酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片聯合新癀片對牙周病患者組織炎癥反應和骨密度的影響Δ

徐 歡,崔二輝,賈 情,張坤鋒,穆楠楠,趙素倩

(石家莊市人民醫院口腔科,石家莊 050000)

牙周病是多種因素引起的牙周組織慢性炎癥,任何年齡段均可發病,若未及時治療,炎癥可將持續擴散至牙骨質、牙槽骨,導致牙齒松動、移位,牙周病已成為嚴重的口腔健康問題[1-2]。傳統治療以齦上潔治、齦下刮治、根面平整等機械手法及鹽酸米諾環素軟膏、抗菌藥物等藥物輔助治療為主,雖具有顯著效果,但患者對機械治療、抗菌藥物治療接受度不高,其應用受限[3-4]。近年來,微生態調節技術有較大發展,如利用中藥提取物、靶向小分子和酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片等調節口腔生態平衡。新癀片為中成藥,研究結果證實,其具有抗菌消炎、活血化瘀和祛風止痛等作用,為中醫科針對牙周病的常用藥,受到很多抗拒使用抗菌藥物患者的青睞[5-6]。酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片為微生物制劑,能通過調節菌群平衡,控制菌斑代謝,減輕炎癥反應,促進病情康復,已在腸道疾病等全身系統疾病中得到廣泛應用[7-9]。但上述二藥聯合用于口腔疾病的臨床治療并不多見。本研究采用隨機雙盲設計的三組對照研究,進一步探討酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片聯合新癀片對牙周病患者組織炎癥反應和骨密度的影響。

1 資料與方法

1.1 資料來源

選取2021年1月至2022年1月我院慢性牙周病患者進行前瞻性盲法研究。本研究經我院倫理委員會審核批準[院科倫審(2021)第(151號)]。納入標準:符合《牙周病學》[10]中慢性牙周病診斷標準;年齡18～60歲;知情自愿參與,并簽署知情同意書;單顆患牙。排除標準:既往進行過牙周治療者;2周內使用過抗菌藥物或益生菌者;有嚴重基礎疾病或功能障礙性疾病者;妊娠期、備孕期及哺乳期婦女;合并根尖炎、冠周炎等其他口腔感染疾病,影響效果判定者;惡性腫瘤、全身性感染和炎癥疾病者;有精神疾病或語言溝通障礙,影響研究或效果評估者;對本研究相關藥物過敏或過敏體質不宜進行研究者;凝血功能異常,影響研究進行者;存在骨代謝性疾病,影響骨密度效果評定者;不能保證口腔衛生,影響效果評定者;長期服用激素類藥物者。根據上述納入標準,共納入219例患者。采用盲法前,根據就診序號編號,以隨機數字表法分組,并將藥物方案裝入對應編號的信封內,密封保存,在入院就診時經患者同意并符合納入與排除標準條件、簽署知情同意書后,拆開信封,采用對應藥物方案給予治療。分為A、B、C三組,各73例。后期治療過程中,219例患者中僅2例患者因個人原因自愿退出研究,后根據條件予以對應補充脫落編號患者,最終共219例患者完成研究。三組患者性別、年齡、病程和體重(BMI)等一般資料具有均衡性,可進行對照研究,見表1。

表1 三組患者基線資料比較Tab 1 Comparison of baseline data among three groups

1.2 方法

1.2.1 基礎方案:所有患者均進行牙周檢查,并進行潔治、刮治、根面平整、口腔衛生指導和口腔衛生知識講解等干預,給予鹽酸米諾環素軟膏+抗菌藥物(阿莫西林)治療。所有患者基礎方案一致,且用藥期間不得私自更換或加減藥物。

1.2.2 A組治療方案:在“1.2.1”基礎上口服酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片[規格:每片200 mg(每片含酪酸梭菌1×105～1×108個;糖化菌1×105～1×108個;腸球菌2×105～4×108個)],1次1片,1日2次,連續服用1個月。同時口服與新癀片顏色、形狀外觀相同的安慰劑治療5 d。

