農藥殘留檢測實驗室參加能力驗證考核合格關鍵環節的探討

王聯廣，周樹婭*，范 斌，伍湘竹，馬 鵬，石安憲

（1.昭通市綠色食品發展中心，云南昭通 657000；2.昭通市昭陽區農業環境保護監測站，云南昭通 657000）

能力驗證是通過實驗室間的比對，按照制定評價標準評價實驗室參加者的檢測能力[1-3]。定期開展檢測實驗室能力驗證是計量認證的特定要求[4]。每年國家農業農村部或云南省農業廳都會對農產品實驗室進行能力驗證，通過參加能力驗證可了解自己的實驗室所處的水平，有利于發現和解決問題，進一步提高自身技術能力和管理水平。本文介紹了能力驗證過程的一些經驗，如能力驗證前期準備、樣品領取、樣品前處理、多儀器相互驗證、結果判定和數據報送等諸多方面的工作技巧。只有平時就具有過硬的檢測技術，才能更好地完成能力驗證工作。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

花椰菜（含農藥）能力驗證樣品；4 μg·mL-1標準混合物質（云南省農業科學院質量標準與檢測技術研究所）；甲胺磷等40種標準物質[1 000 mg·L-1，農業農村部環境保護科研監測所（天津）]；正己烷、丙酮[色譜純，賽默飛世爾科技（中國）科技有限公司]；氨基、弗羅里矽柱（1 g/6 mL，天津博納艾杰爾科技有限公司）；乙腈（分析純，國藥集團化學試劑有限公司）；其他試劑均為分析純。

1.2 儀器與設備

安捷倫7890B氣相色譜儀配uECD/FPD檢測器（美國安捷倫公司）；旋轉蒸發RE-2000B（上海亞榮生化儀器廠）；電子天平DT-500B（感量0.01 g，常熟市金羊砝碼儀器有限公司）；SK-1型快速混勻器（江蘇金壇環宇科學儀器廠）；勻漿機IKA T18（艾卡有限公司）；固相萃取裝QSE-240011、智能氮吹儀MFV-36（得泰儀器科技有限公司）。

1.3 實驗方法

1.3.1 樣品前處理

（1）提取。同時用100.0 mL乙腈多次沖洗驗證樣品和自制質控樣品的方式轉移塑料離心管的樣品于250 mL樣品瓶中，可使用玻璃棒或塑料小勺輔助轉移，高速勻漿2 min后用濾紙過濾，收集到裝有10～14 g氯化鈉的200 mL具塞量筒中，濾液約100 mL，蓋上蓋子劇烈振蕩1 min，在室溫條件下靜置30 min。待分層后，吸取10.0 mL提取試液于150 mL雞心瓶中，在40 ℃旋轉蒸發至近干；有機磷加入5 mL丙酮過膜入進樣小瓶；有機氯加入2 mL正己烷，蓋上鋁箔待凈化。

（2）凈化。有機氯農藥，將弗羅里矽柱依次用5.0 mL丙酮+正己烷（10+90）、5.0 mL正己烷預淋條件化，當溶劑液面達到柱吸附層表面時，立即倒入樣品溶液，用15 mL刻度離心管接收洗脫液，用5 mL丙酮+正己烷（10+90）涮洗雞心瓶后淋洗弗羅里矽柱，并重復一次。在水浴溫度40 ℃條件下，氮吹蒸發至小于5 mL，用正己烷定容至5.0 mL，在旋渦混合器上混勻，分別移入2 mL自動進樣器樣瓶中，待測[5]。

1.3.2 色譜條件

色譜條件：FPD/ECDDB-5/17石英毛細管柱（30 m×0.32 mm×0.25 μm），載氣為氮氣（99.999%），恒流；流量3.0 mL·min-1。進樣口溫度為220/300 ℃；FPD/ECD檢測器溫度為250/300 ℃；尾吹為氮氣60 mL·min-1； 柱 溫： 初 溫 150 ℃ 保 持 2 min， 以8 ℃ ·min-1升至 260 ℃，保持 7.25 min；不分流進樣 1.0 μL。

