腸道病毒在反復呼吸道感染住院患兒中的分子流行病學意義

王 欣，李 寧

(開封市兒童醫院，河南 開封 475000)

呼吸道感染是兒童常見病癥，也是導致5歲以下嬰幼兒死亡的重要原因[1]。其中反復呼吸道感染(Recurrent respiratory tract infections, RRTI)是兒科常見的呼吸道感染[1]。反復呼吸道感染定義是指一年內上呼吸道感染超過一定次數。呼吸道常見感染病原種類多樣，由副流感嗜血桿菌等社區獲得性肺炎感染，由銅綠假單胞菌和肺炎克雷伯菌等醫源獲得性肺炎感染，白色念珠菌和曲霉菌所致真菌感染。兒童的呼吸道感染病原與成人的呼吸道感染病原存在明顯差異，病毒感染是兒童呼吸道感染常見的病原，其中人腸道病毒HEV是導致兒童呼吸道感染的主要致病病毒，根據遺傳物質常見致病腸道病毒HEV屬于RNA類病毒[1，2]。本研究以反復呼吸道感染的患兒為對象，通過進行腸道病毒感染流行病學研究，為兒科相關疾病的預防和治療提供參考依據。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選擇2018年12月～2020年10月在開封市兒童醫院治療的反復呼吸道感染的兒童406例?；純壕现腥A醫學會兒科學分會呼吸學組聯合《中華兒科雜志》編輯委員會在2007年修訂的《反復呼吸道感染診斷參考標準》：反復上呼吸道感染：0～2歲每年上呼吸道感染次數大于7次，3～5歲大于6次，6～14歲大于5次；反復下呼吸道感染：0～2歲每年反復氣管支氣炎大于3次或反復肺炎大于2次，3～14歲反復氣管支氣管炎大于2次或反復肺炎大于2次。家屬已簽知情同意書。

患兒一般資料收集包括一年內呼吸道感染次數，癥狀，實驗室檢查結果，影像學檢測結果等。采集患兒入院當天鼻咽分泌物，放置存在RNA保護液的離心管中，置于4℃保存。

1.2 方法

1.2.1 病毒RNA提取 使用QIAGEN的QIAamp Viral RNA Kit試劑盒提取樣品中的病毒RNA，操作嚴格按說明書進行，去除人rRNA，提取病毒總RNA后，使用Qbuit進行提取。

1.2.2 RT-PCR檢測病毒 使用TaKaRa的RT-PCR試劑盒進行檢測，操作嚴格按說明書進行。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 患兒一般資料

入組患兒一般資料如下：男：女為1.1∶1，年齡分布：1～2歲126例(31.0%)，3～5歲235例(57.9%)，6～14歲45例(11.1%)。反復呼吸道感染易感因素：營養素缺乏203例(50.0%)，被動吸煙264例(65.0%)，藥物使用不當340例(83.7%)，集體生活347例(85.5%)，早產174例(42.9%)。

2.2 腸道病毒檢測結果

406例中單一病毒檢出陽性的268例(66.0%)，兩種及兩種以上病毒檢出陽性的96例(23.6%)。腸道病毒HEV檢出21例(5.2%)，其中腸道病毒HEV-D68 15例(71.4%)，丙型肝炎病毒CV-B1 1例(4.8%)0，丙型肝炎病毒CV-B4 1例(4.8%)，腸道病毒HEV-C117 1例(4.8%)，腸道病毒HEV-A71 1例(4.8%)，ECV 2例(9.6%)。

2.3 腸道病毒的臨床特點

21例腸道病毒感染的患兒中，男：女為1.1∶1，年齡中位數2歲1月，易感因素：營養素缺乏12例(57.1%)，被動吸煙9例(42.9%)，藥物使用不當4例(19.0%)，集體生活5例(23.8%)，早產9例(42.9%)。

3 討論

反復呼吸道感染是兒科常見疾病，給患兒及患兒家庭帶來心理和經濟負擔。反復呼吸道感染的主要發病機制之一是呼吸道免疫屏障破壞，病毒感染與調節性T細胞存在聯系。腸道病毒感染后診斷主要依賴于熒光PCR，不同于細菌感染，病毒感染后進入到人體細胞導致無法進行實驗室培養，只能依托于病毒核酸片段進行PCR或二代高通量測序等方式[3，4]。

本研究對腸道病毒HEV在反復呼吸道感染中的發生及特點進行研究，結果顯示反復呼吸道感染中腸道病毒HEV感染率為5.2%，主要以腸道病毒HEV-D68為主，占71.4%，其他CV-B1，丙型肝炎病毒CV-B4，腸道病毒HEV-C117，腸道病毒HEV-A71，ECV2均有感染，所占比例較少。腸道病毒HEV感染的反復呼吸道感染主要診斷為肺炎，毛細支氣管炎和哮喘，這可能是因為主要是腸道病毒HEV-D68感染。腸道病毒71型(EV-A71)感染與多種疾病的嚴重程度有關，突變體VP1-280T和VP2-139T之間產生的氫鍵有助于加強VP1-VP2復合物的網狀相互作用結構[1，3]。不同分子分型病毒感染后，疾病感染嚴重程度和預后存在差異，因此，探究不同分子分型病毒在我國兒童發病情況，對于精準診治和判斷預后都有重要意義。

本研究認為腸道病毒HEV感染是引起反復呼吸道感染的原因之一，其中主要以腸道病毒HEV-D68感染為主，下呼吸道感染和哮喘的腸道病毒HEV感染率較高，營養素缺乏，被動吸煙和早產是腸道病毒HEV感染的易感因素。