1.2.3 B組治療方案:在“1.2.1”基礎上口服新癀片(規格:每片重0.32 g),1次3片,1日3次,連續治療5 d,后期不發作不予用藥。同時口服與酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片顏色、形狀外觀相同的安慰劑治療1個月。

1.2.4 C組治療方案:在“1.2.1”基礎上口服新癀片(規格同上),1次3片,1日3次,連續治療5 d,后期不發作不予用藥。同時口服酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片(規格同上),1次1片,1日2次,連續治療1個月。

1.3 觀察指標

(1)牙周指數指標:于治療前、治療5 d后及治療1個月后檢測。①出血指數(BI),采用牙周探針探至牙齦緣下約1 mm,取出探針,觀察30 s后有無出血及牙齦出血。②牙周袋測定深度(PD),采用探針輕輕探測牙周袋深度。③附著喪失(AL),當記錄完PD時,將探針沿人體牙根面輕輕退出,并探尋人體釉牙骨質界位置,測量釉牙骨質界至牙齦緣長度設為a,AL=PD-a。(2)牙周組織炎癥因子:于治療前、治療5 d后及治療1個月后,取病變部位牙齦組織,作為標本,采用免疫組化檢測組織CD3+T細胞、CD4+T細胞和CD68+巨噬細胞水平。(3)骨密度:治療前、治療5 d后及治療1個月后,采用3 D Moriat Micor CT檢查上頜骨前牙區,其中電流調至5 mA,層厚設為0.5 mm,電壓調至50 kV,收集數據進行處理,測量上頜骨牙槽骨骨密度,取3次平均值為最終測量值。(4)唾液菌群:于治療前、治療5 d后及治療1個月后上午進食2 h后,收集自然排出唾液0.5 mL,采用聚合酶反應檢測唾液中梭桿菌(Fn)、牙齦卟啉單胞菌(Pg)、中間普氏菌(Pi)和伴放線放線桿菌(Aa)。

1.4 療效評定標準

參照《牙周病診療指南》[11]中疾病癥狀改善情況及復發情況進行療效評估,顯效:治療5 d后患者牙周腫痛、出血等癥狀消失,且1個月內無復發;有效:治療5 d后患者牙周腫痛、出血等癥狀消失,1個月內復發;無效:治療5 d后患者牙周腫痛癥狀未完全消失,探診仍有出血或癥狀加重。顯效+有效計入總有效。

1.5 統計學方法

2 結果

2.1 三組患者療效比較

C組患者總有效率高于A、B組,復發率低于B組,差異有統計學意義(P<0.05);但A、B組患者總有效率的差異無統計學意義(P>0.05);A組患者復發率低于B組,差異有統計學意義(P<0.05),見表2。

表2 三組患者療效比較[例(%)]Tab 2 Comparison of efficacy among three groups [cases (%)]

2.2 三組患者牙周指數指標比較

經單因素方差分析,治療前,三組患者BI、PD和AL水平的差異無統計學意義(P>0.05);治療5 d后、治療1個月后,各組間BI、PD和AL水平整體比較,差異有統計學意義(P<0.05)。進一步兩兩比較顯示,治療5 d后、治療1個月后,C組患者的BI、PD和AL水平均低于A、B組,差異有統計學意義(P<0.05);A組患者各指標在治療5 d后與治療1個月后的差異無統計學意義(P>0.05),而B組患者治療1個月后各指標水平較治療5 d后升高,差異有統計學意義(P<0.05);A組患者治療5 d后各指標水平高于B組,但治療1個月后各指標水平反而較B組低,差異有統計學意義(P<0.05),見表3。

表3 三組患者治療前后牙周指數指標比較Tab 3 Comparison of periodontal indicators among three groups before and after

