不穩定性心絞痛患者血清Vaspin水平及與血管內皮細胞黏附分子的相關性

劉海寧，蒲冬玉，畢方杰，尹 波

(濱州醫學院附屬淄博市中心醫院 心內科，山東 淄博 255036)

動脈粥樣硬化是一種血管炎性疾病，血管內皮的損傷是血管炎性反應的始動因素。血管內皮的損傷首先表現為血管內皮細胞黏附分子的表達，且貫穿于動脈粥樣硬化發展的全過程，對動脈粥樣硬化的發生發展起著至關重要的作用。脂肪組織不僅是能量的存儲器官，更是一個非常重要的內分泌器官，分泌多種脂肪因子，通過內分泌、旁分泌的方式參與了動脈粥樣硬化病理生理過程。血清內臟脂肪組織來源的絲氨酸蛋白酶抑制劑(visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor, Vaspin)，是近年來新發現的脂肪因子，是絲氨酸蛋白酶抑制劑家族中的一員[1]，在肥胖、2型糖尿病、胰島素抵抗中扮演著重要角色[2-4]?；A研究發現，Vaspin能夠影響血管內皮功能[5]、抑制血管平滑肌細胞的增殖和遷移[6]，具有抗動脈粥樣硬化作用。那么對于不穩定性心絞痛患者，其血清Vaspin表達如何？與血清可溶性黏附分子的表達是否具有相關性？本研究對此進行了探討，旨在從臨床角度探討Vaspin與血管內皮功能之間的關系。

1 資料與方法

1.1病例選擇 2019年7月至2020年1月我院住院的不穩定性心絞痛患者90例，所有入選患者均符合2016年中華醫學會心血管病分會“非ST段抬高型急性冠狀動脈綜合征診斷和治療指南”中不穩定性心絞痛的診斷標準，其中11例接受了冠狀動脈CT血管成像檢查，79例接受了冠狀動脈造影檢查。選擇同時期住院及門診的穩定性心絞痛患者90例，所有入選患者均符合2018年中華醫學會心血管病學分會“慢性穩定性心絞痛診斷與治療指南”中穩定性心絞痛的診斷標準，其中42例接受了冠狀動脈CT血管成像檢查，48例接受了冠狀動脈造影檢查。排除標準：(1)肝腎功能異常；(2)自身免疫性疾??；(3)發熱及感染性疾??；(4)腫瘤；(5)血液系統疾??；(6)糖尿??；(7)其他器質性心臟病。選擇年齡、性別、體重相匹配的健康者80例作為對照組，對照組健康者均來自本院體檢中心。

1.2Vaspin、sVCAM-1及sICAM-1的測定 采用定量夾心酶聯免疫檢測技術進行測定。所有患者清晨抽空腹外周靜脈血于血液采集管中，室溫放置30 min，3 000 r/min離心15 min，移取上層血清，存放于-70 ℃超低溫冰箱，標本在半個月內測定。人Vaspin試劑盒購自上海酶聯生物有限公司，人sVCAM-1、sICAM-1酶聯檢測試劑盒均購自美國Aviscera Bioscience公司。試驗步驟嚴格按照試劑盒說明要求進行。

1.3血生物化學指標檢測 清晨抽空腹外周靜脈血，室溫下存放，2 h內送檢。采用Beckman 5800型血生物化學分析儀進行生物化學指標常規檢測。

1.4體質指數測量 體質指數(body mass index，BMI)計算公式：BMI=體重/身高2(kg/m2)。測量時，身高精確到0.1 cm，體重精確到0.1 kg。18 kg/m2≤BMI<24 kg/m2。

2 結 果

2.1一般臨床資料比較 3組間年齡、性別、BMI、血脂、空腹血糖、肌酐、尿酸等指標比較，差異均無統計學意義(P>0.05)。UA組和SA組間收縮壓(systolic blood pressure，SBP)、舒張壓(diastolic blood pressure，DBP)、總膽固醇、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、hs-CRP水平差異無統計學意義(P>0.05)，但均顯著高于對照組(P<0.01)，見表1。

表1 3組研究對象一般臨床資料比較

服用藥物情況[例(%)]U值P值 抗血小板藥物85(94.44)81(90.00)-1.10>0.05 他汀類80(88.89)76(84.44)-0.82>0.05 β受體阻滯劑72(80.00)51(56.67)-3.28<0.01 ACEI/ARB25(27.78)29(32.22)-1.48>0.05 硝酸酯類69(76.67)53(58.89)-2.54<0.05

2.2血清Vaspin、sVCAM-1、sICAM-1 UA組血清Vaspin水平顯著高于SA組及對照組(分別P<0.01)，但SA組與對照組之間差異無統計學意義。UA組血清sVCAM-1及sICAM-1水平均顯著高于SA組和對照組(分別P<0.01)，且SA組與對照組相比也具有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 3組血清Vaspin、sVCAM-1、sICAM-1水平比較

2.3UA組血清Vaspin與sVCAM-1、sICAM-1及其他指標的相關性分析 UA組血清Vaspin與sVCAM-1、sICAM-1、hs-CRP均呈顯著負相關(P<0.01)，見圖1～3，而與體重指數、SBP、DBP、總膽固醇、甘油三酯、LDL-C、HDL-C、肌酐、尿酸、空腹血糖等均無明顯相關性(P>0.05)，見表3。

