楊華 趙婭南 劉同方
胰腺癌是我國常見的一種惡性腫瘤。近年來,針對胰腺癌的病因學和分子生物學進行了大量的研究,發現半乳凝素(Galectin)在腫瘤的發生發展過程中發揮著重要作用,包括發育、分化、細胞間粘附、細胞間基質相互作用、生長調節、細胞凋亡、RNA剪接和腫瘤轉移[1-5],其中半乳凝素-3研究最為廣泛。研究證明半乳凝素-3可以在胰腺癌中檢測到,可以作為一種潛在的胰腺癌生物標志物[6-7],且其與胰腺癌的預后有關[8]。本研究擬通過檢測血清中半乳凝素-3的含量,評價其在胰腺癌早期診斷的臨床應用價值,以期為胰腺癌的早期診斷提供一種潛在的輔助檢測方法。
經醫院倫理委員會同意,本研究選自2015年6月—2017年6月本院的胰腺癌患者78例,平均年齡為(58±11)歲,其中女性31例,男性47例。慢性胰腺炎患者46例,平均年齡為(56±13)歲,其中女性19例,男性27例。胰腺癌患者均經病理學確診,未接受過任何化療或放療,且無與本研究相關的重大疾病。健康對照人群募集自本院健康體檢中心,各項血液學和影像檢查指標的健康人群101例,其中女性44例,男性57例,平均年齡為(54±10)歲,經統計學分析,各組年齡與性別比較,差異均無統計學意義(P>0.05)。
采集入組人群的清晨空腹血,常規離心后獲得血清。CA199檢測試劑盒購自羅氏中國診斷有限公司,校標后,在羅氏E170全自動免疫分析儀上機檢測,原理為電化學發光法,正常參考值為37 U/ml。半乳凝素-3 Elisa檢測試劑盒購自上海西唐生物科技有限公司。采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。血清5倍稀釋后,按照操作說明,在450 nm處檢測其OD值,然后根據標準曲線計算其相應的濃度。試劑盒的靈敏度小于0.1 ng/ml,板內和板間變異系數均小于10%。
本研究數據均采用SPSS 20.0進行統計分析,CA199和半乳凝素-3的含量均以中位數表示,多組間的分析比較采用單因素方差分析,如數據呈正態分布,使用LSD檢驗,如數據呈非正態分布,則使用Tamhane’s T2檢驗。CA199和半乳凝素-3的聯合檢測分析采用二元logistic回歸法。診斷價值的評價使用受試者工作特征曲線(receiver operator characteristic curve,ROC)。聯合檢測和單個指標檢測曲線下面積(area under curve,AUC)的對比使用Z score檢驗。P<0.05為差異具有統計學意義。
與健康對照組相比較,慢性胰腺炎組的CA199和半乳凝素-3差異均具有統計學意義(P<0.05),胰腺癌組的CA199和半乳凝素-3差異也均具有統計學意義(P<0.05)。與慢性胰腺炎組相比較,胰腺癌組的CA199和半乳凝素-3差異也均具有統計學意義(P<0.05)。見表1。
當兩種指標單獨用于區分健康對照組和胰腺癌組時,CA199的曲線下面積為0.72(95%CI為0.61~0.83),診斷靈敏性和特異性分別為69.23%和70.30%,半乳凝素-3的曲線下面積為0.83(95%CI為0.69~0.92),診斷靈敏性和特異性則分別為71.79%和81.19%;當兩種指標單獨用于區分慢性胰腺炎組和胰腺癌組時,CA199的曲線下面積為0.63(95%CI為0.54~0.71),診斷靈敏性和特異性分別為61.53%和67.39%,半乳凝素-3的曲線下面積為0.75(95%CI為0.66~0.84),診斷靈敏性和特異性則分別為73.08%和71.74%。見表2。
表1 CA199和半乳凝素-3在各組血清含量的比較[中位數(25%,75%)]
表2 評價CA199和半乳凝素-3單獨對于胰腺癌的臨床價值
當兩種指標聯合用于區分健康對照組和胰腺癌組時,其曲線下面積為0.89(95%CI為0.84~0.95),診斷靈敏性和特異性分別為83.12%和85.15%,結果見圖1A,其曲線下面積與兩者單獨檢測時相比,均顯著升高(P<0.05);當兩種指標聯合用于區分慢性胰腺炎組和胰腺癌組時,CA199的曲線下面積為0.80(95%CI為0.69~0.91),診斷靈敏性和特異性分別為79.49%和83.17%,結果見圖1B,其曲線下面積與兩者單獨檢測時相比,均顯著升高(P<0.05)。
研究發現半乳凝素-3可以通過調節細胞增殖、抗凋亡、介導細胞黏附和參與新生血管的形成,進而廣泛參與到腫瘤的發生發展過程中[9-12]。對某些腫瘤的早期診斷、療效評價和預后評估具有重要意義[13]。免疫組化結果證明胰腺癌組織中半乳凝素-3的mRNA和蛋白均呈高表達,且其表達水平與胰腺癌的分期及預后相關[14]。血清學檢測結果表明正常人、胰腺炎及胃腸道腫瘤患者血清標本中均未檢出半乳凝素-3,且胰腺癌陽性率僅為30%。與本研究結果不一致的是,其檢測試劑盒靈敏度較低,而本研究的檢測試劑盒靈敏度小于0.1 ng/ml。另有其他研究表明胰腺癌患者血清半乳凝素-3明顯高于健康人及良性胰腺疾病患者,其診斷胰腺癌的敏感性與CAl9-9相仿,且與CEA及CAl9-9均無相關性[15]。其聯合CAl9-9檢測,可提高診斷敏感性,表明半乳凝素-3對胰腺癌的診斷具有較好的臨床價值,其檢測結果與本研究相似[16-17]。
本研究證明血清半乳凝素-3可以作為一種具有潛在價值的胰腺癌輔助診斷標志物,且與CA199聯合檢測,具有較好的臨床應用價值。然而,本研究尚存在一定的不足之處:(1)本研究為回顧性研究,在進一步研究中需進行前瞻性驗證兩者的臨床應用價值;(2)本研究樣本量較小,導致研究結果可能存在一定的偏差,需進行大樣本量進行驗證;(3)本研究未對胰腺癌進行分期,其早期診斷價值未進行評價。
圖1 A. CA199和半乳凝素-3聯合檢測區分健康對照組和胰腺癌組;B. CA199和半乳凝素-3聯合檢測區分慢性胰腺炎組和胰腺癌組