SYSMEX XN-2000全自動血細胞分析儀對有核紅細胞分析的應用評價

王永志

(首都醫科大學全科醫學與繼續教育學院北京市延慶區醫院檢驗科　102100)

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·臨床研究·

SYSMEX XN-2000全自動血細胞分析儀對有核紅細胞分析的應用評價

王永志

(首都醫科大學全科醫學與繼續教育學院北京市延慶區醫院檢驗科102100)

摘要:目的探討Sysmex XN-2000全自動血細胞分析儀(簡稱XN-2000)計數外周血有核紅細胞(NRBC)的方法學特性和臨床應用價值。方法應用XN-2000對116例外周血標本進行NRBC檢測，同時用顯微鏡(鏡檢法)對同一份外周血的NRBC百分率進行計數。以鏡檢法為參考標準，比較不同方法的計數結果。結果XN-2000檢測NRBC的敏感性為98.78%，特異性為94.12%，假陽性率為2.47%，假陰性率為3.03%，檢測結果重復性好，低值變異系數(CV)為5.4%，中、高值CV均小于5%。與顯微鏡鏡檢法計數外周血中NRBC數量有極好的相關性(r=0.976)，且兩者差異無統計學意義(P>0.05)。結論XN-2000能快速、準確、有效地自動計數外周血NRBC。

關鍵詞:全自動血細胞分析儀；有核紅細胞；準確性

有核紅細胞(NRBC)即幼稚紅細胞。健康成年人外周血中NRBC計數結果通常為陰性，在胎兒、新生兒或幼兒外周血中少量出現屬生理改變[1]。若成年人外周血中出現NRBC時，通常為病理狀態，常見于一些溶血性貧血、急性大量失血、嚴重的組織缺氧、急慢性白血病、惡性腫瘤、骨髓纖維化癥等多種疾病[2]。血液中的NRBC一般為晚幼紅細胞，但在某些血液系統疾病如急性紅血病(M6)、急性髓性白血病(AML)時也可出現中幼紅細胞或更幼稚的紅細胞[3]。因此，準確計數血液中NRBC，對某些疾病的診斷治療及預后觀察，具有重要臨床實踐意義[4]。長期以來，顯微鏡下手工計數瑞士染色血涂片被認為是計數NRBC的經典方法，但其準確度和精密度受計數細胞數量的限制和操作人員主觀因素的影響。目前，本院采用XN-2000全自動模塊式血液體液一體機檢測NRBC，為了解XN-2000對外周血NRBC計數的準確性及異常提示信息的可靠性，本研究將XN-2000檢測NRBC結果與人工顯微鏡鏡檢法進行了比較和評價。

1資料與方法

1.1一般資料隨機選擇2014年1月至2015年10月本院血液科、腫瘤科、腎內科及兒科等科室的住院患者116例，其中男74例，女42例，血液病患者59例，非血液病患者57例，年齡2～64歲，平均41.3歲。于清晨空腹采集上述患者靜脈血2 mL。

1.2儀器與試劑XN-2000全自動血細胞分析儀及其配套試劑和質控品由日本Sysmex公司生產；乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)血液抗凝管，美國BD公司生產；瑞氏-吉姆薩復合染液(BASO染液)，Olympus-BX43光學顯微鏡,國聯在線M99-M醫學圖像處理系統等。

1.3NRBC計數方法

1.3.1XN-2000儀器法嚴格執行標準操作規程，在測定樣本前對儀器進行日常清洗及維護，按要求進行室內質控(質控品XN CHECK，高值、中值、低值三水平)，結果均在控后，檢測EDTA-K2抗凝血標本，并在4 h內檢測完畢。

1.3.2顯微鏡鏡檢法由經過專業培訓的細胞形態室主管技師按全國臨床檢驗操作規程操作，用顯微鏡在瑞氏染色血涂片的體尾交界處分類計數200個白細胞的同時記錄所見到的NRBC數量，計數結果以NRBC/100WBC表示。

2結果

2.1重復性試驗為了解XN-2000計數NRBC的批內重復性(精密度)，各取NRBC計數百分數處于高中低值范圍內的標本1份，由專業人員在30 min內計數5次，計算均值及變異系數，結果顯示XN-2000儀器重現性良好，低值NRBC%的CV值為5.1%，高值、中值NRBC%CV值均小于5%。見表1。

表1　XN-2000全自動血細胞分析儀計數NRBC的重復性試驗結果

2.2穩定性試驗取NRBC計數百分數處于高、中、低值范圍內的標本各1份，分別于室溫條件下放置1、2、4、6、8、12、24、48 h后測定NRBC，結果表明臨床標本在48 h內NRBC計數結果穩定,其變化差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

