血清細胞因子在兒童肺炎支原體肺炎發病機制中的作用

胡劍，蘇凡，包麗麗，吳萍

南京醫科大學附屬蘇州醫院兒科，江蘇蘇州 215002

肺炎支原體（Mycoplasma Pneumoniae, MP）是引起我國兒童社區獲得性肺炎的重要病原。既往研究發現肺炎支原體肺炎（Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia, MPP）中約14%為難治性肺炎支原體肺炎（Refractory Mycoplasma Pneumoniae Pneumonia,RMPP）[1]。MP 致病機制除了病原體直接損傷機體外，免疫損傷起到重要的作用，之前的研究發現MPP 的血清白介素-10（Interleukin-10, IL-10）水平顯著降低[2]?；诖?，本研究回顧性研究2019 年7月—2020 年6 月南京醫科大學附屬蘇州醫院兒科住院的203 例兒童探究7 項細胞因子在RMPP 與非RMPP 住院兒童間的差異，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取在本院兒科住院的203 例MPP 患兒為研究對象，分為非RMPP 組（177 例）和RMPP 組（26 例）。MPP 的診斷標準參見指南[3]，RMPP 定義為MPP 經大環內酯類抗菌藥物正規治療≥5 d，臨床癥狀加重、仍持續發熱、肺部影像學所見加重者[4]。

1.2 納入與排除標準

納入標準：年齡28 d～14 歲；全部病例符合兒童社區獲得性肺炎管理指南（2013 修訂）診斷標準；全部病例均進行胸部X 線或CT 檢查。

排除標準：免疫缺陷病者；嚴重的先天性心臟病者。

1.3 方法

回顧性收集研究對象的臨床資料，包括人口學特征、臨床特征、實驗室檢查以及影像學特征。其中，人口學特征包括年齡和性別，臨床特征包括發熱天數、喘息、氣促、三凹征，實驗室檢查包括白細胞計數（White Blood Cell Count, WBC）、中性粒細胞絕對值（Neutrophil Count, N）、C 反應蛋白（CReactive Protein, CRP）以及7 項細胞因子。

使用酶聯免疫吸附測定法（Enzyme-linked Immunosorbent Assay, ELISA）檢測肺炎支原體抗體，當肺炎支原體抗體IgM（Mycoplasma Pneumoniae IgM,MP-IgM）＞1.1 時，診斷為急性MP 感染。使用流式細胞法（人Th1/Th2/Th17 亞群檢測試劑盒，江西賽基生物技術有限公司，Navios 流式細胞儀，Beckman Coulter Ireland. Inc）檢測細胞因子，包括白介素-2（Interleukin-2，IL-2）、白介素-4（Interleukin-4, IL-4）、白介素-6（Interleukin-6, IL-6）、白介素-10（Interleukin-10, IL-10）、腫瘤壞死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α, TNF-α），干擾素-γ（Interferon-γ, INFγ），白介素-17A（Interleukin-17A, IL-17A）。

1.4 統計方法

使用SPSS 22.0 統計學軟件進行數據分析。將203 例患兒分為RMPP 組和非RMPP 組，通過傾向評分匹配分析方法配對出25 對患兒，校正混雜因素包括性別、年齡、發熱、喘息、白細胞及中性粒細胞計數、影像學等特征（大葉性/支氣管肺炎、胸腔積液、肺不張）、白細胞計數、中性粒細胞絕對值、CRP。連續性變量采用Mann-Whitney U 檢驗，分類變量采用卡方檢驗或Fisher 精確概率法。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患兒臨床特征比較

共203 例MPP 患兒納入本研究，其中RMPP 26例，非RMPP 177 例，兩組患兒的性別、年齡，發熱、喘息、氣促、濕性啰音、三凹征比較，差異無統計學意義（P均＞0.05）。實驗室檢查中RMPP 組的WBC計數及中性粒細胞計數顯著高于非RMPP 組，差異有統計學意義（P均＜0.05）。兩組患兒CRP 比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。RMPP 組患大葉性肺炎率顯著多于非RMPP，差異有統計學意義（P＜0.05）。兩組患兒胸腔積液與肺不張比率比較，差異無統計學意義（P均＞0.05）。見表1。

