市售蜂蜜中氟喹諾酮類抗生素殘留風險因子評估

陳 明 唐敏敏 欒楓婷 邵雪梅 龔 蘭

（江蘇省農業科學院農產品質量安全與營養研究所， 農業農村部農產品質量安全風險評估實驗室 （南京），江蘇省食品質量安全重點實驗室－省部共建國家重點實驗室培育基地， 南京 210014）

氟喹諾酮類抗生素藥物是一種人畜共用的人工合成的廣譜抗菌藥， 適用于治療多種細菌感染性疾病。 良好的臨床效果使其在畜禽、 水產養殖業中應用較普遍。 據調查， 在畜禽養殖業中主要使用的氟喹諾酮類抗生素品種有諾氟沙星、 培氟沙星、 依諾沙星、 氧氟沙星、 環丙沙星、 沙拉沙星、 氟羅沙星、 二氟沙星、 恩諾沙星、 洛美沙星等10 多種。但據有關研究發現， 氟喹諾酮類抗生素如左氧氟沙星、 環丙沙星、 氟羅沙星、 洛美沙星、 氧氟沙星等在使用中會產生一定副作用， 可能會影響青少年關節軟骨發育， 引起人體皮膚過敏和光毒性反應， 對人中樞神經、 心血管和呼吸、 消化等生理代謝系統產生不良反應， 特別是老年人受影響概率往往較大[1～2]。 另外環境和食物中的氟喹諾酮類抗生素殘留會造成人類致病菌耐藥性的增強， 給人類疾病治療帶來影響， 所以長期食用含氟喹諾酮類抗生素殘留的農產品 （食品） 對人體有一定的潛在危害[1～2]。為保障動物產品質量安全和公共衛生安全， 原農業部于2015 年發布第2292 號公告[3]， 規定自2016年12 月31 日起， 停止經營、 使用用于食品動物的洛美沙星、 培氟沙星、 氧氟沙星、 諾氟沙星4 種原料藥的各種鹽、 酯及其各種制劑。

因為筆者團隊在多次市售蜂蜜質量安全監測中發現檢出氟喹諾酮類抗生素藥物殘留的樣品數量往往占到全部抗生素殘留檢出樣品數量的一半以上，因此， 本文對市售蜂蜜中的氟喹諾酮類抗生素殘留情況開展長期風險跟蹤監測研究， 分析評估影響蜂蜜質量安全的關鍵風險因子， 旨在為后續蜂蜜質量安全監管工作提供參考依據。

一、 監測調查對象與方法

（一） 監測參數和樣品采集風險跟蹤監測參數選擇了農業部第2292 號公告中禁限的培氟沙星、氧氟沙星、 諾氟沙星、 洛美沙星等4 種藥物以及恩諾沙星、 環丙沙星、 沙拉沙星共7 種氟喹諾酮類抗生素。

蜂蜜生產行業情況具有一定特殊性， 大多蜂農是隨著花期全國各地追花采蜜， 許多蜂蜜生產廠家收購的蜜源產品也來自全國不同地區。 加之目前我國發達的物流運輸業， 一定區域內終端市場銷售的來自不同省份生產廠家的蜂蜜產品， 基本能客觀反映我國目前市售蜂蜜的整體質量安全狀況。

監測調查樣品采集于大型超市和小型零售店，數量比例約為1∶1。 最終采集的蜂蜜樣品標注的生產廠家分布于江蘇省、 安徽省、 江西省、 浙江省、 上海市、 湖南省、 湖北省、 云南省、 廣東省、廣西壯族自治區、 河南省、 河北省、 四川省、 山東省、 福建省、 吉林省、 貴州省、 北京市、 黑龍江省等19 個地區， 覆蓋了我國蜂蜜主要生產區域。

（二） 監測方法和儀器設備樣品檢測方法是采用GB/T 23412－2009 《蜂蜜中19 種喹諾酮類藥物殘留量的測定方法 液相色譜－質譜/ 質譜法》[4]（2022 年2 月廢止）， 其方法檢出限為0.001 mg/kg。

主要儀器設備和試劑： 安捷倫6410 三重四極桿液質聯用儀 （美國Aglient 公司）； API6500+三重四極桿液質聯用儀（美國AB SCIEX 公司）； NEVAP－24 氮吹濃縮儀 （美國Organomation 公司）；20 位固相萃取裝置（美國Waters 公司）； 高速冷凍離心機 （德國Eppendorf 公司）； 氟喹諾酮藥物標準品（德國Dr.Ehrenstorfer 公司）。

