間充質干細胞在卵巢抗衰治療中的安全性及有效性初步研究

王婭莎　李文瑞

【摘要】：探討卵巢早衰（POF）及絕經綜合征的臨床診斷與治療方法?；仡櫡治鲎?019年8月至2020年5月間經海南啟研干細胞抗衰老醫院治療的5例POF，7例POI以及絕經綜合征患者18例的臨床資料，經過臨床診斷和治療，結果 30 例患者中治愈11例，有效17 例，無效2例，其總有效率93%。經使用低氧環境培養的胎盤底蛻膜間充質干細胞治療后，在28例治愈及有效患者中，患者的FSH、LH值具有不同程度下降，E2值有明顯升高，與治療前相比差異顯著（P<0.05），且未出現明顯的不良反應。結論，間充質干細胞在卵巢抗衰治療中獲得了初步療效。

【關建詞】：間充質干細胞; 卵巢早衰;絕經綜合征;臨床研究

【中圖分類號】R2 ??【文獻標識碼】A ???【文章編號】2107-2306（2020）04-013-02

女性卵巢功能減退是一個逐漸進展的過程，在臨床上卵巢衰退過程，

從病因上，年齡上分為早發性卵巢功能不全（premature ovarian insufficiency，POI），卵巢早衰（premature ovarian failure，POF）和更年期，POI或POF是一個非常復雜的疾病，醫學界至今仍在持續探索。由于年齡、遺傳以及藥物等原因導致卵巢功能衰退，產生卵子質量降低、雌激素水平異常等臨床表現。POI又稱原發性卵巢功能不全，是由遺傳性染色體異常導致的卵巢功能減退性疾病，指女性40歲以前出現的卵巢功能減退，主要表現為月經異常、不孕不育，卵泡刺激素（FSH）水平升高（FSH>25IU/L）、雌激素波動性下降。發病率為1%～5%，并有增加趨勢，該疾病異質性強、發展迅速，能夠造成女性排卵障礙，嚴重影響生育力和身體健康。POF為卵巢功能衰竭所導致的40歲之前即閉經的現象。卵巢早衰的常見臨床特點主要有不孕;月經失調、閉經，卵巢早衰患者10%～20%會出現突然閉經，大多數患者表現為月經稀發、經量減少、經期縮短而逐漸閉經;低雌激素癥狀主要表現在：血管舒縮癥狀;泌尿生殖道癥狀;遠期還會造成骨質疏松和骨折、血脂升高和心血管疾病。其病因涉及心理、遺傳、免疫、酶代謝、感染、環境及醫源性因素等多個方面，多數為特發性，發病機制尚不明確，仍無根本有效的治療方法。干細胞移植是目前國內外學者研究較多的一種新的細胞療法，本研究采用間充質干細胞用于POF治療，以期獲得較好的治療效果。

1.資料與方法

1.1臨床資料

卵巢早衰患者5例，年齡29～40歲，早發性卵巢功能不全（POI）7例，年齡29～40歲;圍絕經及絕經后患者18例，其中40～50歲11例，51～59歲7例.患者平均初潮年齡12～17歲，閉經4個月～9年，月經稀發，漸至閉經23例，突然閉經7例。未婚3例，已婚29例，其中22例有不同程度低雌激素血癥表現，原發不孕6例，繼發不孕9例;12例有不同程度生殖器和乳房萎縮，萎縮程度與閉經年限有關;閉經時間越長，生殖器萎縮越嚴重。

30例均檢測血清促卵泡素（FSH）、黃體生成素（LH）、泌乳素（PRL）和雌激素1～3次。婦科檢查大部分患者陰毛稀少，陰道分泌物少，陰道壁粘膜薄，部分患者同時合并陰道炎，子宮萎縮，陰道b超檢查顯示子宮小于正常婦女，部分卵巢萎縮，16例無卵泡，8例有卵泡，陰道脫落細胞學提示雌激素水平低下，宮頸黏液平分低。

1.2.診斷標準

卵巢早衰（POF）診斷標準：患者在40歲以前出現>4個月的閉經，雌二醇水平<73.2pmol/l，同時有2次以上血清卵泡刺激素>40U/L，2次檢查間隔>1個月。

