親和柱
- 超高效液相色譜-串聯質譜法測定全麥粉中的赭曲霉毒素A
比較不同的免疫親和柱，鑒于赭曲霉毒素A 本身的特性優化不用的洗脫溶劑，結合高靈敏度的超高液相色譜-串聯質譜法（Ultra High Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry，UPLC-MS/MS），建立快捷高效準確的分析方法，為實際生活中測定全麥粉中赭曲霉毒素A 提供參考。1 材料與方法1.1 實驗材料全麥粉樣品購自國家糧食和物資儲備局科學研究院，分別為全麥粉A、全麥粉B、全麥粉C，全麥粉陰性樣品、質控樣
食品安全導刊 2023年28期2023-11-11
- 小麥粉中嘔吐毒素檢測能力驗證及關鍵點分析
特曼公司；免疫親和柱：Romer 公司。1.2 標準品與試劑實驗嘔吐毒素標準品（CAS：51481-10-8）：100.0 μg/mL，Romer。聚乙二醇：天津光復研究所；甲醇：色譜純，德國默克公司；磷酸緩沖鹽溶液：由氯化鈉、磷酸二氫鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、超純水按一定比例配置，用鹽酸將pH值調至7.0，涉及藥品試劑均來自天津科密歐公司。1.3 能力驗證及質控樣品能力驗證考核樣品：由鋁塑袋真空包裝含未知濃度嘔吐毒素的小麥粉樣品2 份，計劃編號ACASPT
現代食品 2023年10期2023-08-08
- 植物油中黃曲霉毒素B1均勻性和穩定性分析
，稀釋液過免疫親和柱，收集洗脫液經氮吹流動相定容，上機測定。均勻性試驗：分別測定10組A、B、C（A、B、C為三個不同濃度的樣品）的平行樣中的AFB1。穩定性試驗：在均勻性試驗后，分3次間隔5～7 d后測定A、B、C各10個樣中的AFB1含量。1.1 材料與試劑乙腈、水、吐溫20、甲醇。1.2 儀器與設備高效液相色譜儀，日本島津，型號LC-20AD，配有熒光檢測器、分析天平、光化學衍生器、全自動固相萃取儀[5]、氮吹儀。1.3 前處理方法稱取5 g試樣于5
食品工業 2023年3期2023-03-29
- 免疫親和柱凈化-高效液相色譜技術檢測食品中嘔吐毒素的方法優化
；嘔吐毒素免疫親和柱：3 mL/支，美國Romer labs 公司；934-AH玻璃纖維濾紙，英國Whatman 公司。1.1.2 試劑甲醇、乙腈，色譜純，默克；聚乙二醇，化學純，國藥；氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鉀，分析純，國藥；超純水，由Milli-Q 超純水機制備；嘔吐毒素標準物質溶液（197.2 mg·L-1）；溶劑（甲醇），色譜級，安譜。1.2 儀器與設備1260 高效液相色譜儀（配置DAD 檢測器），美國Agilent 公司；Milli
食品安全導刊 2023年6期2023-03-19
- 快速凈化柱在植物油黃曲霉毒素B1測定中的應用
提取方法為免疫親和柱凈化提取法。隨著復合型快速凈化柱的問世，凈化柱法也逐漸得到重視和應用。本文采用免疫親和柱-同位素稀釋液相色譜串聯質譜法以及快速凈化柱-同位素稀釋液相色譜串聯質譜法對植物中黃曲霉毒素B1進行了檢出限、加標回收率等實驗比對，分析了兩種方法特點和適用條件。1 材料與方法1.1 主要標準物質及試劑黃曲霉毒素B1內標，0.511 μg/mL,ANPLE公司)；黃曲霉毒素B1，100.2 μg/mL,阿爾塔公司；乙腈，色譜純, Merck公司；甲醇
糧食與食品工業 2022年2期2022-04-21
- 優化的免疫親和柱凈化-高效液相色譜法檢測 食品中的玉米赤霉烯酮
膠中制備的免疫親和柱具有易于制備和儲存、無需激活等優點[5]。已有研究表明[6]，上樣、淋洗和洗脫條件都會影響免疫親和柱的柱回收率，雖然國家標準規定了免疫親和柱的通用凈化方法[4]，但在具體應用中，為了實現痕量真菌毒素的準確檢測，對商品化的免疫親和柱的使用仍有進一步優化的必要。本文對玉米粉、玉米油、醋和黃酒中的玉米赤霉烯酮的提取和凈化方法進行優化，通過色譜柱分離以及熒光檢測器檢測，建立了一種靈敏、準確的食品中玉米赤霉烯酮的檢測方法。1 材料與方法1.1 材
食品安全導刊 2022年33期2022-03-23
- 不同前處理方法對糧油中黃曲霉毒素B1檢測效果對比
化。目前，免疫親和柱凈化處理其具有基質干擾少、特異性強、靈敏度高等優點已得到廣泛的應用[5-8]，并且大部分實驗室對樣品中黃曲霉毒素檢測前處理時常采用手動凈化處理。隨著科技的進步，為了簡化前處理過程，提高檢測的自動化水平和檢測效率，一些學者已研制全自動親和純化儀、免疫磁珠-全自動凈化儀等前處理儀器應用于食品中真菌毒素的檢測[9-11]。針對國內外文獻還沒有系統地對比研究這3種前處理方法測定糧油中黃曲霉毒素的凈化效果，本研究通過優化色譜條件后，建立柱后光化學