表3 UA組血清Vaspin與各指標的Pearson相關性分析

3 討 論

Vaspin最早是在肥胖的2型糖尿病大鼠(Otsuka Long-Evans Tokushima fatty rat, OLETF)模型的內臟脂肪組織中發現的[7]，動物與人的Vaspin氨基酸組成有所不同，人的Vaspin是由395個氨基酸組成的，為絲氨酸蛋白酶抑制劑家族的成員。研究發現，2型糖尿病、胰島素抵抗和肥胖患者的血清Vaspin水平均明顯升高，Vaspin通過抑制緩激肽釋放酶7介導的胰島素降解發揮其胰島素增敏作用[8]。而肥胖和胰島素抵抗在動脈粥樣硬化性心血管疾病中則扮演者極其重要的角色。然而，當患者冠狀動脈受到損傷出現動脈粥樣硬化病變時，其血清Vaspin水平表達卻是降低的，這在多項臨床研究中已經得到證實[9-11]，且低水平的血清Vaspin可以預測心血管事件的發生[12]。為了排除血糖對血清Vaspin水平的影響，本研究所納入的研究對象均剔除了糖尿病及糖耐量異常的冠心病患者。研究結果發現，不穩定性心絞痛組血清 Vaspin水平顯著低于穩定性心絞痛組及正常對照組，而在穩定性心絞痛組與正常對照組之間差異無統計學意義。提示血清 Vaspin水平降低是不穩定性心絞痛患者一個重要的預測指標，與冠心病及其嚴重程度密切相關。Al-Kuraishy等[13]研究發現，肥胖合并急性冠脈綜合征患者的血清Vaspin水平是明顯降低的，在予以瑞舒伐他汀治療后，其血清Vaspin水平顯著高于非瑞舒伐他汀治療組，說明他汀的多效性能夠增加缺血性心臟病患者Vaspin血清濃度，間接證明Vaspin對冠脈的保護作用，具有抗動脈粥樣硬化作用。在頸動脈球囊損傷的小鼠模型中，Nakatsuka 等[14]予以載有Vaspin的腺病毒進行治療，可顯著抑制單核細胞趨化因子(monocyte chemoattractant protein-1, MCP-1)的表達、保護血管免受損傷，直接證明了Vaspin對血管的保護作用。本研究結果則發現不穩定性心絞痛組中的血清Vaspin水平與炎性指標hs-CRP呈顯著負相關，這與Al-Kuraishy等[13]的研究相一致，進一步說明Vaspin具有抗炎、抗動脈粥樣硬化作用，對動脈粥樣硬化性心血管疾病具有保護作用。

對于單純肥胖和胰島素抵抗的患者，血清Vaspin可作為保護性代償而明顯升高[4, 15]；一旦合并出現動脈粥樣硬化性病變，血清Vaspin則會呈現降低趨勢。但這其中的原因和機制是什么呢？還需要做進一步的研究。

動脈粥樣硬化是血管的炎性反應，導致動脈粥樣硬化的各種危險因素和促炎性分子如腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白細胞介素6等均可損害血管內皮細胞，誘導血管內皮細胞黏附分子的表達以及隨后巨噬細胞在血管內皮的黏附。因此，血管內皮細胞黏附分子的表達是導致動脈粥樣硬化的起始因素。黏附分子包括血管細胞黏附分子-1(vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1)、細胞間黏附分子-1( intercelluar cell adhesion molecule-1, ICAM-1)和E-選擇素的表達主要依賴于核轉錄因子(nuclear factor-κB, NF-κB)[16]。以往臨床研究均已證實，急性冠脈綜合征患者血清可溶性ICAM-1(sICAM-1)、可溶性VCAM-1(sVCAM-1)水平顯著升高，與冠狀動脈病變程度呈顯著正相關。本研究得到了同樣的結果，不穩定性心絞痛患者和穩定性心絞痛患者的血清sICAM-1、sVCAM-1水平均顯著高于正常對照組，尤以不穩定性心絞痛組升高更為顯著。Jung等[17]研究發現，在體外培養的人主動脈內皮細胞中，Vaspin能夠顯著抑制TNF-α誘導的NF-κB的激活以及NF-κB介導的ICAM-1、VCAM-1、E-選擇素、 MCP-1基因水平和蛋白水平的表達，進一步研究發現，Vaspin是通過激活AMPK這一信號轉導系統抑制了TNF-α誘導的NF-κB的激活以及黏附分子的表達。本臨床研究結果發現，不穩定性心絞痛患者的血清vaspin水平與血清sICAM-1、sVCAM-1水平均呈顯著負相關，進一步證實了體外研究的結果，Vaspin水平降低，意味著對血管內皮的保護作用降低，血清Vaspin水平與冠脈病變程度呈負相關，因此血清Vaspin可以作為不穩定性心絞痛重要的生物標志物。

目前認為Vaspin可能通過多個靶點發揮其抗動脈粥樣硬化的作用[5]，具體的作用機制，尤其是細胞內信號轉導機制正在被更深入的研究[18-19]。Vaspin與動脈粥樣硬化斑塊穩定性之間的關系是我們下一個的研究重點。如何提高冠心病患者血清Vaspin濃度，充分發揮其抗動脈粥樣硬化作用將是未來臨床研究的方向。