表2　XN-2000全自動血細胞分析儀計數NRBC的穩定性試驗結果

2.3XN-2000計數NRBC與顯微鏡鏡檢法結果比較以顯微鏡鏡檢法為參照標準，在116例受檢標本中，經XN-2000全自動血細胞分析儀計數NRBC陽性83例，其中2例手工鏡檢法為陰性；33例XN-2000計數陰性標本中1例手工鏡檢法陽性；XN-2000計數NRBC敏感性為98.78%(81/82)，特異性為94.12%(32/34)，假陽性率2.47%(2/81)，假陰性率3.03%(1/33)。見表3。

表3　XN-2000全自動血細胞分析儀計數NRBC與顯微鏡鏡檢法結果比較(n)

另對XN-2000儀器法和手工鏡檢法計數NRBC均為陽性的81例結果進行相關性分析，設XN-2000測定值為X，手工法測定值為Y，得回歸方程Y=0.963X-0.178，相關系數r=0.976。XN-2000與鏡檢結果進行配對樣本t檢驗，差異無統計學意義(P>0.05)。

3討論

NRBC在病理狀態下由于異常增生的細胞對骨髓的擠壓和充斥、骨髓-血液屏障功能異?；蛩柰庠煅仍蚴蛊涮崆搬尫诺酵庵苎?。由于其具有與淋巴細胞相似體積和結構，并且不能被溶血素破壞，以往的儀器對于這類細胞往往會誤計，如此不僅造成了病理性標本的漏報，而且還引起白細胞假陽性升高，常需要通過顯微鏡計數的方法加以校正[5]，但這種方法操作相對繁瑣，受血片推片和染色質量、細胞分布差異和人為主觀因素等影響準確度和精密度較低，還需要有經驗的計數人員，且操作不易標準化。近年來，隨著科學技術的發展和臨床的需要，全自動血液分析儀越來越多地用于外周血中NRBC計數。

XN-2000作為Sysmex公司最新一代熒光流式細胞計數儀，在進行全血細胞計數時無需更改測試通道和進樣模式便可同時完成NRBC計數，結果以百分比和絕對值兩個參數報告，并通過散點圖直觀顯示NRBC的數量和分布狀況。同時還可通過NRBC計數結果對白細胞計數結果進行校正，從而得到正確的白細胞數目，為臨床對患者病情判斷提供準確有力的依據。XN-2000計數NRBC的原理為： Lysercell WNR溶血劑中的表面活性成分溶解紅細胞的同時在白細胞的細胞膜上打通微孔導致胞質滲出，使除嗜堿性粒細胞外的其他白細胞都以膜包核復合顆粒的形式存在，由于白細胞的形態、核染色質結構、胞質顆粒等各不相同，利用前向和側向散射光可捕捉其形態結構上的差異，根據這些特點可將嗜堿性粒細胞和其余的白細胞區分； Fluorocell WNR中的次甲基熒光染料對白細胞及NRBC的細胞核和胞質顆粒進行染色，NRBC無胞質顆粒，核染色質也比其他白細胞致密，在上述兩種試劑的作用下根據細胞形態的差異和熒光強度的不同，將NRBC和其他的白細胞區分開來[6]。

本研究結果顯示，Sysmex XN-2000計數NRBC在高、中、低值標本都有較高的重復性。另外，為了避免在日常工作中由于標本未能及時送檢對檢驗結果造成影響，本文進行了NRBC標本穩定性研究，結果顯示標本在48 h內測定結果穩定。且儀器測定結果與手工鏡檢法比較有很好的相關性(r=0.976)，兩種方法所得數據經統計學處理差異無統計學意義(P>0.05)，表明XN-2000基本可以代替鏡檢法檢測外周血NRBC。XN-2000計數NRBC敏感性為98.78%，特異性為94.12%。在NRBC計數結果較低(0.1%～1.9%)時，XN-2000測定出現少數假陽性結果(2.47%)，一方面原因有可能是儀器對細胞的辨別誤差。另一方面原因從計數細胞數目來看，手工鏡檢法只是記錄了分類200個白細胞時發現的NRBC數目，而儀器法則是計數吸入標本中的所有血細胞的數目，其計數細胞數量大大高于手工法，所以發現幼紅細胞的概率相對高，且血細胞在涂片上分布不均、計數范圍的選擇和操作人員的主觀因素等都影響NRBC的檢出率[7-8]。至于少量假陰性結果(3.03%)，可能是手工分類時對小淋巴細胞、大血小板等的誤判所致。

綜上所述，XN-2000檢測外周血NRBC準確度高，重復性好，能同時提供絕對值和百分數兩種參數并對白細胞計數結果進行校正，且檢測快速，操作簡便，值得在臨床推廣。

參考文獻

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[8]陳海生，張勁豐，鄔華坤，等．外周血有核紅細胞自動檢測應用研究[J]．現代醫院，2011，11(6)：69-70．

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.13.044

文獻標識碼：A

文章編號：1673-4130(2016)13-1852-02

(收稿日期：2016-03-11修回日期：2016-05-20)