應用MCV和MCH作為梧州市地中海貧血篩查指標的臨床價值*

郭 豪 閆麗瓊 余永雄 黎永鑒 游 夏

廣西梧州市婦幼保健院 543002

地中海貧血是由于人體珠蛋白基因的突變使珠蛋白鏈合成減少及缺失，導致血紅蛋白的成分發生一系列改變的一種血液系統病。它嚴重威脅人類的健康，是一種可以致死、致殘的常染色體隱性遺傳性疾病，它是我國南方地區最常見的單基因遺傳病，主要分為α地貧和β地貧。通過產前診斷提前發現地貧胎兒及避免重型地貧患兒的出生是最有效的預防措施[1]，而產前診斷的前提是確診夫婦雙方為同型地貧基因攜帶者?；蛟\斷是地中海貧血確診的金標準，通過地貧篩查再決定是否行基因診斷，必要時終止妊娠，是預防重型地貧患兒出生的可行方法。常應用平均紅細胞體積(MCV)、平均紅細胞血紅蛋白含量(MCH)作為地貧篩查的主要指標。本研究通過對受檢者的地貧基因和地貧篩查檢測，評價MCV和MCH聯合檢測在地中海貧血篩查中的應用價值，為地貧篩查提供簡便可行的策略。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2013年1月—2016年12月梧州市區和轄區下的三縣一市送檢到我院產前診斷分中心實驗室，且在梧州地區接受了婚前、孕前及產前檢查的13 961例男女，行地貧篩查和地貧基因檢測。其中，10 904例地貧基因檢測確診為地貧的為地貧組，3 057例地貧基因檢測排除地貧的為非地貧組。

1.2 方法

1.2.1 血細胞分析：采用SYSMEX XN-1000血細胞計數儀檢測血常規24項，以MCV<82fl和MCH<27pg作為地貧初篩陽性的標準。

1.2.2 地貧基因分析：(1)DNA提取試劑盒(免疫磁珠法)由廈門致善生物科技有限公司提供；(2)缺失型α地貧基因診斷(gap-PCR法)：采用深圳益生堂生物技術有限公司的缺失型α地中海貧血基因檢測試劑盒(包含-SEA、-α3.7、-α4.2、-HAHI 4種)；(3)非缺失型α地貧基因診斷(PCR結合膜反向點雜交法)：采用深圳亞能生物有限公司的非缺失型α地中海貧血基因檢測試劑盒(包含αWS、αQS、αCS 3種點突變)；(4)β地貧基因診斷(PCR結合膜反向點雜交法)：采用深圳亞能生物有限公司的β地中海貧血基因檢測試劑盒(包含17種點突變)。

1.3 觀察指標 觀察通過MCV、MCH單獨和聯合檢測篩查人群里地貧基因檢測的組間靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值和診斷符合率。

1.4 統計學方法 應用SPSS13.0軟件對MCV、MCH單獨和聯合診斷地貧的靈敏度和特異度進行χ2檢驗。P<0.05時差異有統計學意義。

2 結果

2.1 MCV在兩組患者中的篩查結果 單獨以MCV<82fl作為地貧篩查指標，地貧組10 904例中地貧篩查陽性10 453例，漏診451例，靈敏度為95.9%，漏診率為4.1%，非地貧組3 057例中，MCV>82fl的共2 214例，特異度為72.4%(2 214/3 057)。

2.2 MCH在兩組患者中的篩查結果 單獨以MCH<27pg作為地貧篩查指標，地貧組10 904例中地貧篩查陽性10 428例，漏診476例，靈敏度95.6%，漏診率4.4%。非地貧組3 057例中，MCH>27pg的共2 159例，特異度為70.6%(2 159/3 057)。

2.3 MCV+MCH在兩組患者中的篩查結果 單獨以MCV<82fl+MCH<27pg作為地貧篩查指標，地貧組10 904例中地貧篩查陽性10 398例，漏診506例，靈敏度95.4%，漏診率4.6%。非地貧組3 057例中，MCV>82fl+MCH>27pg的共2 516例，特異度為82.3%(2 516/3 057)。

