免疫組化標志物Her-2和腫瘤標志物在胃癌診斷中的價值分析*

侯潔心 ，郭 萍

1.陜西省友誼醫院病理科(西安710068)，2.陜西省友誼醫院消化內科(西安710068)

胃癌是腫瘤科常見的消化道惡性腫瘤，其發病率及病死率在全球范圍內僅次于肺癌，但在我國卻位居首位。臨床通常采用胃鏡組織活檢進行胃癌的確診，但該方式技術要求高、患者耐受低、診斷費用高，且容易造成早期胃癌漏診[1]。在人體中血清腫瘤標志物早于臨床癥狀表達，因此可作為腫瘤早期診斷的重要指標，但目前并未發現診斷效率高的單項標志物[2-3]。此外，免疫組化標志物也是惡性腫瘤早期診斷、治療及預后判斷的重要標志[4]。人類表皮生長因子受體2(HER-2/neu)是機體內的原癌基因，與多種腫瘤發生和預后均具有相關性，其陽性表達在胃癌、肺癌和結直腸癌等均有存在[5-6]。本研究就免疫組化標志物Her-2與腫瘤標志物糖類抗原199(CA199)、CA242、甲胎蛋白(AFP)和癌胚抗原(CEA)聯合檢測對早期胃癌診斷的臨床效果進行了觀察分析。

資料與方法

1 一般資料 選擇2014年6月至2018年1月陜西省友誼醫院接收的胃鏡檢出患者78例作為研究對象，其中男41例、女37例；年齡29～75歲，平均(55.62±12.58)歲；病變類型：腺癌69例(高度分化9例、中度37例、低分化18例、未分化5例)、印戒細胞癌9例。納入排除標準：受試者均經胃鏡檢查證實，且對本研究內容詳細知曉；排除伴發血液系統、免疫系統、內分泌系統等對腫瘤相關標志物測定產生干擾的相關疾病者。

2 研究方法 患者胃黏膜標本均由胃鏡取材，3.7%中性甲醛溶液固定，常規脫水，石蠟包埋，切片厚度4 μm，烤片、脫蠟，免疫組織化學染色，Envision二步法測定兩組患者胃黏膜Her-2、CA199、CA242、AFP、CEA表達狀況，其中一抗包括鼠抗人單克隆抗體Her-2、CA199、CA242、AFP、CEA顯色試劑盒(試劑盒及抗體均購自于上海滬震生物科技有限公司)。采用磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗作為判定結果的陰性對照組，胃癌Her-2表達陽性片則作為陽性對照。所有染色結果均由病理科2名經驗豐富的醫師以雙盲原則進行評定。胃黏膜活檢標本Her-2表達判讀標準如表1；CA199、CA242、AFP、CEA判讀標準：細胞質出現淡黃至黃褐色顆粒狀著色則為陽性，綜合陽性細胞占比及著色強度進行半定量處理，即細胞未著色或著色細胞數目占總細胞數目比<10%為(—)；著色細胞占比10%～25%為(+)；著色細胞占比26%～50%為(++)；著色細胞占比>51%為(+++)，陽性即+～+++。每張切片選擇5個高倍視野進行免疫組化結果判讀。

表1 胃黏膜Her-2免疫組化染色判讀標準

3 統計學方法 以SPSS17.0統計學軟件進行處理數據。各類計數資料以[例(%)]表示，采用χ2檢驗，檢驗因子為α=0.05。P<0.05為差異有統計學意義。

結 果

1 兩組5項標志物免疫組織化學染色結果 見表2。免疫組化分析結果顯示，胃癌患者胃黏膜組織中腫瘤標志物CEA表達陽性率最高，其次為CA199、CA242。而免疫組化Her-2及腫瘤標志物AFP表達陽性率均相對較低，與腫瘤標志物CEA、CA199、CA242表達陽性率比，差異均具有統計學意義(P<0.05)。但腫瘤標志物CEA、CA199、CA242表達陽性率間比較差異無統計學意義(P>0.05)。

表2 兩組5項標志物免疫組織化學染色結果[例(%)]

注：與CA199比，*P<0.05；與CA242比，#P<0.05；與CEA比，▲P<0.05

2 胃癌免疫組化標志物Her-2和腫瘤標志物陽性率比較 見表3。檢測結果發現，隨著腫瘤細胞分化程度降低，胃癌免疫組化Her-2和腫瘤標志物CA199、CA242、AFP、CEA檢測陽性率呈明顯升高趨勢(P<0.05)。免疫組化Her-2和腫瘤標志物CA199、CA242、AFP、CEA在腺癌患者中檢測陽性率與印戒細胞癌間差異無統計學意義(P>0.05)。

