肺結核潛伏期和活動期患者外周血sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平的變化及臨床意義

張少毅，鐘國偉，桑楊

陜西省結核病防治院結核內科，陜西 西安 710100

結核病是由結核分枝桿菌(MTB)感染所致傳染病，對人類健康造成嚴重威脅。既往調查顯示，每年新發結核病高達800萬～1 000萬，并且死亡病例數達300萬[1]。當前，臨床尚未明確結核病具體分子機制，一般認為其和細胞因子以及免疫調節有關。有研究表明，Th1細胞分泌白介素-2(IL-2)、γ干擾素(IFN-γ)等因子參與機體細胞免疫，白介素-6(IL-6)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)屬于前炎細胞因子，亦可參與結核病患者免疫病理過程[2-3]。因為人類易感MTB，其一般在宿主體內能夠長時間潛伏，如果機體免疫功能減弱，潛伏期肺結核會進展為活動期肺結核[4-5]。既往研究一般通過與健康體檢者之間的比較，探究肺結核病人T細胞亞群與有關炎性細胞因子表達水平的變化，但鮮少有報道專門研究潛伏期和活動期肺結核患者細胞因子表達的差異。因此，本文比較了肺結核潛伏期和活動期患者外周血可溶性白介素-2受體(sIL-2R)、IL-6、IFN-γ水平，并分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月至2020年2月陜西省結核病防治院收治的82例活動期肺結核患者(活動期組)進行前瞻性研究。納入標準：(1)與《肺結核診斷和治療指南》[6]中有關診斷標準相符：①X線胸片發現活動性病灶；②產生結核中毒癥狀；③痰液檢測顯示抗酸染色陽性至少1次；滿足上述至少2項則確診；(2)具有正常智力與溝通能力。排除標準：(1)伴隨自身免疫性疾病，如艾滋病或者甲狀腺功能亢進等；(2)惡性腫瘤患者；(3)合并心肝腎等嚴重器質性病變者；(4)入組前近4個月內接受過激素、免疫調節劑或者抗生素等治療者。選取同期我院收治的82例肺結核潛伏期患者作為潛伏期組，82例健康體檢正常者作為對照組。本研究經醫院倫理委員會批準，所有受檢者均簽署研究知情同意書。

1.2 治療方法 對活動期肺結核患者采取2HREZ/4HR化療方案治療。具體方法：服用異煙肼(國藥準字號：H62020237，生產廠家：甘肅扶正藥業科技股份有限公司)0.3 g/次，1次/d；服用利福平(國藥準字號：H21020837，生產廠家：沈陽抗生素廠)0.6 g/次，1次/d；服用吡嗪酰胺(國藥準字號：H51020877，生產廠家：成都錦華藥業有限責任公司)0.75 g/次，2次/d；服用乙胺丁醇(國藥準字號：H21022349，生產廠家：沈陽紅旗制藥有限公司)1.0 g/次，1次/d。干預6個月，包括強化治療2個月以及鞏固治療4個月。

1.3 檢測方法 潛伏期、活動期肺結核患者初診時與對照組體檢當天，采集外周靜脈血5 mL，予以離心(3 000 r/min)處理10 min，然后取上清液置于-20℃冰箱里面保存待測。采取酶聯免疫吸附法進行sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平檢測，檢測試劑盒來自美國羅氏公司，嚴格依據試劑盒說明書完成操作過程。

1.4 統計學方法 應用SPSS22.0軟件完成數據統計分析。計量資料符合正態分布，以均數±標準差(±s)表示，多組比較使用單因素方差分析，多組兩兩比較使用LSD-t法，兩組間比較采用獨立樣本t檢驗，治療前后采用配對樣本t檢驗；計數資料比較采用χ2檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 三組受檢者的一般資料比較 三組受檢者的性別、年齡及身體質量指數(BMI)等一般資料比較差異均無統計學意義(P＞0.05)，見表1。

表1 三組受檢者的一般資料比較

2.2 三組受檢者的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平比較 活動期組患者的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平明顯高于潛伏期組與對照組，且潛伏期組明顯高于對照組，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

表2 三組受檢者的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平比較(±s)

表2 三組受檢者的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平比較(±s)

注：與對照組比較，a P＜0.05；與潛伏期組比較，b P＜0.05。

組別活動期組潛伏期組對照組F值P值例數82 82 82 sIL-2R(pmol/L)186.73±30.25ab 121.60±18.64a 67.84±10.59 634.297 0.001 IFN-γ(ng/L)39.53±7.04ab 18.62±2.56a 10.14±1.65 956.688 0.001 IL-6(ng/L)47.05±6.12ab 9.17±1.35a 2.08±0.37 3648.621 0.001

2.3 不同病灶范圍活動期肺結核患者的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平比較 血清sIL-2R為1～2肺野＜3～4肺野＜5～6肺野，差異均有統計學意義(P＜0.05)；5～6肺野IFN-γ水平高于1～2肺野與3～4肺野，差異有統計學意義(P＜0.05)，而1～2肺野與3～4肺野比較差異無統計學意義(P＞0.05)；1～2肺野、3～4肺野與5～6肺野患者IL-6水平比較差異無統計學意義(P＞0.05)，見表3。

表3 不同病灶范圍活動期肺結核患者的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平比較(±s)

表3 不同病灶范圍活動期肺結核患者的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平比較(±s)

注：與5～6肺野比較，a P＜0.05；與3～4肺野比較，b P＜0.05。

病灶范圍1～2肺野3～4肺野5～6肺野F值P值例數34 28 20 sIL-2R(pmol/L)134.05±24.68ab 206.78±35.61a 226.35±40.16 62.597 0.001 IIFN-γ(ng/L)35.62±6.18a 34.53±6.23a 45.89±8.05 19.750 0.001 IL-6(ng/L)46.72±6.08 47.93±6.10 48.07±6.15 0.433 0.650

