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9~10周齡CB6F1與B6CF1小鼠血生化、主要臟器質量及臟器系數測定*

2018-08-20 09:48施赫赫夏冠玲劉盛來
實驗動物科學 2018年1期
關鍵詞:雌性雄性品系

劉 科 施赫赫 楊 林 夏冠玲 劉盛來 王 剛

(廣東省醫學實驗動物中心,佛山 528248)

CB6F1小鼠和B6CF1小鼠分別為近交系雌性BALB/c和近交系雄性C57BL/6,及近交系雌性C57BL/6和近交系雄性BALB/c的雜交F1代。目前,雜交F1代小鼠在干細胞、移植免疫、細胞動力學、單克隆抗體等研究中已經廣泛應用[1]。CB6F1小鼠和B6CF1小鼠作為常用F1品系,主要研究有:紅白血病模型[2-3]、異基因NK細胞減輕移植物抗宿主病的研究[4-5]、移植物抗實體瘤的研究[6-7]、制備遺傳修飾小鼠模型和短期致癌性研究[8-9]等。本實驗通過BALB/c和C57BL/6相互雜交,分別獲得CB6F1小鼠和B6CF1小鼠,對9~10周齡成年CB6F1小鼠和B6CF1小鼠的血生化指標、主要臟器質量和臟器系數進行測定和分析,為相關科研實驗提供參考數據。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

SPF級BALB/c和C57BL/6由廣東省醫學實驗動物中心提供,合格證[SCXK(粵)2013-0002],雜交繁育獲得CB6F1小鼠和B6CF1小鼠。9~10周齡,每個品系40只,雌雄各半,共80只。飼養在屏障系統中,空氣潔凈度7級,室溫20~25 ℃,濕度40%~70%,每日光照10 h,動物自由采食和飲水。飼料成分:粗蛋白21.3%,粗纖維3.5%,粗灰分7.2%,粗脂肪4.8%,鈣1.3%,磷0.9%,鈉0.24%。飼料經60Co輻照滅菌、墊料經高壓消毒處理,飲用水是凈化水系統制備的純凈水(RO水),添加鹽酸酸化處理,至pH=2~3。

1.2 主要儀器

德國賽多利斯電子分析天平(BS223S),上海安亭科學儀器廠生產的低速大容量離心機(TDL-5-A),意大利愛康公司生產的全自動血液生化分析儀(ECHO),用激光計數法檢驗。

1.3 測定方法

隨機選取9~10周齡SPF級CB6F1與B6CF1小鼠各40只,雌雄各半??崭?2 h,分別稱體質量,麻醉后摘眼球采血,運用全自動生化分析儀測定血生化指標,頸椎脫臼處死,迅速解剖取出主要臟器(心、肝、脾、肺、胃、左腎、右腎、腎上腺、膀胱、睪丸、附睪、子宮、卵巢),剔除脂肪和筋膜,用濾紙吸干表面的液體,心臟需剪開,用濾紙吸干血液,稱其質量并計算臟器系數。臟器系數(%)=臟器質量(g)/體質量(g)×100。

1.4 統計方法

2 結果

2.1 血生化指標

血生化指標測定結果見表1,CB6F1小鼠雌性AST、ALP、ALB、A/G、BUN、CREA 顯著高于雄性,GLOB、TBIL、GLU、CHOL、TG顯著低于雄性(P<0.05),其余無顯著性差異(P>0.05)。B6CF1小鼠雌性GLOB、TBIL、BUN、CREA、CHOL 顯著高于雄性,ALP、ALB、A/G、TG顯著低于雄性(P<0.05),其余無顯著性差異(P>0.05)。

注:同品系雄性與雌性比較*P<0.05,B6CF1與CB6F1同性別比較△P<0.05

Note: Female compared with male in same strain*P<0.05,CB6F1 compared with B6CF1 in same gender△P<0.05

同性別不同品系之間,雌性CB6F1小鼠ALP、ALB、A/G、TBIL、CHOL、TG顯著高于B6CF1小鼠,GLOB、GLU、BUN、CREA顯著低于B6CF1小鼠(P<0.05),其余無顯著性差異(P>0.05)。雄性CB6F1小鼠TP、GLOB、TBIL、GLU、CHOL顯著高于B6CF1小鼠,AST、ALP、A/G、BUN、CREA、TG顯著低于B6CF1小鼠(P<0.05),其余無顯著性差異(P>0.05)。

2.2 主要臟器質量及臟器系數

從表2可知,雌性CB6F1小鼠體質量、心臟、肝臟、肺臟、左腎、右腎、膀胱顯著小于雄性(P<0.05)。雌性B6CF1小鼠體質量、左腎、右腎顯著小于雄性,脾臟、胃顯著大于雄性(P<0.05),其余無顯著性差異(P>0.05)。