2.4 MCV與MCH單獨和聯合篩查對比 MCV與MCH在地貧篩查中的靈敏度比較，差異無統計學意義(χ2=0.065，P>0.05)；特異度比較，差異無統計學意義(χ2=2.42，P>0.05)，MCV、 MCH單獨和MCV+MCH在地貧篩查中的靈敏度分別比較，差異也均無統計學意義(χ2=3.306，P>0.05；χ2=0.956，P>0.05)。在非地貧組篩查中的特異度比較差異均有統計學意義(χ2=85.18，P<0.01；χ2=115.82，P<0.01)；見表1。

表1 MCV、MCH和分別篩查以及聯合篩查地貧中的價值(%)

3 討論

地中海貧血是兩廣地區高發的遺傳性疾病,臨床上對地中海貧血尚無特效的治療手段，輕、中型地中海貧血患者也會對生活產生不同程度的影響；重型的地貧患者出生后需要不斷輸血治療，給家庭和社會造成了巨大負擔。故地中海貧血預防和篩查具有重大意義。地中海貧血篩查的方法很多，但明確診斷和檢測地貧基因需要聚合酶鏈反應(PCR)技術結合其他分子生物學技術的要求，地貧基因檢測要求條件高、費用大，不適用于疾病的篩查及基層的廣泛推廣[2]。

本研究顯示通過對婚前醫學檢查、孕前檢查、產前檢查人群進行血常規檢測，以MCV<82fl和MCH<27pg單獨作為地貧表型篩查陽性界定值時，其靈敏度均在95%以上，但同時特異性又均較低(72.4%和70.6%)。表明這兩項指標用于地貧篩查時漏檢率較低，而假陽性率較高。MCV或MCH用于地貧篩查時出現假陽性的原因是缺鐵性貧血的普遍存在。由于小細胞、低色素性貧血就會導致MCV、MCH水平降低，結果顯示對地貧篩查陽性，但地中海貧血基因診斷為陰性。受檢者可以進一步通過血清鐵蛋白的檢測可以判斷是否是缺鐵性貧血，從而降低MCV、MCH檢測篩查的假陽性率[3]。而MCV<82fl和MCH<27pg兩項指標聯合作為地貧篩查指標時，可在靈敏度(95.4%)和特異度(82.3%)和診斷符合率(92.5%)綜合分析顯示，在靈敏度均可達到95%以上的同時特異度和診斷符號率均較單獨MCV、MCH有較大提高，統計學顯示有差異性。因此，MCV+MCH的篩查策略優于單純以MCV或MCH作為地貧篩查指標的策略。但仍有一定的漏檢率，原因為有一部分地貧基因攜帶者，特別是靜止型地貧不能通過血液學表型分析去發現，對于此類人群的確診還有賴于DNA分析[4]。

目前臨床上沒有一種針對所有地貧類型均具有較高的檢出率的地貧篩查方法[5]。所以，對于不同人群進行地貧篩查時，可以根據實際情況選擇增加一些項目作為篩查方法，Hb電泳，血清鐵蛋白的檢測等。但是MCV和MCH作為基礎的篩查指標，還是具有靈敏度高、快速、價格低廉等優點[6]，適用于基礎及農村等大人群的篩查。應用MCV+MCH進行初篩，根據初篩結果再決定是否需進一步做血清鐵蛋白的檢測、Hb電泳和地貧基因診斷。如果受檢者更注重篩查結果的準確快速，則可以選擇3種指標聯合篩查的策略：MCV+MCH，Hb電泳，血清鐵蛋白。但針對孕前和產前檢查的夫婦，要適當放寬篩查指標，尤其對于高危地區的夫婦，在一方已確診為僅地貧攜帶者時，另一方直接進行僅地貧基因診斷，以免篩查指標導致的漏檢。