用于食管鱗癌的病情和預后評估。

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Expressions of Survivin, Caspase-3 and

Caspase-8 in the Esophageal Squamous-celled Carcinoma

Cao Jing, Ren Mei

(ZhengzhouRailwalVocationalandTechnicalCollege,Zhengzhou450052,China)

[Abstract]ObjectiveTo investigate the expressions of survivin, caspase-3 and caspase-8 in the esophageal squamous-celled carcinoma and the clinical significance, and to analyze their correlations.MethodsImmunohistochemical S-P method was used to detect the expressions of survivin, caspase-3 and caspase-8 in the 105 cases of esophageal squamous-celled carcinoma and 50 cases of paraneoplastic normal tissues.ResultsThe positive rates of surviving, caspase-3 and caspase-8 were 74.3%(78/105), 37.1%(39/105) and 39.0%(41/105)in the esophageal squamous-celled carcinoma, and were (2/50)%, 84.0%(42/50) and 80.0%(40/50) in the paraneoplastic normal tissues (P<0.05).The expression of survivin in the esophageal squamous-celled carcinoma was related with cell differentiation, clinical stage and lymph node metastasis(P<0.05).The expressions of caspase-3 and caspase-8 in the esophageal squamous-celled carcinoma were related with clinical stage and lymph node metastasis (P<0.05).The expression of survivin was negatively related with caspase-3 in the esophageal squamous-celled carcinoma (r=-630，P<0.05).The expression of survivin was negatively related with caspase-8 in the esophageal squamous-celled carcinoma (r=-556，P<0.05).The expression of caspase-3 was positively related with caspase-8 in the esophageal squamous-celled carcinoma (r=0.718， P<0.05).ConclusionAbnormal expressions of Survivin、caspase-3 and caspase-8 are observed in the esophageal squamous-celled carcinoma, and the associated detection can be used to evaluate the pathogenetic condition and prognosis of esophageal squamous-celled carcinoma.

[Key words]esophageal squamous-celled carcinoma; survivin；caspase-3；caspase-8

收稿日期：(2015-02-18)

[中圖分類號]R735.1;R730.23

[文獻標識碼]A

[文章編號]1673-5412(2015)06-0477-04

作者簡介：曹婧(1981-)，碩士，講師，主要從事食管癌的病理學研究。E-mail:caojing8098@126.com

DOI:10.3969/j.issn.1673-5412.2015.06.005