2.4 有無空洞活動期肺結核患者的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平比較 有空洞與無空洞患者sIL-2R、IL-6比較差異均無統計學意義(P＞0.05)；有空洞患者的IFN-γ水平明顯高于無空洞患者，差異有統計學意義(P＜0.05)，見表4。

表4 有無空洞活動期肺結核患者的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平比較(±s)

表4 有無空洞活動期肺結核患者的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平比較(±s)

病情有空洞無空洞t值P值例數45 37 sIL-2R(pmol/L)183.64±38.62 185.07±36.48 0.171 0.865 IFN-γ(ng/L)45.12±8.01 36.27±6.25 5.485 0.001 IL-6(ng/L)48.02±6.13 47.18±6.05 0.621 0.536

2.5 活動期肺結核患者治療前后的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平比較 活動期肺結核患者治療后的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平較治療前明顯降低，差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表5。

表5 活動期肺結核患者治療前后的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平比較(±s)

表5 活動期肺結核患者治療前后的血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ水平比較(±s)

時間治療前治療后t值P值例數82 82 sIL-2R(pmol/L)186.73±30.25 102.46±18.72 31.166 0.001 IFN-γ(ng/L)39.53±7.04 28.15±4.82 17.378 0.001 IL-6(ng/L)47.05±6.12 5.27±0.96 106.874 0.001

3 討論

臨床普遍認為，人體免疫系統參與結核病發生、進一步發展與轉歸，其中IL-6等細胞因子不僅可啟動免疫應答，加快感染發生，同時在疾病發展期間還起到調節免疫反應作用[7-8]。肺結核免疫機制中，以CD4+T淋巴細胞最關鍵，當其被結核菌活化，將形成Th1以及Th2細胞因子，Th1主要合成TNF-α、IL-2等，Th2則主要合成白介素-10(IL-10)與IL-6等。IL-6主要來自CD4+T淋巴細胞以及巨噬細胞等，其具有多種功能，能夠誘導B細胞增殖以及分化，同時在一定程度上激活巨噬細胞，與人體多種免疫疾病的出現有關[9]。本研究中，血清IL-6為：活動期組＞潛伏期組＞對照組，表明IL-6可能參與肺結核的產生?？紤]與結核感染可損傷到機體局部，尤其是活動期肺結核，可能過度激活人體單核巨噬細胞以及淋巴細胞，從而分泌大量IL-6進行免疫細胞調節有關[10-11]。

sIL-2R來自活化淋巴細胞與相應單核細胞，屬于活化淋巴細胞膜上的IL-2Rα鏈成分，其從細胞膜脫落之后進入血液循環系統，表達水平的提升會降低IL-2保護作用。本研究中，活動期組血清sIL-2R明顯高于其余兩組，且潛伏期組明顯高于正常對照組，提示肺結核發展可能與sIL-2R過度表達有關。sIL-2R可能通過影響IL-2的機制參與肺結核發展：①sIL-2R由細胞膜表面脫落后，使得膜白介素-2受體減少，IL-2作用的目標細胞隨之減少，以此對IL-2功能進行間接調節；②sIL-2R與膜白介素-2受體競爭結合IL-2，促使IL-2廓清加速，降低人體自分泌效應，有效抑制T細胞增殖過程，降低IL-2依賴的相應免疫應答反應，導致IL-2效應細胞(即NK細胞)無法保持原有自然殺傷活性，因此sIL-2R屬于免疫抑制物質。有報道稱，人體血清sIL-2R表達上調時，其作為一種“封閉因子”，能有效結合IL-2，起到抑制細胞免疫作用[12]。本研究中，5～6肺野患者sIL-2R水平明顯高于1～2肺野與3～4肺野患者，3～4肺野者明顯高于1～2肺野者，與劉楠等[13]研究觀點一致。說明隨病灶范圍增加，肺結核患者sIL-2R表達水平升高。分析原因：主要由于sIL-2R分泌增多導致IL-2表達水平降低，人體抗結核菌能力減弱，免疫抑制作用加重，病灶范圍擴大。

IFN-γ為人體活化T淋巴細胞以及自然殺傷細胞所合成免疫調節因子，是一種Th1細胞因子，可以提高巨噬細胞殺菌能力。相關文獻指出，相較于健康者，結核病患者IFN-γ水平呈明顯降低趨勢[14]。亦有研究表明，肺結核患者IFN-γ表達水平較正常對照組與肺癌組更高[15]。本研究中，活動期組與潛伏期組血清IFN-γ水平均異常升高，且活動期組升高更顯著，與上述研究觀點一致，表明IFN-γ過度表達可能參與肺結核病程。本研究發現，IFN-γ表達水平與結核病患者病情有關，當病情加重時，會分泌更多IFN-γ參與人體抗結核免疫過程。主要因為IFN-γ可以激活巨噬細胞有效吞噬病原體，同時將抗原呈遞給相應T淋巴細胞，使得獲得性細胞免疫過程啟動，促進疾病發展。有報道稱，IL-6對結核病療效評估具有重要檢測價值[16]。本研究中活動期結核病患者經過治療，血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ表達水平均明顯降低，與上述報道觀點相符，說明sIL-2R、IL-6、IFN-γ屬于活動期結核病患者療效判定重要指標，水平降低預示著病情好轉。

綜上所述，肺結核活動期與潛伏期患者血清sIL-2R、IL-6、IFN-γ均異常升高，活動期升高更明顯，sIL-2R、IFN-γ、IL-6水平檢測可用于患者活動期病情及臨床療效評估。