哌拉西林他唑巴坦鈉人體藥動學研究

范珠

（四川省內江市中醫醫院，四川 內江 641100）

哌拉西林他唑巴坦鈉人體藥動學研究

范珠

（四川省內江市中醫醫院，四川 內江 641100）

目的 建立檢測血漿中哌拉西林和他唑巴坦鈉含量的高效液相色譜（HPLC）法，并對兩種藥物的藥動學模型進行相關分析。方法 隨機抽取14名健康者進行試驗，給予兩種高、低2個劑量的給藥方案，測定其不同時間內的血藥濃度。結果 血漿樣品檢測質量濃度線性范圍哌拉西林與他唑巴坦鈉均為0．4～400 g／mL；將血漿樣品置－20℃以下的溫度存放，質量濃度下降的相對偏差均在15%以內；哌拉西林和他唑巴坦鈉的血藥峰濃度(Cmax)比與0～6 h藥時曲線下面積(AUC0－6h)比與質量濃度均呈正相關。結論 采用HPLC法檢測該藥血藥濃度，操作簡單，結果準確，血漿中該藥的人體內動力學行為與線性藥動學一致，不同劑量之間的差異無統計學意義。

哌拉西林；他唑巴坦鈉；高效液相色譜法；人體；藥代動力學

注射用哌拉西林他唑巴坦鈉為復方制劑，主要成分為他唑巴坦鈉和哌拉西林鈉(1∶4)，主要的適應證有糖尿病足、肺炎、皮膚及軟組織感染、盆腔炎、子宮內膜炎及闌尾炎等[1－3]。哌拉西林本身是一種抗生素，抗菌譜廣，但對酶類不穩定，易產生耐藥性；他唑巴坦是一種酶抑制劑，可輔助哌拉西林不被肽胺酶滅活，從而提高哌拉西林的抗耐藥作用；兩藥聯用可增加抗菌種類，增強抗菌活性[4－10]。本研究中主要采用高效液相色譜（HPLC）法檢測人體內血漿中的藥物濃度，研究藥物在人體中的藥動學行為，現報道如下。

1 儀器與試藥

1．1 儀器

日本島津SPD6高效液相色譜儀，包括四元輸液泵、自動進樣器、柱溫箱、紫外檢測器，采用千譜數據工作站；SIGMA 2K－15型高速低溫離心機；美國Milli－Q Plus純水器（美國密理博＜中國＞有限公司）。

1．2 試藥

注射用哌拉西林他唑巴坦鈉（Wyeth Lederle SPA，批號為0512301，規格為每瓶2．5 g，含哌拉西林2．0 g與他唑巴坦0．5 g)；哌拉西林（華北制藥股份有限公司，批號為0511911）；雷諾嗪（江西西峰藥業有限公司）；他唑巴坦鈉（石藥集團中諾藥業＜石家莊＞有限公司，批號為0510817）；茶堿緩釋片（哈藥集團制藥六廠，國藥準字H23021113）；乙腈和甲醇（DIMA公司）；試驗用水為去離子水，實驗室專業人員自制；其他藥品及試劑為分析純試劑。

2 方法與結果

2．1 色譜條件

2．1．1 哌拉西林

分析柱：Hypersil ODS（2）（大連伊力特分析儀器有限公司，200 mm×4．6 mm，5 μm）；預柱：C18保護柱(20 mm×4 mm)；柱溫：30℃；流動相：0．025 mol／L磷酸二氫鈉－甲醇（60∶40）；流速：1．0 mL／min；檢測波長：229 nm；靈敏度：0．001 AUFS。

2．1．2 他唑巴坦鈉

分析柱：Hypersil ODS（2）柱（大連伊力特分析儀器有限公司，200 mm×4．6 mm，5 μm）；預柱：C18保護柱(20 mm×4 mm)；柱溫：30℃；流動相：0．025 mol／L磷酸二氫鈉－甲醇（95∶5）；流速：1．0 mL／min；檢測波長：230 nm；靈敏度：0．005 AUFS。

