紅旱蓮石油醚部位的化學成分研究

許　芳，高　萬，邢建國，趙　軍，徐　芳，吉騰飛*，顧政一*

(1．中國醫學科學院/北京協和醫學院藥物研究所，天然藥物活性物質與功能國家重點實驗室，北京　100050；2．新疆藥物研究所-維吾爾藥重點實驗室，烏魯木齊　830004)

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紅旱蓮石油醚部位的化學成分研究

許芳1,2，高萬1，邢建國2，趙軍2，徐芳2，吉騰飛1*，顧政一2*

(1．中國醫學科學院/北京協和醫學院藥物研究所，天然藥物活性物質與功能國家重點實驗室，北京100050；2．新疆藥物研究所-維吾爾藥重點實驗室，烏魯木齊830004)

摘要：目的研究紅旱蓮(Hypericum ascyron L.)石油醚部位的化學成分。方法采用薄層層析、硅膠柱層析、Sephadex LH-20和高效制備液相對其化學成分進行分離和純化，通過理化性質和波譜數據分析鑒定化合物的結構。結果從紅旱蓮石油醚部位中分離得到11個化合物，分別為：木栓酮(friedelin，1)、正二十八烷醇(1-octacosanol，2)、十一酸(hendecanoic acid，3)、正二十八烷(octacosane，4)、正二十六酸(hexacosanoic acid，5)、正二十烷酸(arachidic acid，6)、furohyperforin(7)、furoadhyperforin(8)、十八烷酸(octadecanoic acid，9)、正三十烷酸(n-triacontanoic acid，10)和正十八烷(n-octadecane，11)。結論化合物1～11均為首次從該植物中分離得到。

關鍵詞：紅旱蓮；金絲桃屬；化學成分

紅旱蓮又名湖南連翹、黃海棠等，為藤黃科金絲桃屬(Hypericum)多年生草本植物黃海棠(HypericumascyronL.)的全草;常生于山坡、林下或草叢中，除青海、新疆外，全國各地均有分布[1]。紅旱蓮味苦、性寒；具有涼血止血、瀉火解毒功能;用于治療吐血、咯血、衄血、子宮出血、外傷出血、風濕、痢疾、肝炎、肝火頭痛、黃疸和瘡癤等[2]。金絲桃屬植物中含有多種類型的化合物，包括：二蒽酮類化合物，如金絲桃素；黃酮類化合物，如金絲桃苷、槲皮素等；間苯三酚類化合物，如貫葉金絲桃素等；揮發油等。該屬植物多數表現出了較好的抗抑郁、抗菌、抗疲勞、抗病毒和抗艾滋病等藥理活性[3]。而對紅旱蓮的研究多集中在其提取物的活性以及二蒽酮類化合物、黃酮類化合物等的抗炎、抗菌和抗腫瘤等方面[4]。

我們對紅旱蓮的石油醚部位進行了化學成分研究，本文報道所分離鑒定的11個化合物，分別為：木栓酮(1)、正二十八烷醇(2)、十一酸(3)、正二十八烷(4)、正二十六酸(5)、正二十烷酸(6)、furohyperforin(7)、furoadhyperforin(8)、十八烷酸(9)、正三十烷酸(10)、正十八烷(11)。以上11個化合物均為首次從該植物中分離得到，其中1為五環三萜類化合物，7和8為間苯三酚類化合物，其余8個為脂肪酸或烷烴類化合物。

1儀器與試藥

1.1儀器Agilent 1100系列LC/MSD Trap-SP型質譜儀、Agilent 1200型高效液相色譜儀(美國Agilent公司)；Vairan Inova-500核磁共振波譜儀(美國Varian公司)。色譜柱Rp C18(10 μ，制備型；5 μ，分析型；日本YMC公司)。Sephadex LH-20(Pharmacia公司)。

1.2試藥紅旱蓮藥材于2013年11月購自安徽省亳州市，由中國醫學科學院/北京協和醫學院藥物研究所馬林副研究員鑒定為紅旱蓮HypericumascyronL.，標本現存于中國醫學科學院藥物研究所植物標本室，標本號為No.ID-S-2527。色譜級甲醇(百靈威化學技術有限公司)；柱層析硅膠200～300目和薄層色譜硅膠GF254(青島海洋化工廠);實驗室所用試劑均為國產分析純(北京化工廠)。