早發性卵巢功能不全（POI）診斷標準：POI是指女性在40歲以前出現卵巢功能減退，主要表現為月經異常（閉經、月經稀發或頻發）、促性腺激素升高（FSH>25IU/L）、雌激素缺乏。

絕經綜合征診斷標準：

（1）血清FSH值及E2值測定?絕經過渡期血清FSH>10U/L，提示卵巢儲備功能下降。閉經、FSH>40U/L且E2<10～20pg/ml，提示卵巢功能衰竭。

（2）抗米勒管激素（AMH）測定 AMH低于1.1ng/ml提示卵巢儲備下降;低于0.2ng/ml提示即將絕經;絕經后一般測不出。

1.3診斷方法

首先記錄卵巢功能減退患者的就診年齡、初潮年齡、既往月經周期情況、手術史、生育史、絕經年齡、絕經年限、激素替代治療情況、吸煙情況及環境情況、妊娠情況及家族史等。同時采用空腹抽血，并采用放射免疫法來測定患者的性激素六項，即卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）、孕激素（P）、雌二醇（E2）、催乳素（PRL）、雄激素（T）。另外需要檢查患者的肝功能、腎功能、血脂、血糖、腫標物，傳染病檢測，HPV、TCT也要定期檢測。

1.4治療方法

治療方案的選擇需根據患者的年齡、體內激素水平以及閉經情況來制定干細胞移植療程?；颊咝g前排空膀胱，上手術臺取膀胱截石位，常規消毒外陰、陰道、鋪巾。雙合診檢查了解子宮、附件情況和陰道后穹窿是否膨隆，陰道窺器充分暴露宮頸及陰道后穹窿并消毒，宮頸鉗鉗夾宮頸后唇并向前提拉，充分暴露陰道后穹窿，再次消毒。6號針頭接2ml注射器，于陰道后穹窿左右兩側，即陰道后壁與宮頸后唇交界處稍下方快速進針，深約2cm，分別注入MSCs1x107單位，注射完畢，拔出針頭針管，見注射點有少許活動性出血，大棉球壓迫片刻血止，取出陰道窺器，術畢。術后3天內個別患者可能有極少量陰道出血，無需處理;術后7天內禁止性生活、禁止婦科其他治療如婦科沖洗;術后7天禁止辛辣刺激性食品及酒;注意休息，別勞累;術后半月內勿桑拿、游泳。

1.5統計學處理

本文結果均使用SPSS13.O ForWindo統計軟件處理實驗數據，作x²檢驗。P<0.05表示差異有統計學意義。

2.結果

11例POF和POI以及17例絕經綜合征患者經治療后均有月經來潮，同時在用藥一個療程后其雌激素缺乏癥狀如失眠、潮熱、盜汗、情緒波動等癥狀有明顯緩解，性激素水平也有明顯改善，具體內容詳見表1。