（三） 檢出判斷標準關于蜂蜜中氟喹諾酮類藥物殘留限量， 各國的監管標準并不一致。 我國蜂蜜主要出口國（地區） 歐盟、 日本和美國對獸藥使用都實行準許列表制， 在蜜蜂養殖中批準使用的獸藥很少， 并不包含氟喹諾酮類藥物。 對未規定要求的藥物， 歐盟和日本按 “一律標準” 即0.01 mg/kg執行最大殘留限量標準； 美國通常按儀器方法檢測限參照執行， 一般是0.002 mg/kg[5～6]。 我國2023年2 月新實施的GB 31650.1－2022 《食品安全國家標準 食品中41 種獸藥最大殘留限量》[7]中規定了4 種禁止在養殖生產中使用的氟喹諾酮類抗生素培氟沙星、 氧氟沙星、 洛美沙星、 諾氟沙星在蜂蜜中的最大殘留限量為0.005 mg/kg。

我國未批準氟喹諾酮類藥物在蜜蜂養殖中使用， 對于尚未制定殘留限量的藥物， 在監測時通常以方法檢測限作為檢出判斷依據。 在風險跟蹤監測研究中， 筆者團隊采用了GB/T 23412－2009 《蜂蜜中19 種喹諾酮類藥物殘留量的測定方法 液相色譜－質譜/ 質譜法》 作為監測方法， 各種藥物殘留陽性樣品檢出統一以方法的檢出限0.001 mg/kg作為判定標準。

二、 監測結果分析

（一） 跟蹤監測結果2011 年和2015－2020年， 筆者團隊對市售蜂蜜中氟喹諾酮類抗生素殘留進行了多輪抽樣跟蹤監測， 匯總結果見表1。

表1 2011 年及2015－2020 年市售蜂蜜中檢出氟喹諾酮類藥物殘留的樣品數統計 （批次）

2002 年， 原農業部頒布第193 號公告 《食品動物禁用的獸藥及其他化合物清單》， 2005 年頒布第560 號公告 《獸藥地方標準廢止目錄》， 將氯霉素、 金剛烷胺、 頭孢類、 林可酰胺類等抗生素在農業生產中列為禁用停用獸藥。 但因為我國缺乏滿足產業需求的低毒低殘留蜂藥， 造成蜂農使用一些尚未登記批準甚至禁限用的獸藥。 監測結果也顯示，蜂蜜中氟喹諾酮類抗生素殘留檢出率曾經達到50% （2011 年）， 有的樣品甚至同時檢出多種氟喹諾酮類抗生素殘留， 可見當時在蜜蜂養殖中使用氟喹諾酮類抗生素的情況還是比較普遍的。

隨著國家對農產品質量安全的狠抓重治， 原農業部于2015 發布第2292 號公告， 自2016 年12 月31 日起在食品動物中停止使用洛美沙星、 培氟沙星、 氧氟沙星、 諾氟沙星等4 種獸藥。 通過對蜂蜜中培氟沙星、 氧氟沙星、 諾氟沙星、 洛美沙星、 恩諾沙星、 環丙沙星和沙拉沙星等7 種氟喹諾酮類抗生素殘留的跟蹤監測可以發現， 7 種藥物殘留的總檢出率從2011 年的50.0%降到2020 年的6.5%（見圖1）， 下降明顯， 說明氟喹諾酮類抗生素藥物的禁用政策在蜜蜂養殖產業中起到了一定的規范引導作用。

圖1 2011 年及2015－2020 年監測的蜂蜜樣品中7 種氟喹諾酮類抗生素殘留的檢出率情況

（二） 風險因子分析對2011 年及2015－2020年期間7 種氟喹諾酮類抗生素藥物殘留的跟蹤監測數據結果分別進行統計分析， 發現4 種禁用的氟喹諾酮類抗生素中氧氟沙星、 培氟沙星檢出較少， 洛美沙星未檢出， 諾氟沙星的檢出率高， 在多年監測中基本都占據了總陽性檢出率的一半以上（見圖2）。諾氟沙星在蜂蜜樣品中檢出最高值曾達0.569 mg/kg， 該藥物殘留風險最高， 是影響蜂蜜質量安全的最主要風險因子。