同性別不同品系臟器相比,雌性B6CF1小鼠脾臟、肺臟、右腎顯著小于CB6F1小鼠,卵巢顯著大于CB6F1小鼠(P<0.05),其余臟器沒有顯著性差異(P>0.05)。雄性B6CF1小鼠體質量、心臟、肝臟、脾臟、肺臟、胃、左腎、右腎、睪丸均顯著小于CB6F1小鼠(P<0.05),其余臟器沒有顯著性差異(P>0.05)。

從表3可知,雌性CB6F1小鼠心臟、脾臟、肺臟、胃、腎上腺臟器系數顯著大于雄性,左腎、右腎、膀胱顯著小于雄性(P<0.05)。雌性B6CF1小鼠肝臟、脾臟、肺臟、胃、腎上腺臟器系數顯著大于雄性,右腎顯著小于雄性(P<0.05),其余無顯著性差異(P>0.05)。

同性別不同品系臟器系數相比,雌性B6CF1小鼠脾臟、肺臟、右腎顯著小于CB6F1小鼠,卵巢顯著大于CB6F1小鼠(P<0.05),其余沒有顯著性差異(P>0.05)。雄性B6CF1小鼠肝臟、脾臟、肺臟、左腎、右腎均顯著小于CB6F1小鼠、睪丸顯著大于CB6F1小鼠(P<0.05),其余沒有顯著性差異(P>0.05)。

表2 9~10周齡CB6F1小鼠與B6CF1小鼠主要臟器質量Table 2 The main organ weight of CB6F1 mice andB6CF1 mice in 9th to 10th week

注:同品系雄性與雌性比較*P<0.05,B6CF1與CB6 F1同性別比較△P<0.05

Note: Female compared with male in same strain*P<0.05,CB6F1 compared with B6CF1 in same gender△P<0.05

表3 9~10 周齡CB6F1小鼠與B6CF1小鼠主要臟器系數Table 3 The main organ coefficient of CB6F1 mice andB6CF1 mice in 9th to 10th week

注:同品系雄性與雌性比較*P<0.05,B6CF1與CB6F1同性別比較△P<0.05

Note: Female compared with male in same strain*P<0.05,CB6F1 compared with B6CF1 in same gender△P<0.05

3 討論

目前,CB6F1與B6CF1小鼠作為常用F1品系,有關其血生化、主要臟器質量、臟器系數等生物特性數據指標未見報道。而這些指標是實驗動物重要的生物特性,是實驗所需的基礎數據及科學研究與應用的重要依據[10-11],其中血液生理生化指標與代謝、營養及健康狀況有著密切的聯系,能反映動物機體生理機能,健康狀況[12]。內臟器官質量和臟器系數是鑒定動物遺傳品質的重要依據,在生物醫學研究中,還可用來衡量和反映動物的功能狀態[13]。因此,本實驗對不同性別的CB6F1和B6CF1的血生化、主要臟器系數指標進行測定及比較分析,為生物醫學研究提供基礎數據。

從14項血生化指標的檢測結果看,同品系雌雄之間多數指標有顯著性差異,CB6F1小鼠有11項,B6CF1小鼠有9項。雌雄之間差異較大,這與CB6F1小鼠與B6CF1都是由兩個品系雜交獲得,品系雌性和雄性遺傳背景來源于2個品系,雌雄獲得2個品系的遺傳幾率有所差異有關。CB6F1小鼠和B6CF1小鼠同性別比較有顯著性差異的指標,雌性有10項;雄性有11項,與2個品系遺傳背景、生理狀況有關。以上結果說明,同樣2個近交品系,選取不同父本和母本雜交,其產生的F1小鼠血生化指標品系間存在較大差異,而且雌雄之間也存在差異。

臟器質量方面,同品系雌雄之間比較,CB6F1小鼠9項指標中有7項有顯著性差異;B6CF1小鼠有5項。2個F1代品系比較,雌性11項指標中的4項,雄性9項有顯著性差異;雄性差異指標多于雌性。臟器系數方面比較,同品系雌雄之間比較,CB6F1小鼠9項指標中有7項有顯著性差異;B6CF1小鼠有6項。2個F1代品系比較,雄性11項指標中有4項有顯著性差異;雌性有5項。在體質量方面,性別、品系也有顯著的不同。結果說明,以不同品系作為父母代進行雜交,其產生的子代CB6F1和B6CF1小鼠臟器質量和臟器系數指標存在一定差異,而且雌雄之間也存在差異。F1代小鼠血生化指標和主要臟器質量和臟器系數的部分差異,驗證了F1代動物因母體環境不同或性染色體不同而出現的差異[1]。

本實驗測定CB6F1與B6CF1小鼠的血生化、主要臟器質量和臟器系數,并進行了統計分析。說明了品系、性別對CB6F1與B6CF1小鼠血生化、臟器質量、臟器系數有一定的影響。今將實驗實測數據及差異比較結果提供給廣大科技工作者參閱、參考。但動物血液生理生化值、臟器質量、臟器系數除受性別、品系的影響,還受年齡、營養、環境、生理狀況等影響[14],這些影響因素有待進一步研究。

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