2．2 血漿樣品處理

2．2．1 哌拉西林

取 1．5 mL離心管，精密量取 0．25 mL血漿，加入10 μL水、0．75 mL甲醇，混勻，離心5 min，轉速為10 000 r／min，取出上清液15 μL進行HPLC分析。

2．2．2 他唑巴坦鈉

他唑巴坦鈉：取1．5 mL離心管，精密量取0．25 mL血漿，加入10 μL水、0．25 mL乙腈，混勻，離心10 min，轉速為 10 000 r／min，取出上清液 20 μL進行 HPLC分析。

2．3 方法學考察

2．3．1 標準曲線制備

取若干空白血漿，均為0．25 mL，加入不同質量濃度的哌拉西林標準溶液10 μL，配成6份血漿樣品，得質量濃度分別為1，5，25，50，100，200 mg／L的系列溶液，按血漿樣品處理方式進行處理，記錄色譜圖。同法制備他唑巴坦鈉標準溶液，記錄色譜圖。血漿樣品質量濃度線性范圍哌拉西林與他唑巴坦鈉均為0．4～400 μg／mL。

2．3．2 精密度與回收率試驗

取0．5 mL的空白血漿，加入哌拉西林和他唑巴坦鈉溶液50 μL，分別制備高、中、低3個質量濃度的樣品。其中，哌拉西林的質量濃度分別為1，20，200 μg／mL，他唑巴坦鈉的質量濃度分別為1，10，50 μg／mL。每個質量濃度制備6份樣品溶液，取當天的標準曲線求樣品濃度，并與加入質量濃度相比求出準確度和精密度及提取回收率。提取回收率＝提取后的峰面積／未經提取的峰面積）。結果見表1。

2．3．3 樣品穩定性試驗

按標準曲線制備法配制高、中、低3個質量濃度的樣品，計算出質量濃度。將另外3份樣品分別置室溫4，24，48 h，4℃及－80℃下進行反復凍融3次和60 d，再次測定樣品質量濃度。結果顯示，將血漿樣品置－20℃以下的溫度存放，質量濃度下降的相對偏差均在15%以內，表明樣品在測試過程中比較穩定，存放溫度不會影響試驗結果的準確性。

表1 精密度與回收率試驗結果（s）

表1 精密度與回收率試驗結果（s）

藥物成分他唑巴坦鈉哌拉西林加入量（ g／mL）1 10 50 1 20 200方法回收率（%）95．3±4．8 102．7±2．7 98．7±2．8 106．7±5．8 102．8±2．6 99．8±2．6提取回收率（%）93．6±2．7 92．6±1．9 96．3±2．5 97．4±2．5 93．7±2．5 95．8±2．6日內精密度 RSD（%）2．5 2．1 2．1 3．8 2．3 2．4日間精密度 RSD（%）11．3 2．7 2．2 12．8 3．1 3．6

2．4 人體藥動學研究

2．4．1 研究對象

隨機抽取14名健康體檢者，男7例，女7例；年齡20～25歲；體重46～70 kg；身高158～178 cm。所有研究對象在進行試驗前均進行全面體檢，所有指標均顯示正常。在進行試驗前2周均停止使用任何藥物，試驗過程中禁止吸煙、飲酒及食用高脂肪食物等。所有研究對象對本次試驗均知悉，且一般資料比較差異無統計學意義（P＞0．05），具有可比性。

2．4．2 給藥方案

試驗當天給予患者青霉素皮膚過敏試驗，結果顯示陰性即可進行試驗。使用試驗制劑（規格為每支1．25 g）溶于0．9%氯化鈉注射液100 mL靜脈滴注，45 min內滴完，分別在滴注時及滴注后的第0．08，0．25，0．5，0．75，1，1．5，2，2．5，3，4，6 h時取血4 mL，離心5 min，轉速為10 000 r／min。取1 mL血漿，作為待測樣品，置－70℃處存放。1周后再次進行試驗。