2提取與分離

取紅旱蓮干燥地上部分75 kg，粉碎，用10倍量乙醇加熱回流提取3次，每次2 h，合并濾液，減壓濃縮后，得浸膏。浸膏用等體積的水混懸，用石油醚萃取，萃取液減壓濃縮后，得石油醚部位998 g。取900 g石油醚部位，用適量200～300目硅膠進行拌樣，干燥后過100目篩，經減壓柱層析，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，根據薄層色譜分析結果，合并相同流份，共13份。

取51.8 g流份2，加適量200～300目硅膠拌樣，干燥后過100目篩，經減壓柱層析，以石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，根據薄層色譜分析結果，合并相同流份，共25份。再經反復硅膠200～300目、硅膠柱層析、Sephadex LH-20、制備液相色譜和重結晶，得到化合物1(20 mg)、化合物2(10 mg)、化合物3(39 mg)、化合物4(27 mg)、化合物5(28 mg)、化合物6(11 mg)、化合物7(20 mg)、化合物8(11 mg)、化合物9(15 mg)、化合物10(7 mg)和化合物11(74 mg)。

3結構鑒定

化合物1白色針狀結晶，EI-MSm/z(%)：426[M]+(15)，411(8)，341(6)，302(16)，273(38)，273(38)，218(31)，205(42)，結合核磁共振氫譜和碳譜推斷其分子式為C30H50O；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)譜數據δ：2.31(1H，m)，1.76～1.31(22H，m)，1.27(3H，s)，1.05(3H，s)，1.05(3H，s)，1.01(3H，s)，0.95(3H，s)，0.90(3H，s)，0.89(3H，s)，0.72(3H，s)；13C-NMR(CDCl3，125 MHz)譜數據δ：22.3(C-1)，41.5(C-2)，213.2(C-3)，58.2(C-4)，42.1(C-5)，41.3(C-6)，18.2(C-7)，53.1(C-8)，37.4(C-9)，59.5(C-10)，35.6(C-11)，30.5(C-12)，39.7(C-13)，38.3(C-14)，32.4(C-15)，36.0(C-16)，30.0(C-17)，42.8(C-18)，35.4(C-19)，28.2(C-20)，32.8(C-21)，39.2(C-22)，6.8(C-23)，14.6(C-24)，17.9(C-25)，20.2(C-26)，18.6(C-27)，32.1(C-28)，35.0(C-29)，31.8(C-30)。以上波譜數據與文獻[5]報道的基本一致，故確定化合物1為木栓酮(friedelin)。

化合物2白色粉末，1H-NMR(400 MHz，CDCl3) 譜數據中顯示長鏈脂肪酸的特征信號δ:3.64(2H，t，J=8.0 Hz，-CH2OH)，1.56(2H，m)，鏈中亞甲基δ1.25[50H，-(CH2)n]，末端甲基δ：0.88(3H，t，J=8.0 Hz，-CH3)；13C-NMR(125 MHz，CDCl3) 譜數據δ：63.14(C-1)，32.8(C-2)，25.7～31.9(C-3～C-26)，22.7(C-27)，14.1(C-28)。以上波譜數據與文獻[6]報道基本一致，故確定化合物2為正二十八烷醇(1-octacosanol)。

化合物3無色結晶，1H-NMR(CDCl3，400 MHz)譜數據δ：2.34(2H，t，J=9.0 Hz，H-2)，1.63(2H，m)，0.88(3H，t，J=7.2 Hz，1-CH3)；13C-NMR(CDCl3，125 MHz)譜數據δ：179.8(-COOH)，34.0(C-2)，31.8(C-8)，29.6(強峰，-CH2-，C-4～C-7)，24.6(C-3)，22.6(C-10)，14.0(C-11)。以上波譜數據與文獻[7]報道的基本一致，故確定化合物3為十一烷酸(hendecanoic acid)。

化合物4白色蠟狀固體，EI-MS，m/z(%)：394[M]+，380，366，352，338，324，310等一系列相差CH2的碎片峰，符合長鏈烴類裂解規律，結合核磁共振氫譜和碳譜確定分子式為C28H58；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)譜數據δ：0.88(6H，t，J=6.4，2×-CH3)，1.25～1.54(52H，m，26×-CH2-)。根據以上波譜數據確定化合物4為正二十八烷(octacosane)。

化合物5白色粉末，EI-MS，m/z(%)：396[M]+，382，368，353等為失-CH2的碎片離子峰，結合核磁共振氫譜和碳譜確定分子式為C26H52O2；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)譜數據δ：2.35(2H，J=12.5 Hz)，1.64(2H，m)，1.30～1.25(44H，m，-CH2-×22)，0.88(3H，J=9.8 Hz，-CH3)。以上波譜數據與文獻[8]報道的基本一致，故化合物5確定為正二十六烷酸(hexacosanoic acid)。