2.3 三組患者牙周組織炎癥因子比較

經單因素方差分析,治療前,三組患者CD4+T細胞、CD3+T細胞和CD68+巨噬細胞水平的差異無統計學意義(P>0.05);治療5 d后、治療1個月后,三組患者CD4+T細胞、CD3+T細胞和CD68+巨噬細胞整體比較,差異有統計學意義(P<0.05)。進一步兩兩比較顯示,治療5 d后、治療1個月后,C組患者CD4+T細胞、CD3+T細胞和CD68+巨噬細胞水平均低于A、B組,差異有統計學意義(P<0.05);A組患者治療1個月后各細胞水平較治療5 d后呈降低趨勢,而B組患者治療1個月后各細胞水平較治療5 d后呈升高趨勢(P<0.05),且A組患者治療5 d后各細胞水平高于B組(P<0.05),差異均有統計學意義;但治療1個月后則剛好相反(CD68+巨噬細胞、CD3+T細胞,P<0.05)或差異無統計學意義(CD4+T細胞,P>0.05),見表4。

表4 三組患者治療前后牙周組織炎癥因子比較Tab 4 Comparison of inflammatory factors in periodontal tissues among three groups before and after treatment HPF)

2.4 三組患者牙槽骨骨密度比較

經單因素方差分析,治療前,三組患者牙槽骨骨密度的差異無統計學意義(P>0.05);治療5 d后、治療1個月后,三組患者牙槽骨骨密度整體比較,差異有統計學意義(P<0.05)。進一步兩兩比較顯示,治療5 d后、治療1個月后,C組患者牙槽骨骨密度均高于A、B組,差異有統計學意義(P<0.05);A組患者治療1個月后牙槽骨骨密度較治療5 d后呈升高趨勢,差異有統計學意義(P<0.05),而B組患者治療1個月后牙槽骨骨密度較治療5 d后呈降低趨勢,但差異無統計學意義(P>0.05);且A組患者治療5 d后牙槽骨骨密度低于B組,差異有統計學意義(P<0.05),但治療1個月后兩組患者的差異無統計學意義(P>0.05),見表5。

表5 三組患者治療前后牙槽骨骨密度比較Tab 5 Comparison of alveolar bone mineral density among three groups before and after treatment g/cm3)

2.5 三組患者唾液菌群比較

經多組間χ2檢驗,三組患者治療前Pg、Aa、Pi和Fn檢出率的差異無統計學意義(P>0.05);治療5 d后、治療1個月后,三組患者間Pg、Aa、Pi和Fn檢出率整體比較,差異有統計學意義(P<0.05)。進一步兩兩比較顯示,治療5 d后、治療1個月后,C組患者Pg、Aa、Pi和Fn檢出率均低于A、B組,差異有統計學意義(P<0.05);A組患者治療1個月后各唾液菌群檢出率較治療5 d后呈降低趨勢,差異有統計學意義(P<0.05),A、B組患者治療5 d后各唾液菌群檢出率的差異無統計學意義(P>0.05);治療1個月后,A組患者各唾液菌群檢出率均低于B組,差異有統計學意義(P<0.05),見表6。

表6 三組患者治療前后唾液菌群檢出率比較[例(%)]Tab 6 Comparison of detection rate of salivary flora among three groups before and after treatment [cases (%)]

3 討論

3.1 新癀片治療分析

中藥具有全身調理作用,具有多成分、多靶點、不良反應小等優勢,能通過多機制發揮作用,減輕牙周病癥狀。新癀片主要由九節茶、人工牛黃、三七和珍珠粉等組成。其中,九節茶能祛風通絡、活血涼血、消斑散瘀、清熱解毒,且能提高機體免疫功能,抗病原微生物,從發揮抗菌消炎作用;三七能消腫止血、散瘀定痛,且能改善機體微循環;牛黃具有清熱解毒、化痰定涼之效,且現代研究結果表明其具有顯著抗炎、抗菌鎮靜作用;珍珠粉能排膿生肌、清熱解毒和安神;諸藥聯合治療牙周病,能快速緩解患者牙疼、牙齦出血和牙齦紅腫等癥狀[12-13]。本研究通過盲法對照發現,與單用酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片相比,聯合新癀片治療的患者癥狀改善更為明顯,BI、PD和AL等牙周指數指標明顯降低,口腔致病菌檢出率明顯降低,說明聯合新癀片治療能進一步促進牙周病癥狀恢復,調節口腔菌群?？赡苁怯捎谛埋テ芑钛?、消腫止痛、清熱解毒,并具有顯著抗炎鎮痛作用,還能提高機體免疫功能,從而能快速促進癥狀消退。但在單純新癀片治療中(B組)發現,雖然早期癥狀改善明顯,但隨著停藥后復發患者增多,各種指數呈現不良變化或加重趨勢,可能由于新癀片治療多為短期治療,癥狀消失后即停藥,導致遠期效果不理想,復發增多。

