馮艷蕓,梁寧利,趙海燕,李海亮,康馨元
(中華人民共和國寶雞海關,陜西寶雞 721006)
農藥在蔬菜生長過程中防止病蟲害、保護蔬菜生長等發揮著重要作用,但在農藥使用的過程中,蔬菜本身會殘留使用過的農藥,通過食物鏈進入人體危害健康[1-5]。成熟的蔬菜進入售賣市場前,進行農藥殘留檢測也是必要的環節,采樣、樣品的運輸和保存是進行準確殘留分析的前提[6-7]。采取的樣品還需經過不同方法的提取、凈化,常用的提取方法有浸漬、漂洗法、振蕩法、索氏提取法、超聲提取法、勻漿法等[8-10]。溶劑提取仍然是最主要的提取手段,國內外的法定標準一般多采用丙酮、乙腈等極性溶劑,提取效率較高。樣品的含水量對提取效率可能產生較大的影響,對于含水量較高的蔬菜、水果等樣品,采用高速勻漿的方法簡便可行;中藥材含水量較低,一般可加入適量水浸潤,再加有機溶媒超聲提取,或采用加速溶劑萃取等方式,可獲得較高的提取率[11-15]。微波輔助萃取與超臨界流體萃取也是非常有前途的方法。然后運用相關儀器檢測,在農藥殘留分析中,可用于確證的方法主要有氣相色譜法、高效液相色譜法、質譜法、薄層色譜法、紅外光譜法、核磁共振法和化學處理法[16-17]。
對陜西省商洛市蔬菜市場進行了調查分析后,樣品采集分3個區域進行,即大型批發市場、小型農貿市場、大型超市;采用丙酮、乙腈、二氯化烷作為提取溶劑進行考查,對小白菜中五氯硝基苯、敵敵畏、α-六六六、β-六六六、多菌靈、三唑酮6種農藥殘留進行檢測。
1.1.1 試劑
乙腈、丙酮、二氯化烷、氯化鈉、硫酸鎂,均為分析純。
1.1.2 儀器
KQ-250DB型超聲波儀,上海市超聲儀器有限公司產品;R-205型旋轉蒸發儀,上海精密科學儀器有限公司產品;氣相色譜-質譜聯用儀,日本島津公司產品。
1.1.3 農藥標品
五氯硝基苯、敵敵畏、α-六六六、β-六六六、多菌靈、三唑酮,含量>99%,購買于國家標準物質研究中心,配制不同質量濃度的標準溶液待用。
對小白菜市場進行了調查分析后,樣品采集分3個區域進行采樣,即大型批發市場、大型超市、小型農貿市場,在3個區域分別采收樣本。
稱取新鮮的小白菜500 g,初步切碎混勻取可食部分,無需洗滌,不要切得太碎,以免組織汁液流失,所取樣品平均分成2份,一份供測定,另一份放置于-20℃冰箱中待用。
稱取小白菜樣品10 g,添加2 mL農藥混合標準溶液,分別以丙酮50 mL+二氯化烷(3∶7) 和乙腈50 mL+水(4∶1) 為提取溶劑,分別加入NaCl 1 g和MgSO44 g勻漿后超聲波提取30 min,2種提取方法分別重復3次。
選擇超聲波提取法、浸漬振蕩提取法、索氏提取法3種方法對樣品進行提取,比較3種方法的添加回收率。超聲波提取法功率90 W,提取時間30 min,浸漬振蕩提取法提取10 h,索氏提取法提取5 h,每種方法重復3次,以50 mL乙腈+水(4∶1) 為提取溶劑,分別加入1 g Nacl和4 g MgSO4。
根據優化的提取溶劑、提取方法,對小白菜中的農藥進行測定。氣相色譜-質譜法測定:色譜柱:DB-17MS型毛細管色譜柱(60m×0.25mm,0.25μm);采用自動進樣,進樣口溫度230℃,載氣為He(純度99.99%),不分流進樣,流量1 mL/min,進樣體積1μL。程序升溫:起始溫度60℃,保持1.5 min,以30℃/min的速度升溫至120℃,再以10℃/min的速度升溫至200℃,保持10 min,以 30℃/min的速度升溫至300℃,保持10 min。質譜條件:電子轟擊電離(EI),電子能量為70 eV,離子源溫度為230℃,接口溫度為250℃,質量掃描范圍為40~ 450 m/z。
6種農藥的標準曲線方程和檢出限見表1。
以質量濃度為橫坐標、峰面積為縱坐標,繪制6種農藥的標準曲線。將一種質量濃度的標準溶液平行上樣6次,得到檢測方法的精密度。由表1可以看出,農藥的相關系數為>0.992 2;最低檢測限在0.50~9.50μg/kg;相對標準偏差≤4.5,試驗檢測條件可以用于樣品的檢測。
表1 6種農藥的標準曲線方程和檢出限
6種農藥不同提取試劑的平均回收率和標準偏差見表2。
表2 6種農藥不同提取試劑的平均回收率和標準偏差
除五氯硝基苯和敵敵畏外,其余農藥品種的添加回收率均是乙腈+水提取法>丙酮+二氯化烷提取法。乙腈是中等極性的溶劑,對蔬菜中的油脂、色素的溶解性小,而對大多數農藥的溶解性都較好,在多種農藥的殘留量提取中效果很好。
浸漬提取法、超聲波提取法與索氏提取法的回收率基本相當,但超聲波提取法節省了大量的時間,操作方法也較為簡單,適合大批量的樣品檢測。
6種農藥不同提取方法的平均回收率和標準偏差見表3。
表3 6種農藥不同提取方法的平均回收率和標準偏差
不同來源小白菜農藥質量濃度檢測見表4。
由表4可以看出,大型超市中樣品合格率高于小型農貿市場和大型批發市場。大型超市樣品中除了三唑酮有2個樣品超過國標規定,影響總體合格率,其余合格率基本在95%以上。小型農貿市場和大型批發市場由于蔬菜直接來源于田地,沒有經過任何諸如洗滌等的處理,更能接近原始數據,而在這2個區域中多菌靈和三唑酮兩種農藥有5個樣品超出國標規定。對于不同農藥在蔬菜中的殘留情況,大型超市中小白菜農藥殘留量普遍偏低,符合國標規定,小型農貿市場和批發市場小白菜農藥殘留量基本符合國家規定。
表4 不同來源小白菜農藥質量濃度檢測