2．4．3 血藥濃度和藥動學參數

結果顯示，給予研究對象靜脈滴注哌拉西林1．0 g和2．0 g的劑量比為50%，血藥峰濃度(Cmax)比和0～6 h藥時曲線下面積(AUC0－6h)比分別為48%和45%，呈正相關；給予研究對象靜脈滴注他唑巴坦鈉0．25 g和0．5 g的劑量比為50%，Cmax比和 AUC0－6h比分別為47%和43%，呈正相關。14名研究對象在45min內的藥動學參數見表2。

表2 45 min內14名研究對象藥動學參數（s,n＝14）

表2 45 min內14名研究對象藥動學參數（s,n＝14）

參數哌拉西林 他唑巴坦鈉達峰時間(Tmax，h)血藥峰濃度(Cmax，mg·L－1) 0～6 h藥時曲線下面積[AUC0－6h，mg·(L·h)－1] 0～∞藥時曲線下面積[AUC0－∞，mg·(L·h)－1]末端消除半衰期(t1／2，h)清除率(Cl，L／h) 1．0 g 0．74±0．06 74．8±19．5 104．75±29．7 106．4±28．0 1．3±0．5 10．8±2．6 2．0 g 0．74±0．06 152．7±23．8 223．6±46．8 227．4±46．8 1．3±0．5 9．3±2．6 0．25 g 0．74±0．06 14．8±2．8 20．6±3．8 22．8±4．8 1．8±0．7 12．8±2．3 0．5 g 0．76±0．00 32．8±5．8 47．7±8．9 48．6±9．6 0．95±0．18 10．8±1．8

3 討論

哌拉西林和他唑巴坦的藥理作用差別較大，HPLC法可對血漿內的藥物進行檢測。相關文獻顯示，使用HPLC法測定血漿中的他唑巴坦和哌拉西林水平，兩種藥物在紫外區末端吸收最大，聯合使用可明顯改變干擾大的現象，也可達到定量要求[11－13]。

另外，本研究中加入了茶堿作為內標物，試驗結果更加準確。本研究中藥動學數據結果與文獻[14－16]結果相似，證明了哌拉西林、他唑巴坦鈉的消除半衰期并不受到劑量和滴注時間的影響。給予研究對象靜脈滴注哌拉西林1．0 g和2．0 g的劑量比為50%，Cmax比和 AUC0－6h比分別為48%和45%，呈正相關；給予研究對象靜脈滴注他唑巴坦鈉0．25 g和0．5的劑量比為50%，Cmax比和 AUC0－6h比分別為47%和43%，呈正相關。

綜上所述，哌拉西林和他唑巴坦體內藥動學過程可預測，本研究結果為該藥臨床研究和應用提供了參考。

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Pharmacokinetic Study of Piperacillin Tazobactam Sodium

Fan Zhu
(Neijiang Chinese Medicine Hospital,Neijiang,Sichuan,China 641100)

Objective To establish an HPLC method for the content detection of piperacillin and tazobactam sodium,and to conduct correlation analysis on the pharmacokinetics model of the two drugs．M ethods 14 healthy subjects were randomly selected and given high and low dose regimen．The plasma concentrations at different times were determined．Results The linear range of plasma samples of the piperacillin and tazobactam sodium were both 0．4－400 μg／mL;plasma samples stored below －20℃,the relative deviation decreased within 15%;Cmaxof piperacillin and tazobactam sodium showed positive correlation with AUC0－6hand concentrations．Conclusion The HPLC blood concentration determination of this drug is simple and relatively accurate．The dynamic study shows that the plasma of human dynamics is consistent with the linear dynamic of this drug,and the dose difference does not have statistical significance．

piperacillin;tazobactam sodium;HPLC;human;pharmacokinetics

R969．1；R978．1＋1

A

1006－4931(2016)09－0005－04

2015－08－13；

2015－12－08)