3.2 酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片治療分析

國內外研究結果表明,厭氧菌感染是導致牙周病發病的原因之一,而通過機械治療可清除病變組織,從而抑制炎癥進展、促進再生,達到治療牙周疾病的目的[14-15]。但單純機械治療后患者附著喪失明顯增加,且對口腔微生態環境無有利影響,會進一步導致疾病復發[16-17]。而抗菌藥物治療雖能殺滅有害菌群,但同時會進一步加重口腔菌群失衡[18]。酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片是人體有益菌復合物,本研究通過B、C組對比發現,聯合酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片治療在降低復發率、改善早期癥狀及調節口腔菌群方面具有顯著作用。目前認為酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片防治牙周病的機制主要與以下作用有關:(1)調控口腔微生態,發揮有益菌保護作用,增加對口腔黏膜黏附作用,提高防御功能;(2)調控局部免疫,抑制白細胞介素6、腫瘤壞死因子α等分泌,減輕炎癥反應;(3)口服進入腸道,經腸道吸收后調節全身代謝及免疫功能,影響牙周骨的吸收和重建[19-20]。本研究A組患者結果顯示,酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片對維持遠期菌群狀態優勢明顯,對降低復發率具有更顯著優勢。

3.3 酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片聯合新癀片應用分析

本研究結果發現,酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片重在改善牙周菌群,控制致病菌,降低遠期復發率(B組vs. C組),而新癀片對早期癥狀效果改善更為明顯(A組vs. B組),因此,二者聯合治療能通過優勢互補實現多機制融合發揮治療作用,進一步促進早期癥狀改善,并通過酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片輔助長期治療,進一步控制遠期復發率,而且本研究中酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片治療未見不良反應,證明聯合方案具有較高的可行性及應用價值。

3.4 酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片聯合新癀片對組織炎癥反應和骨密度的改善作用

炎癥反應參與牙周病發生與進展過程,隨病情進展可進一步擴散至牙骨質、牙槽骨,導致骨密度降低,進而引發各種口腔疾病[21-22]。研究結果發現,牙周炎患者存在巨噬細胞過度激活,T細胞、CD4+T細胞比例顯著升高,治療后隨著病情改善呈逐漸下降趨勢[23-24]。本研究中,治療前三組患者CD4+T細胞、CD3+T細胞和CD68+巨噬細胞水平異常升高,說明炎癥狀態處于異常激活狀態。進一步對比發現,治療后C組患者CD4+T細胞、CD3+T細胞和CD68+巨噬細胞水平及各唾液菌群檢出率均低于A、B組,牙槽骨骨密度均高于A、B組,提示聯合治療能夠進一步減輕炎癥反應,改善患者骨密度。分析認為,酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片和新癀片能通過提高局部免疫、調節全身代謝和調節口腔有益菌群等多種作用抑制炎癥反應,減輕病情。

綜上所述,酪酸梭菌腸球菌三聯活菌片、新癀片在牙周病治療中各有優勢,二者聯合治療能進一步提高臨床療效,減輕炎癥反應,促進牙周恢復,降低復發率,且在改善牙槽骨密度方面也有一定作用。但是臨床對骨密度的具體影響機制尚缺乏研究,且若進一步延長新癀片治療時間,能否進一步改善遠期預后,以及安全性如何,仍有待臨床進一步研究。