1.3.3 校準溶液配制

使用相同的基質空白溶劑，配制成和盲樣考核濃度相近的標準溶液，進行單點校準。

2 結果與分析

2.1 能力驗證結果

本次能力驗證結果如表1所示，RSD在1.1%～3.2%，符合云南省能力驗證要求，可報送結果。

表1 能力驗證樣品測定結果

2.2 質控結果

本次能力驗證質控結果如表2所示，回收率72.0%～101.2%，RSD在1.1%～7.9%，符合云南省能力驗證要求，可報送結果。

表2 能力驗證質量控制結果

3 討論與結論

3.1 能力驗證關鍵點控制

3.1.1 準備工作

標準物質、試劑耗材、儀器調試、更換色譜柱并老化、換寸管等提前15 d完成；儀器調試完成后測定標準物質，記錄標準物質出峰時間；加標檢測平時回收率不理想的農藥，記錄測定值的穩定性；提前7 d配制新標準物質、鉻酸清洗一批玻璃器皿，自校一批0.1 mL、0.2 mL、0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、5.0 mL和10.0 mL的刻度移液管，以及10 mL離心管和篩1～2個基質干擾峰少的樣品；領取樣品時，模擬準備一批50 g質控樣品，添加0.2 μg·mL-1混合標液農藥，在和能力驗證樣品相同的條件下儲存。

3.1.2 領樣

由于領樣路途遙遠，農藥殘留能力驗證樣品領樣時，準備的冰袋已完全融化，領完樣后可買冰棍使其降溫，以免能力驗證樣品中的農藥分解，樣品為1個空白，3個平行樣品各50 g；同時購買發放樣品單位的分組的混合標準物質農藥，濃度為4 μg·mL-1；在樣品領出，回實驗室途中，同時把實驗室制備的加標和空白樣從冰柜拿出來解凍，等樣品到達實驗室時，驗證樣品和自制質控樣品一起進行前處理。

3.1.3 前處理注意事項

均質器勻漿速度調到中等速度固定的值；旋轉蒸發儀需要慢旋，經常放空，千萬盯住不能旋干，保證雞心瓶濕潤；加足NaCl，振蕩搖勻時間要長，靜置時間盡量達到1 h，使其充分萃取，以免旋蒸時間長，農藥殘留揮發過多，結果偏??；一定要使用移取量準確的離心管、移液管、容量瓶配制液體，以減少系統誤差。

3.1.4 結果判斷

（1）定性。首先上機分析發樣單位的標準品，然后進能力驗證樣品空白對比出的峰有沒有干擾目標峰，再進能力驗證（添加農藥）樣品進行定性，本次氣相色譜定性出目標物質為氧樂果、水胺硫磷、三唑磷、氯氰菊酯和腐霉利，如果有質譜儀器，可與色譜儀器相互驗證定性。

（2）定量。先半定量檢出農藥的濃度范圍，再用空白基質液配制相近的標液濃度準確定量，以減少基質效應、減少誤差；觀察3個能力驗證結果的平行性，如果平行性好，證明前處理沒問題，如果質控樣品回收率實驗結果也好，證明結果在可控范圍內，此時結果便可報送，否則要重新做樣。

3.1.5 數據報送技巧

結果分析首先看質控回收率的情況，如果回收率偏低，就往高處微調結果，如果回收率偏高，就往低處微調結果。比如測定的結果為0.182 mg·kg-1，如果質控回收率比較高的情況下，且實際值為0.15 mg·kg-1，此時的回收率為121.3%，結果為不合格，此時可往下微調測定值為0.180 mg·kg-1，回收率就達到120%；如果質控回收率較低，且實際值為0.26 mg·kg-1，此時的回收率為69.2%，結果為不合格，此時可往上微調測定值為0.182 mg·kg-1，回收率就達到70%，總的原則在數據偏差不大的情況下，考慮到試驗過程中會有各種影響因素，可對結果進行微調。但若數值偏差較大，結果應判定為不合格，不可上報虛假數據。

3.2 結論

能力驗證是一項系統工作，需前期準備、樣品領取、樣品前處理、多儀器相互驗證、結果判定和數據報送技巧等諸多工作細節，本次能力驗證有機磷、有機氯項目檢測出氧樂果0.119 mg·kg-1、水胺硫磷 0.072 0 mg·kg-1、三唑磷 0.120 mg·kg-1、腐霉利0.143 mg·kg-1和氯氰菊酯 0.142 mg·kg-1，質控回收率在72.0%～101.2%，RSD在1.1～7.9，符合云南省能力驗證結果要求，組織單位反饋結果全部為合格，通過總結關鍵技術點，更進一步增強了能力驗證檢測的信心。