2例患者，POF和POI各1例，年齡均<40歲，FSH與E2水平與對照組無顯著性差別，但失眠、焦慮等癥狀明顯改善。

3.討論

卵巢功能衰退嚴重影響女性健康，成為女性健康的直接殺手。卵巢早衰（POF）是女性40歲前由于卵巢內卵泡耗竭或因醫源性損傷而發生的卵巢功能衰竭，患者出現持續性閉經、性器官萎縮，伴有促性腺激素包括卵泡刺激素（FSH）和黃體生成激素（LH）升高，而雌激素降低的綜合征[1]。POF是婦科內分泌領域的常見病，其在一般人群中發病率為1%～3%，20歲前女性發病率0.01%，30歲前發生率0.1%，40歲前發生率為1%，在繼發性閉經婦女中占4%～8%[2～3]。近年來卵巢早衰在育齡婦女中的發生率有逐年升高且向年輕化發展的趨勢，在女性不孕患者中所占的比例亦有逐年上升。而其機制尚不明確，主要誘因包括遺傳、自身免疫、醫療手術創傷、環境、感染等[4]。研究表明，37%的POF由抗腫瘤治療等醫源性因素引起，特發性占25%，遺傳和免疫因素各占19%左右，不良生活、工作方式也成為其誘因[5]。卵巢功能衰退對女性生殖健康造成的兩大威脅主要是雌激素水平降低及生育能力喪失，雌激素水平降低增加了婦女患骨質疏松和冠心病的風險[6]。而處于生育期的婦女提早閉經，生育能力喪失，導致一系列心理和社會問題，如抑郁、焦慮、人際交往困難、敵對情緒、社交障礙及婚姻生活質量下降[7]。針對已知的發病原因和機制，目前主要的治療措施包括激素替代治療（HRT）、促性腺激素釋放激素受體激動劑治療、冷凍組織（ 卵母細胞、卵巢組織、胚胎）移植、免疫調節、基因治療等[8～9]。然而，這些治療的效果主要以改善臨床癥狀為主，難以完全恢復卵巢正常功能，還存在明顯不良反應，如長期HRT有增加乳腺癌、心臟病和中風風險的擔憂[10]， 因此，尋找一種恢復卵巢功能治療手段顯得尤為重要。近年來，間充質干細胞（MSC）療法被認為是一種修復受損組織、重建正常組織功能的替代治療手段，因其治療范圍廣泛和潛在的臨床應用價值，逐漸成為研究熱點，也為包括卵巢早衰在內的各種難治性疾病帶來了新希望。干細胞能夠定向修復卵巢組織分化出足夠的卵細胞，補充卵細胞數量，維護卵巢正常的形態和功能，使患者心理年齡提高，重新煥發青春風采。本研究結果表明30例患者中，28例經間充質干細胞靶向治療均獲得良好的療效，通過治療刺激體內荷爾蒙分泌雌性激素，提高體內的雌性激素水平，減輕了更年期出現的失眠、多夢、脾氣暴躁等癥狀，并推遲更年期的到來，僅2例患者（POF和POI各1例，年齡均為40歲以下）FSH與E2水平與對照組無顯著性差別，但失眠、焦慮等癥狀得到改善，推測可能與其年齡和卵巢功能嚴重低下有關，未出現嚴重不良反應。由于POF臨床病因較為復雜，且治療難度較大，患者早診斷早、治療，這樣不僅可以緩解臨床癥狀、延緩病情發展，甚至可恢復卵巢功能。

參考文獻

[1]左俠， 陳蕾.干細胞治療卵巢早衰的研究進展[J]. 國際婦產科學雜志， 2014， （1）：25-28.

[2]Messiah A，Leif MW.Premature ovarian failure〔J〕. Burr Opin Obstet Gynecol，2006，18：418-426.

[3]Goswami D，Conway GS. Premature ovarian failure〔J〕. Horm Res，2007，68 （4）：196-202.

[4]Sükür YE1，K1van?l1 IB2，Ozmen B3. Ovarian aging and premature ovarian failure. J Turk Ger Gynecol Assoc.2014，15（3）：190-196.

[5]Fenton AJ.Premature ovarian insufficiency： Pathogenesis and management[J]. J Midlife Health，2015，6（4）：147-153.

[6]Gallagher JC. Effect of early menopause on bone mineral density and fractures〔J〕. Menopause，2007，14（3pt2）：567-571.

[7]Nippita TA，Baber RJ. Premature ovarian failure： a review〔J〕.Climacteric，2007，10 （1）：11-22.

[8]Torrealday S，Kodaman P，Pal L.Premature Ovarian Insufficiencyan update on recent advances in understanding and management[J]. F1000Res，2017，6：2069-2083.

[9]Kozub MM，Prokopiuk VY，Skibina KP，et al. Comparison of various tissue and cell therapy approaches when restoring ovarian，hepatic and kidney' s function after chemotherapy-induced ovarian failure[J]. Exp Oncol，2017，39（3）：181-185.

[10]Shelling AN. Premature ovarian failure [J]. Reproduction，2010，140（5）：633-641.

作者簡介：王婭莎，婦產科副主任醫師，1964.2月生，湖北荊州人，研究方向：干細胞抗衰老