CGRP、EGF及TGF-β1與創傷性骨折患者應激狀態及骨折愈合的關系

周偉 羅亮 向勇 陽運康

隨著經濟的發展，機動車量的增多，創傷性骨折發生率不斷上升，臨床多采用影像學檢查（數字X 線攝影、電子計算機斷層掃描）確診［1-2］。機體發生創傷性骨折后，會發生不同程度的應激反應，若不及時予以干預措施，會增加患者發生深靜脈血栓的風險，不利于骨結構重建，影響患者康復［3］。降鈣素基因相關肽（Calcitonin-generelated peptide，CGRP）是一種神經肽，國外文獻報道，CGRP 是神經系統影響骨代謝及骨重建的重要因子，可促進骨損傷修復［4］。相關研究報道，表皮生長因子（Epidermal Growth Factor，EGF）及轉化生長因子-β1（Transforming growth facter-β1，TGF-β1）參與骨愈合的過程［5-6］。本研究旨在探討CGRP、EGF 及TGF-β1 與創傷性骨折患者應激狀態、骨折愈合的相關性，以期為臨床治療創傷性骨折提供指導。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年5月至2019年5月在本院進行治療的116 例創傷性骨折患者設為觀察組。納入標準：①均經X 線檢查，確診為創傷性骨折，并符合骨科相關診斷標準［7］；②臨床資料及影像資料完整；③年齡在80 歲以下。排除標準：①凝血功能障礙者、合并心、肝、腎等重要器官嚴重疾病者；②納入研究前服用過影響CGRP、EGF 及TGF-β1 水平的藥物者；③合并其他器官嚴重創傷者、全身感染性疾病者；④治療依從性不佳者。

治療4 個月后根據LaneSandhuX 線評分［8］評估患者骨折愈合情況，分為愈合良好組（n=62），其中男38 例，女24 例；平均年齡（48.39±6.03）歲；骨折部位：上肢骨折35 例、下肢骨折27 例。愈合不良組（n=54），其中男34 例，女20 例；平均年齡（48.50±6.09）歲；骨折部位：上肢骨折31 例、下肢骨折23 例。觀察組男72 例，女44 例；平均年齡（48.65±6.12）歲；骨折部位：上肢骨折63 例、下肢骨折53 例。選取同期本院的120 例健康體檢者設為對照組，男53 例，女67 例；平均年齡（48.73±6.19）歲。2 組基線資料比較差異無統計學意義（P＞0.05）。本研究經醫院倫理委員會批準，受試者均簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 CGRP、EGF 及TGF-β1 檢測方法

觀察組在入院第2日清晨空腹、對照組在體檢當日清晨空腹抽取靜脈血3 mL，常溫1 000 r/min、離心10 min，分離血清及血漿，樣本置于-20℃下保存待檢。采用采用葡萄糖氧化酶法檢測CGRP 水平，放射免疫法檢測EGF 及TGF-β1 水平。檢測儀器為日立全自動生化分析儀檢測，相關試劑盒采購于北京中杉金橋生物技術有限公司。

1.2.2 應激指標檢測方法

采用ELISA 試劑盒（賽默飛世爾有限公司）檢測所有研究對象血清氧化應激指標：超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和丙二醛（malondialdehyde，MDA），檢測過程依據說明書進行。

1.2.3 骨折愈合標準

由兩名放射科醫師采用LaneSandhuX 線評分標準［8］評估患者的骨折愈合情況，該評分包括骨形成、連接及塑性三個方面，分值為0～12 分，分值越高則表明骨折愈合程度越高。觀察CGRP、EGF 及TGF-β1 與骨折愈合進度的相關性。

1.4 統計學方法

采用SPSS 22.0 軟件進行統計分析，計量資料以（）表示，采用t檢驗；計數資料以n（%）表示，采用χ2檢驗；采用Pearson 直線相關分析CGRP、EGF 及TGF-β1 與創傷性骨折患者Lane-Sandhu X線評分的相關性；以P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 2組CGRP、EGF、TGF-β1及應激指標水平比較

觀察組CGRP、EGF、TGF-β1、MDA 水平明顯高于對照組，SOD 水平明顯低于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 2 組CGRP、EGF、TGF-β1 及應激指標水平水平對比（±s）Table 1 Comparison of CGRP，EGF，TGF-β1 and stress index levels between the two groups（±s）

表1 2 組CGRP、EGF、TGF-β1 及應激指標水平水平對比（±s）Table 1 Comparison of CGRP，EGF，TGF-β1 and stress index levels between the two groups（±s）

組別觀察組對照組t 值P 值n 116 120 CGRP（pg/mL）63.25±6.89 37.67±5.68 31.165＜0.001 EGF（μg/L）1.34±0.32 0.53±0.15 25.031＜0.001 TGF-β1（μg/L）45.12±5.26 8.89±1.88 70.916＜0.001 SOD（nU/mL）72.65±4.32 90.05±5.25 27.751＜0.001 MDA（μmol/L）6.32±0.78 2.22±0.54 47.082＜0.001

