兩種方法檢測EB病毒的結果比較

李海平，杜　昆

(湖北省荊州市第一人民醫院：1.核醫學科；2.檢驗科　434000)

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兩種方法檢測EB病毒的結果比較

李海平1，杜昆2△

(湖北省荊州市第一人民醫院：1.核醫學科；2.檢驗科434000)

摘要:目的比較酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和熒光定量聚合酶鏈反應(PCR)檢測EB病毒(EBV)的特點。 方法采集930例上呼吸道感染患者血液標本和咽拭子標本，分別用ELISA和熒光定量PCR檢測抗EBV-IgM和EBV DNA。結果ELISA檢測IgM陽性標本116例，陽性率為12.47%；PCR檢測DNA陽性標本421例，陽性率為42.27%，二者比較差異有統計學意義(P<0.01)。不同年齡階段兩種檢測方法比較，<1歲時兩種檢測方法差異無統計學意義(P>0.05)，其他年齡階段兩種檢測方法差異均有統計學意義(P<0.05)。結論熒光定量PCR檢測EBV有較高的靈敏度，適用于檢測大于或等于1歲患者，ELISA適用于檢測小于1歲患者。

關鍵詞:EB病毒；酶聯免疫吸附試驗；熒光定量PCR

EB病毒(EBV)是一種普遍存在，主要感染人類口咽部上皮細胞和B淋巴細胞的一種皰疹病毒，其感染率及發病情況與地區、環境和社會經濟等因素有著密切的關系[1]。近年來，隨著社會經濟的發展及人們健康意識的提高，EBV的流行特征也出現了新的變化。EBV是傳染性單核細胞增多癥的主要病原體，同時也與Burkitt淋巴瘤、Hodgkin病和鼻咽癌等疾病密切相關[2-4]。兒童感染EBV后癥狀輕微，甚至無癥狀[5]，極易造成漏診，從而對兒童的健康造成嚴重的危害。因此，對EBV的早期檢測不但有利于患者早期診斷和早期治療，而且可以降低并發癥發生率，具有重要的臨床價值。本研究采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)和熒光定量聚合酶鏈反應(PCR)技術檢測930例本院住院或門診收集的上呼吸道感染患者臨床標本，以分析兩種方法檢測EBV的臨床應用價值。

1資料與方法

1.1一般資料930例上呼吸道感染患者均為本院住院或門診患者，其中男564例，女366例，年齡16 d至70歲，平均(10.26±8.98)歲。

1.2檢測方法采集患者靜脈血3 mL并分離血清，采用ELISA檢測EBV-IgM(試劑購自意大利Diesse Diagnostica Senese SPA公司)，具體操作按照試劑盒說明書進行。無菌咽拭子采集患者咽喉分泌物，熒光定量PCR檢測EBV DNA(試劑購自達安基因股份有限公司)，具體操作按照試劑盒說明書進行。

1.3統計學處理采用SPSS19.0統計軟件進行統計分析，計數資料以率表示，組間比較采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1兩種方法檢測結果比較930例上呼吸道感染患者中，ELISA檢測IgM陽性標本116例，陽性率為12.47%；熒光定量PCR檢測DNA陽性標本421例，陽性率為42.27%，兩種方法檢測結果比較，差異有統計學意義(χ2=18.355，P<0.01)。見表1。

表1　兩種方法檢測結果比較(n)

2.2不同年齡階段兩種方法檢測結果比較不同年齡階段兩種方法檢測結果比較，<1歲時兩種檢測方法差異無統計學意義(P>0.05)，其他年齡階段兩種檢測方法差異均有統計學意義(P<0.05)。ELISA對小于1歲患兒有較高的檢出率，熒光定量PCR對大于或等于3歲患者有較高的檢出率。見表2。

表2　不同年齡階段兩種方法檢測結果比較[n(%)]

2.3不同性別兩種方法檢測結果比較對不同性別兩種方法檢測結果進行χ2檢驗，熒光定量PCR在男性和女性中的EBV檢出率均高于ELISA,差異均有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3　不同性別兩種方法檢測結果比較[n(%)]

3討論

EBV主要經過唾液傳播，在全世界廣泛分布。流行病學調查顯示不同地區、不同環境、不同的經濟狀況和不同人群，其感染狀況有所不同。在經濟發達的地區EBV感染率較低，感染年齡也偏大；相反，在經濟落后的地區EBV感染率較高，其感染年齡也偏小。兒童感染EBV后癥狀輕微，甚至無癥狀，極易造成漏診，從而對兒童的健康造成嚴重的危害。所以，早期診斷EBV引起的疾病對于預防和控制該病毒傳播具有重要意義。

檢測病毒的金標準是進行病毒分離和培養，但該法對實驗設備和技術要求較高，并且檢測周期長、陽性率低，并不適合臨床上對病毒的檢測，主要用于實驗室研究。目前，反轉錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)技術已成為診斷病毒感染的一種常用方法，但該法造成的假陽性和假陰性率均較高。近幾年發展起來的熒光定量PCR法檢測病毒，不僅可以減少假陽性率和假陰性率，而且與常規RT-PCR技術相比，無論從敏感性和特異性上都更具有優勢[6-7]。本研究比較了ELISA和熒光定量PCR對EBV的檢測情況，ELISA檢測IgM陽性標本116例，陽性率為12.47%，熒光定量PCR檢測DNA陽性標本421例，陽性率為42.27%，二者比較差異有統計學意義(P<0.01)，表明熒光定量PCR檢測EBV的敏感性高于ELISA。進一步比較這兩種方法對不同年齡段EBV檢測情況，結果表明小于1歲時兩種檢測方法差異無統計學意義(P>0.05)，相反，其他年齡階段兩種檢測方法差異均有統計學意義(P<0.05)。ELISA對小于1歲患兒有較高的檢出率，熒光定量PCR對大于或等于3歲患者有較高的檢出率。最后，比較兩種方法在不同性別間檢測情況，證實熒光定量PCR在男性和女性中的EBV檢出率均高于ELISA。雖然熒光定量PCR檢測EBV檢出率高于ELISA，但該法需要的儀器昂貴，且對實驗室條件要求較高，不適宜于基層單位開展。而ELISA操作簡單，費用較低，適用于小于1歲患兒。

綜上所述，熒光定量PCR檢測EBV具有較高的敏感性，ELISA雖然敏感性低，但適用于檢測小于1歲患兒。

參考文獻

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[2]Auwaerter PG.Infectious mononucleosis in middle age[J].JAMA,1999,281(5):454-459.

[3]Tattevin P,Le Tulzo Y,Minjolle S,et al.Increasing incidence of severe Epstein-Barr virus-related infectious mononucleosis:surveillance study[J].J Clin Microbiol,2006,44(5):1873-1874.

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[5]Biggar RJ,Henle G,Bocker J,et al.Primary Epstein-Barr virus infections in African infants.Ⅱ.clinical and serological observations during seroconversion[J].Int J Cancer,1978,22(3):244-250.

[6]陳宗波，董永綏，方峰，等．應用逆轉錄聚合酶鏈反應檢測腸道病毒感染[J]．中華兒科雜志，1997，35(11)：38-41．

[7]徐大鵬，劉建榮，宋淑娥，等．實時熒光PCR技術在手足口病病毒核酸檢測中的應用[J]．首都公共衛生，2010，4(6)：243-245．

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.13.065

文獻標識碼：B

文章編號：1673-4130(2016)13-1886-02

(收稿日期：2016-02-15修回日期：2016-04-02)

△通訊作者,E-mail：dukun818110@163.com。

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