化合物6白色蠟狀固體，ESI-MSm/z(%)：335[M+Na]+，647[2M+Na]+，(-)-ESI：311[M-H]-，623[2M-H]-，確定相對分子質量為312；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)譜數據δ：2.31(2H，t，7.6 Hz)，1.60(2H，m)，1.25(32H，s)，0.88(3H，t，7.2 Hz)。以上波譜數據與文獻[9]報道的基本一致，故化合物6確定為正二十烷酸(arachidic acid)。

化合物7無色油狀，EI-MSm/z(%)：552 [M]+，結合核磁共振氫譜和碳譜確定相對分子質量為552；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)譜數據δ：5.08(1H，brt，H-27)，5.06(1H，brt，H-17)，4.94(1H，brt，H-22)，4.55(1H，dd，J=5.6，10.8Hz，H-32)，3.14(1H，dd，J=14.0，7.2 Hz，H-26)，3.01(1H，dd，J=14.0，7.2 Hz，H-26)，2.65(1H，J=12.0 Hz，H-31a)，2.17(1H，m，H-21a)，2.15(1H，m，H-16a)，2.06(1H，m，H-15a)，2.01(1H，dd，J=4.4，13.5 Hz，H-5a)，1.98(1H，sept，J=6.8 Hz，H-11)，1.93(1H，m，H-16b)，1.77(1H，dd，J=10.2，3.2 Hz，H-21b)，1.76(1H，dd，J=5.6，13.0 Hz，H-31b)，1.69(6H，s，H-24，H-25)，1.65(6H，brs，H-29，H-30)，1.59(3H，s，H-19)，1.56(3H，s，H-20)，1.51(1H，t，12.8 Hz，H-5b)，1.38(3H，s，H-34)，1.32(1H，m，H-15b)，1.21(3H，s，H-35)，1.04(3H，s，H-14)，1.09(3H，d，J=6.8 Hz，H-12)，1.00(3H，d，J=6.8 Hz，H-13)；13C-NMR(CDCl3，125 MHz)譜數據δ：204.5(C-1)，83.2(C-2)，48.2(C-3)，43.3(C-4)，38(C2-5)，59.4(C-6)，172.9(C-7)，116.6(C-8)，192.5(C-9)，209.5(C-10)，42(C-11)，20.4(C3-12)，21.4(C2-13)，13.4(C3-14)，36.3(C3-15)，25.2(C2-16)，124.7(C-17)，131.1(C-18)，25.7(C-19)，17.7(C3-20)，27.1(C3-21)，122.3(C-22)，133.5(C-23)，25.9(C-24)，18(C3-25)，22.1(C2-26)，121.2(C-27)，132.5(C-28)，25.6(C-29)，17.8(C3-30)，30.2(C3-31)，90.1(C-32)，70.8(C-33)，26.9(C-34)，24(C3-35)。以上波譜數據與文獻[10]報道的基本一致，故確定化合物7為furohyperforin。

化合物8無色油狀，EI-MSm/z(%)：566 [M]+，結合核磁共振氫譜和碳譜確定相對分子質量為566；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)譜數據δ：5.06(1H，brt，H-17)，5.06(1H，brt，H-27)，4.94(1H，brt，H-22)，4.54(1H，t，J=10.4，5.6 Hz，H-32)，3.06(1H，dd，J=14.8，10.0 Hz，H-26a)，3.01(1H，dd，J=14.8，10.0 Hz，H-26b)，2.45(J=14.8，10.0 Hz，dd，J=10.8，13.0 Hz，H-31a)，2.43(1H，m，H-21a)，2.20(1H，m，H-16a)，2.07(1H，m，H-15a)，2.01(1H，m，H-5a)，1.92(1H，m，H-16b)，1.77(1H，m，H-21b)，1.76(1H，dd，J=13.0，5.6 Hz，H-31b)，1.74(1H，m，H-11)，1.69(2H，m，H-13)，1.66(3H，brs，H-24)，1.66(3H，brs，H-30)，1.66(3H，brs，H-19)，1.66(3H，brs，H-29)，1.58(3H，s，H-20)，1.53(3H，s，H-25)，1.51(1H，m，H-5b)，1.32(1H，m，H-15b)，1.27(2H，m，H-13)，1.22(3H，s，H-35)，1.09(3H，d，J=6.4 Hz，H-12)，1.05(3H，s，H-14)，1.38(3H，s，H-34)，0.77(3H，t，J=7.2 Hz，H-13′)；13C-NMR(CDCl3，125 MHz)譜數據δ：204.5(C-1)，83.3(C-2)，48.3(C-3)，43.3(CH-4)，38.0(CH2-5)，59.4(C-6)，172.9(C-7)，116.6(C-8)，192.8(C-9)，209.0(C-10)，48.7(CH-11)，16.5(CH3-12)，27.4(CH2-13)，13.4(CH3-14)，36.4(CH3-15)，25.3(CH2-16)，124.7(CH-17)，131.1(CH-18)，25.6(C-19)，17.7(CH3-20)，27.1(CH3-21)，122.3(CH-22)，133.5(CH-23)，25.9(C-24)，18.0(CH3-25)，22.2(CH2-26)，121.2(CH-27)，132.4(CH-28)，25.7(C-29)，17.8(CH3-30)，30.3(CH3-31)，90.1(CH-32)，70.8(CH-33)，26.9(C-34)，24(CH3-35)，11.5(CH3-13′)。以上波譜數據與文獻[11]報道的基本一致，故確定化合物8為furoadhyperforin。