2.2 不同骨折愈合情況的患者CGRP、EGF、TGF-β1水平、應激指標水平比較

愈合良好組CGRP、EGF、TGF-β1、MDA 水平明顯低于愈合不良組，SOD 水平明顯高于愈合不良組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 不同骨折愈合情況的患者CGRP、EGF、TGF-β1 水平、應激指標水平比較（±s）Table 2 Comparison of CGRP，EGF，TGF-β 1 levels and stress index levels in patients with different fracture healing conditions（±s）

表2 不同骨折愈合情況的患者CGRP、EGF、TGF-β1 水平、應激指標水平比較（±s）Table 2 Comparison of CGRP，EGF，TGF-β 1 levels and stress index levels in patients with different fracture healing conditions（±s）

組別愈合良好愈合不良t 值P 值n 116 120 CGRP（pg/mL）53.45±6.24 75.45±8.45 20.414＜0.001 EGF（μg/L）1.12±0.28 1.68±0.43 8.412＜0.001 TGF-β1（μg/L）40.25±4.81 51.36±5.75 11.330＜0.001 SOD（nU/mL）76.65±4.68 62.35±4.10 17.382＜0.001 MDA（μmol/L）5.89±0.70 6.67±0.89 5.278＜0.001

2.3 CGRP、EGF 及TGF-β1 與應激指標水平相關性分析

CGRP、EGF 及TGF-β1 與SOD 水平呈負相關（P＜0.05），與MDA 水平呈正相關（P＜0.05）。見表3。

表3 CGRP、EGF 及TGF-β1 與應激指標水平相關性分析Table 3 Correlation Analysis of CGRP，EGF，TGF-β1 and stress index levels

2.4 GRP、EGF 及TGF-β1 與Lane-Sandhu X 線評分的相關性

CGRP（r=-0.568）、EGF（r=-0.325）及TGF-β1水平（r=-0.631）與Lane-Sandhu X 線評分呈負相關（P＜0.05）。見圖1。

圖1 CGRP、EGF 及TGF-β1 與Lane-Sandhu X 線評分的相關性分析Figure 1 Correlation Analysis of CGRP，EGF，TGF-β1 and lane Sandhu X-ray score

3 討論

發生創傷性骨折時，患者機體內會發生一些急性期反應，會導致實驗室相關指標水平變化［9］。本研究重點分析不同愈合情況的創傷性骨折患者血清CGRP、EGF 及TGF-β1 水平情況，確定創傷性骨折患者應激反應及骨折愈合情況是否與CGRP、EGF 及TGF-β1 水平存在關系。

CGRP 是一種神經肽，在骨組織中分布較廣，多項研究表明CGRP 在骨代謝及骨損傷病理過程中發揮重要作用［10］。CGRP 可通過與靶細胞表面的受體結合，發揮功能作用［11］。本研究中，愈合良好組CGRP 水平顯著低于愈合不良組，這一研究結果與Mollahosseini 等學者［12］報道結果相一致。Lee 等學者［13］通過動物實驗得出，顱骨骨折的大鼠血清CGRP 水平明顯高于正常大鼠，且局部CGRPmRNA 表達明顯升高?？梢娧錍GRP 濃度的變化對骨折愈合意義重大。

國外文獻報道，在創傷組織修復過程中，細胞因子可調節局部細胞的活性以促進細胞增殖［14］。有學者發現，EGF 是由炎癥細胞以及單核細胞分泌而來的細胞因子，其能對細胞成纖維細胞以及表皮細胞等產生有效的修復作用，并可促進細胞分裂增殖及向骨細胞轉化，加速骨折的修復［15］。TGF-β1 可促進膠原合成，同時還能夠增加非膠原蛋白合成，如纖維連接蛋白、膠狀蛋白與內皮素，調節整合素，促進細胞外基質蛋白合成，促進骨折愈合。

SOD 為體內重要活性物質，對創傷性患者骨折后的愈合進度具有積極作用，MDA 能有效反映體內脂質過氧化程度，兩者的檢測能有效地反應出患者機體應激反應［16］。Lane-Sandhu X 線評分為臨床常用的評估骨折患骨形成、骨連接、骨塑型情況的標準［17］。檢索國內外文獻，尚未見CGRP、EGF、TGF-β1 水平與SOD、MDA、Lane-Sandhu X線評分相關的報道。本研究結果顯示，CGRP、EGF、TGF-β1 與SOD 水平、Lane-Sandhu X 線評分呈負相關，與MDA 水平呈正相關?？梢?，CGRP、EGF、TGF-β1 與創傷性骨折患者應激反應程度、骨折愈合情況密切相關。因此，在患者骨折發生后2周左右檢測CGRP、EGF、TGF-β1 水平是評估患者預后狀態的最佳時機。

綜上所述，CGRP、EGF、TGF-β1 可作為觀察創傷性骨折患者應激反應、骨折愈合情況的重要指標，臨床需加強動態加測創傷性骨折患者CGRP、EGF、TGF-β1 水平。后續將擴大研究范圍，進一步分析CGRP、EGF、TGF-β1 對評估創傷性骨折患者應激反應程度、骨折愈合情況的靈敏度及特異度，增加診斷準確性。