表1 兩組患兒臨床特征比較

2.2 匹配前兩組患兒細胞因子水平比較

兩組患兒血清IL-2、IL-4、TNF-α 及IL-17A 比較，差異無統計學意義（P均＞0.05）。RMPP組的血清IL-6、IL-10 及INF-γ 顯著高于非RMPP 組，差異有統計學意義（P均＜0.05）。見表2。

表2 匹配前兩組患兒細胞因子水平比較[M(P25,P75)，pg/mL]

2.3 匹配后兩組患兒細胞因子水平比較

203 例患兒通過傾向評分匹配得出25 對匹配后患兒，匹配后RMPP 組血清IL-10 仍顯著高于非RMPP 組，差異有統計學意義（P＜0.05）。匹配后兩組血清IL-6 與INF-γ 比較，差異無統計學意義（P均＞0.05）。見表3。

表3 匹配后兩組患兒細胞因子水平比較[M(P25,P75)，pg/mL]

3 討論

MP 是我國CAP 住院患兒的首位病原體，而住院患兒的MPP 中，約14%為RMPP，且有逐年升高的趨勢[5]。

眾多研究發現，細胞因子在MP 發病機制中扮演重要的作用。本研究發現，RMPP 組的血清IL-6（中位數18.220 pg/mL）顯著高于非RMPP 組（中位數7.200 pg/mL）（P＜0.05），這與Fan 等[6]研究結果一致，其研究發現RMPP 患兒的血清IL-6（7.79 pg/mL）顯著高于非RMPP 患兒（1.53 pg/mL）（P＜0.05）。Wang等[7]研究發現RMPP 組患兒的血清INF-γ（中位數為376.9 pg/mL）顯著高于非RMPP 組患兒（P=0.016）。本研究結果顯示，RMPP 組的血清INFγ（中位數6.450 pg/mL）顯著高于非RMPP 組（中位數3.130 pg/mL）。一項在學齡期患兒中進行的研究發現，IL-10（中位數6.40 pg/mL）和INF-γ（中位數17.50 pg/mL）在RMPP 組均顯著升高（P均＜0.001），且可作為RMPP 的預測因子[8]。本研究也發現，RMPP組的血清IL-10（中位數7.335 pg/mL）和INF-γ均顯著高于非RMPP組（P均＜0.05）。

既往MPP 致病機制的研究發現，血清細胞因子在不同的胸部影像學改變以及是否喘息的組間存在著顯著差異，Hsieh 等[9]的前瞻性研究發現，肺實變組或胸腔積液組的血清IL-6水平顯著高于支氣管肺炎組，Medjo 等[10]研究發現喘息組患兒的血清IL-10 水平顯著高于非喘息組。本研究發現RMPP 組的大葉性肺炎顯著多于非RMPP 組（P=0.015），RMPP 組的喘息比例（0）小于非RMPP 組（11.9%）（P=0.082），并且WBC 計數及中性粒細胞計數顯著高于非RMPP 組（P均＜0.05）。因此，為消除這些混雜因子對研究結果的影響，本研究將納入的混雜因子（協變量）對RMPP 組和非RMPP 組按照1∶1 進行傾向評分匹配，匹配后的結果發現RMPP 組IL-10 顯著仍高于非RMPP 組（P=0.007）?？紤]本研究匹配了病情嚴重程度以及并發癥等混雜因素，可能更好地闡釋了細胞因子尤其是IL-10在MP致病中的作用。

IL-10 是一種由Th2 細胞分泌的抗炎細胞因子，作用于巨噬細胞來抑制細胞因子的產生，進而間接抑制Th1 細胞產生細胞因子[11]。在一項關于肺炎克雷伯桿菌肺炎的研究中，發現IL-10 分泌與炎癥吸收和恢復相關[12]。這也可能解釋了RMPP 的血清IL-10 顯著高于非RMPP 的原因，提示IL-10 在RMPP 恢復機制中所起的作用。

綜上所述，本研究發現RMPP 組的血清IL-6、IL-10 和INF-γ 均顯著升高，在匹配了相關混雜因子后，RMPP 組的血清IL-10 仍顯著高于非RMPP組。因此，本研究提示血清IL-10 在RMPP 的發病機制中具有重要作用。