圖2 2011 年及2015-2020 年監測的蜂蜜樣品中諾氟沙星殘留檢出率占總陽性檢出率的百分比

環丙沙星、 恩諾沙星和沙拉沙星等3 種獸藥雖然未列入禁用藥物名單， 但也未獲批準在蜜蜂養殖中使用， 因此在蜂蜜中也不得檢出。 環丙沙星、 恩諾沙星都屬于喹諾酮類化學合成抗菌藥， 化學結構上恩諾沙星比環丙沙星多了一個苯環， 恩諾沙星可在動物體內通過代謝轉化成環丙沙星。 蜜蜂通過飲水喂食或霧化用藥后會將吸收的恩諾沙星經過體內代謝轉化成環丙沙星， 在蜂蜜中產生藥物殘留， 而用藥后蜜蜂體外及蜂箱內殘留的恩諾沙星未經轉化， 也會通過隨機污染在蜂蜜中留下殘留。 所以在蜂蜜質量監測中檢出的大多是代謝后的環丙沙星殘留， 本文監測結果也證實了這一點， 2011 年和2015－2020 年所監測的市售蜂蜜中檢出環丙沙星的樣品數大多遠高于恩諾沙星（見表1）。

在監測中因為恩諾沙星會轉化成環丙沙星的特性， 所以通常是將環丙沙星與恩諾沙星檢出結果相加合進行統計。 環丙沙星和恩諾沙星的合計檢出率占總陽性檢出率的23.1%～54.6% （見圖3）， 說明環丙沙星和恩諾沙星也是影響蜂蜜質量安全的重要風險因子。

圖3 2011 年及2015－2020 年監測的蜂蜜樣品中環丙沙星和恩諾沙星殘留合計檢出率占總陽性檢出率的百分比

三、 討論與結論

通過對蜂蜜中7 種氟喹諾酮類抗生素藥物殘留的長期跟蹤監測， 發現7 種藥物殘留的總檢出率從2011 年的50.0%降低至2020 年的6.5%， 這說明蜜蜂養殖中禁限藥物使用問題近年呈現持續減少的良好勢頭。 監測的7 種氟喹諾酮類抗生素藥物中洛美沙星、 沙拉沙星均未檢出過， 氧氟沙星、 培氟沙星檢出率較低， 說明這4 種獸藥對蜂蜜質量安全的影響較小。 但諾氟沙星檢出率相對較高， 占到7 種氟喹諾酮類抗生素藥物殘留總檢出率的43.2%～65.9%。 諾氟沙星因其價格低、 抗菌效果強， 在養殖行業被廣泛用作治療用藥。 本文通過長期跟蹤監測， 分析得出諾氟沙星是影響蜂蜜質量的最主要風險因子。 其次是環丙沙星和恩諾沙星， 兩者合計檢出率占到總檢出率的23.1%～54.6%， 也是需要引起重視的關鍵風險因子。

諾氟沙星、 環丙沙星和恩諾沙星是影響蜂蜜質量安全的高風險因素， 這點在其他相關獸藥殘留監測研究報道中也得到證實。 夏湘勤等[8]對我國畜牧養殖場畜禽糞便中氟喹諾酮類抗生素藥物殘留開展監測研究， 結果顯示， 諾氟沙星、 環丙沙星、 恩諾沙星3 種藥物在畜禽糞便中的殘留檢出濃度極高，排在所有監測的氟喹諾酮類抗生素藥物的前3 名，最高檢出值分別達到225、 46、 420 mg/kg。 這也從側面反映了這3 種抗生素藥物在農業養殖生產中的使用量和使用規模， 證實其是影響動物源農產品質量安全的重要風險因子， 需要引起足夠的重視。

在原農業部頒布4 種氟喹諾酮類抗生素禁用令的幾年后仍然能從蜂蜜中檢出諾氟沙星、 氧氟沙星和培氟沙星殘留， 說明目前對獸藥生產、 銷售和使用的監管工作仍要加強。 后續對影響蜂蜜質量安全的高風險獸藥進行長期的跟蹤監測， 可以幫助了解相關獸藥禁限停用的實際情況， 抓住監管工作中的關鍵風險因子， 從而有的放矢從源頭上加強相關抗生素獸藥的生產和流通監管， 及時采取針對性地有效措施消除風險隱患， 守住農產品質量安全底線。