化合物9白色粉末，EI-MSm/z(%)：[M]+為284；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)譜數據δ：2.33(2H，t，J=7.0 Hz，2-CH2)，1.63(2H，m，3-CH2-)，1.28(28H，m，4-17-CH2-)，0.88(3H，t，J=6.5 Hz，18-CH3)；1C-NMR(CDCl3，125 MHz)譜數據δ：179.4(1-C=O)，33.9(2-CH2)，31.9(16-CH2-)，29.6(15-CH2-)，24.6(3-CH2-)，22.7(17-CH2-)，14.33(18-CH3)，29～29.7(4-14-CH2)。以上波譜數據與文獻[12]報道一致，故確定化合物9為硬脂酸(octadecanoic acid)。

化合物10白色片狀粉末，EI-MSm/z(%)：452[M]+，424，396，368，340…，73，57，43等一系列失去亞甲基的脂肪族化合物的特征碎片峰；1H-NMR(CDCl3，400 MHz)δ：1.23～1.38(52H，m，-CH2-×26)，2.35(2H，t，J=7.2 Hz，-CH2-COOH)，1.63(2H，m，-CH2-)，0.86(3H，t，J=6.8 Hz，-CH3)。以上波譜數據與文獻[13]報道一致，故確定化合物10為正三十烷酸(n-triacontanoic acid)。

化合物11白色片狀晶體，EI-MSm/z(%)：57，71，85，99，113，254等一系列脫去CH2的碎片離子峰；1H-NMR(CDCl3) 譜數據顯示有2個末端甲基δ:0.88(6H，t)和δ:1.19～1.22(32H，16×-CH2-，m)。以上波譜數據與文獻[14]報道一致，故確定化合物11為正十八烷(n-octadecane)。

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基金項目：新疆維吾爾自治區十二五重大專項項目(編號：201130105-4)

作者簡介：許芳，女，碩士研究生

doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2016.04.001

中圖分類號：R284.2

文獻標志碼：A

文章編號：1004-2407(2016)04-0331-03

(收稿日期：2015-10-08)

Study on the chemical constituents of Hypericum ascyron L.

XU Fang1,2，GAO Wan1，XING Jianguo2，ZHAO Jun2，XU Fang2，JI Tengfei1*，GU Zhengyi2*

(1.State Key Laboratory of Bioactive Substance and Function of Natural Medicines，Institute of Materia Medica，Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College，Beijing 100050，China；2.Xinjiang Key Laboratory for Research and Development of Uighur Medicines, Xinjiang Institute of Materia Medica，Urumqi 830004，China)

Abstract:Objective To study the chemical constituents of Hypericum ascyron L．Methods Compounds were isolated and purified by TLC，silica gel，Sephadex-LH 20 column chromatography and HPLC.Their structures were identified on the basis of spectral data and physicochemical properties.Results 11 compounds were isolated and identified as:friedelin(1)，1-octacosanol(2)，hendecanoic acid(3)，octacosane(4)，hexacosanoic acid(5)，arachidic acid(6)，furohyperforin(7)，furoadhyperforin(8)，octadecanoicacid(9)，n-triacontanoic acid(10)，and n-octadecane(11).Conclusion All compounds were isolated from this genus for the first time．

Key words：Hypericum ascyron L.；Hypericum；chemical constituents

·中藥及天然藥物·

*共同通信作者：吉騰飛，男，研究員，碩士研究生導師;

顧政一，男，研究員，博士生導師