3 免疫組化標志物Her-2和腫瘤標志物對胃癌的診斷評價 見表4。單項免疫組化標志物Her-2及腫瘤標志物AFP靈敏度均明顯低于腫瘤標物CA199、CA242、CEA(χ2=46.968～67.089，P<0.05)。但Her-2與AFP對胃癌診斷靈敏度間及CA199、CA242、CEA三者在胃癌診斷中的靈敏度間比較差異均無統計學意義(P>0.05)。與單獨Her-2檢測相比，Her-2+CA242、Her-2+CA199、Her-2+CEA聯合檢測靈敏度明顯均明顯提高，差異具有統計學意義(χ2=4.026、4.210、4.286，P<0.05)。

表3 胃癌免疫組化標志物Her-2和腫瘤標志物陽性率比較[例(%)]

注：不同分化程度間比較，*P<0.05

表4 免疫組化標志物Her-2和腫瘤標志物診斷胃癌的靈敏度(%)

討 論

Her-2/neu基因是一種細胞原癌基因，主要定位于細胞膜，少量可在細胞質中表達，在細胞正常分裂及生長中扮演一定角色。Her-2/neu在胚胎發育時即開始表達，正常成年人組織中其表達強度弱。病理狀態下，Her-2過表達具有抑制腫瘤細胞凋亡的作用，同時了促進腫瘤心血管再生、增加腫瘤細胞侵襲力等功效[7]。研究顯示，在腺癌中，常見到Her-2基因擴增、RNA和蛋白質過表達，而在非癌組織中卻未檢測到，提示其在胃癌發生發展及侵襲轉移方面具有重要作用[8-9]。通常對Her-2基因表達水平測定癌癥原發病灶手術標本為準，但對于早期診斷患者無此標本，如何形成檢測Her-2陽性表達成為癌癥患者早期診斷的難題。李惠等對胃癌活檢標本及手術標本中Her-2表達水平進行免疫組化及原位雜交擴增發現，胃鏡活檢標本Her-2狀態評估可作為胃癌手術大標本的替代品[10]。因此本研究中所選標本為胃經活檢標本。CEA是一類具有人體胚胎抗原特異度的酸性糖蛋白類物質，在各類腫瘤疾病診斷中得到廣泛應用[11-12]。CA199是一類對消化道腫瘤具有高度特異性的抗原物質。報道顯示，其與腫瘤大小、浸潤程度及淋巴轉移狀況等具有相關性，可作為消化道腫瘤診斷及預后判斷的可靠指標[13]，但其敏感度不如CEA，該結果與本研究相一致[14]；CA242為酸化的黏蛋白，主要存在于胚胎組織，正常人群和良性組織病變患者血清表達量低，但惡性消化道腫瘤病變部位含量明顯增加，因此可作為惡性腫瘤診斷的指標之一[15]。汪桂霞報道顯示，CA242胃癌診斷敏感性僅28.53%，而其與CA242、CA199和CEA聯合檢測，敏感性達86.78%[16]。AFP是一類癌胚糖蛋白，是一個肝細胞癌腫瘤標志物，但某些情況下，其在良性肝病變患者中也有異常表達，且一些病理學和免疫學研究發現，其對惡性腫瘤的意義不僅在于對干細胞癌的診斷，部分胃腺癌患者可分泌AFP，尤其是男性胃竇部位。

本研究中，入選者胃黏膜組織中Her-2、CA199、CA242、AFP、CEA均出現陽性表達，尤其是腫瘤標志物CA199、CA242、CEA表達陽性率明顯高于免疫組化標志物Her-2及腫瘤標志物AFP。說明胃黏膜組織中免疫組化標志物Her-2和腫瘤標志物CA199、CA242、AFP、CEA的異常升高可能預示初期癌發生或組織癌前病變發生，其可作為胃癌早期診斷的輔助指標。胃癌組織分化程度低或未分化者胃鏡標本中Her-2、CA199、CA242、AFP、CEA表達檢測陽性率均明顯高于分化程度中高分化者。提示上述免疫組化標志物和腫瘤標志物陽性表達與胃癌病理分化程度具有高度相關性。上述5項指標單項檢測敏感度均較低，尤其是Her-2靈敏度才達到15.38%，但其分別U與CA199、CA242、CEA聯合檢測時靈敏度均明顯提高，使得三項腫瘤標志物靈敏度均在83 %以上。提示，使用免疫組化與腫瘤標志物聯合檢測可提高胃癌早期診斷的靈敏度。

綜上所述，胃鏡活檢組織中Her-2的免疫組化分析及腫瘤標志物CA199、CA242、AFP、CEA在胃癌的普查、診斷及腫瘤細胞分化程度等方面占有重要位置，但各項指標單項檢測靈敏度較低，其Her-2與腫瘤標志物聯合檢測可顯著提高其靈敏度。