中國糧油學報 2022年1期2022-02-20
- 糧食中嘔吐毒素的檢測能力驗證結果分析
；嘔吐毒素免疫親和柱（ROMER DON StarTM)；磷酸鹽緩沖溶液（以下簡稱PBS）：稱取8.00 g氯化鈉、1.20 g磷酸氫二鈉、0.20 g磷酸二氫鉀、0.20 g氯化鉀，用900 mL水溶解，調pH=7.0，用水定容到1 000 mL；標準溶液標準品：嘔吐毒素（1ST7213-100A-S070305，First Standand）。1.2 儀器與設備液相色譜儀配二極管陣列檢查器（Agilent 1200，美國安捷倫）；C18色譜柱（4.6
現代食品 2021年24期2022-01-21
- 高效液相色譜法測定嬰幼兒乳粉中乳鐵蛋白含量
性好，肝素免疫親和柱處理后目標峰明確，干擾峰少，且具有前處理簡單、用時短等優點。嬰幼兒配方乳粉成分復雜，有脂肪、碳水化合物、蛋白質含量高，其中乳鐵蛋白含量低，各種雜蛋白干擾大，且單一儀器往往難以滿足檢測需求，多儀器聯用是乳鐵蛋白檢測方法建立的研究方向。建立嬰幼兒配方乳粉中乳鐵蛋白含量測定相應的檢測方法，并對不同主流品牌嬰幼兒配方乳粉進行篩查，為嬰幼兒配方乳粉中乳鐵蛋白含量分析提供基礎參考數據，為國家出臺相關檢測方法及添加限量要求提供技術支持。1 材料與方法
現代食品 2021年19期2021-11-24
- 免疫親和凈化－超高效液相色譜－串聯質譜法測定食品中玉米赤霉烯酮類真菌毒素
簡便，利用免疫親和柱進行凈化及液標法進行定量，能夠同時測定6種玉米赤霉烯酮類真菌毒素。除了谷物以外，本檢測方法還能應用于肉、蛋、乳等食品的檢測。一、材料和儀器1.材料和試劑。（1）樣品：在市場購買大米、麥片、牛肉、豬肉脯、雞蛋、牛奶等當作樣品，大米和麥片研磨成粉，牛肉和豬肉脯搗碎，雞蛋和牛奶混勻。（2）試劑：乙腈，色譜純;乙酸鈉，分析純;玉米赤霉酮標準品、α-玉米赤霉烯醇標準品、β-玉米赤霉醇標準品、α-玉米赤霉醇標準品、β-玉米赤霉烯醇標準品、玉米赤霉烯
中國食品 2021年21期2021-11-07
- 免疫親和柱凈化-HPLC光化學柱后衍生法測定玉米中黃曲霉毒素B1的含量
。本文采用免疫親和柱凈化-HPLC光化學柱后衍生法建立一種快速、準確檢測玉米中AFB1的方法。1 材料與方法1.1 儀器與試劑高效液相色譜儀-熒光檢測器，島津LC-20A、RF-20A；光化學衍生器，北京華安麥科生物科技有限公司；水浴恒溫振蕩器，常州國華電器有限公司；BS1254電子天平，德國賽多利斯股份有限公司；Maxi Mix Ⅱ渦旋振蕩器，賽默飛世爾科技有限公司；超純水機，密理博中國有限公司；0.22 μm針式濾膜，天津津騰實驗室設備有限公司；玻璃纖
現代食品 2021年15期2021-10-14
- 免疫親和柱凈化-液相色譜-串聯質譜法測定水環境中微囊藻毒素
收率較低。免疫親和柱(IAC)是利用抗原抗體特異性可逆結合特性的原理制作而成的SPE 柱，由于抗原抗體的高度選擇性，使得免疫親和柱具有良好的吸附凈化性能和高度的特異性。本實驗利用液相色譜串聯質譜的靈敏性和準確性，結合免疫親和柱的特異性和專一性，建立一套高效、快捷、靈敏度高的微囊藻毒素檢測方法。1 材料與方法1.1 儀器和試劑ACQUITY 超高效液相色譜-質譜儀Quattro Premier XE(美國Waters 公司)；MS2 漩渦混合器(德國IKA公
浙江海洋大學學報(自然科學版) 2021年2期2021-08-05
- 高效液相色譜-柱后光化學衍生法測定變性淀粉中黃曲霉毒素含量的研究
，提取液經免疫親和柱或多功能凈化柱凈化處理，用HPLC光化學衍生-熒光檢測器檢測樣品中黃曲霉毒素G2、G1、B2和B1含量，快速可靠。1 材料與方法1.1 材料與試劑樣品：市售羥丙基二淀粉磷酸酯。美國Beacon黃曲霉毒素總量免疫親和柱(上海安譜實驗科技股份有限公司)；MycoSep 226多功能凈化柱(Romer國際貿易(北京)有限公司)；黃曲霉標準品(G1：1.00 μg/mL；G2：0.300 μg/mL；B1：1.00 μg/mL；B2：0.300
工業微生物 2021年3期2021-06-30
- 雞飼料及原料中玉米赤霉烯酮污染的檢測及分布研究
次研究使用免疫親和柱、色譜純、甲醇、乙腈等材料，親和柱選用的是helix玉米赤霉烯酮免疫親和柱，并選用10 mg的玉米赤霉烯酮進行實驗。在分析提出方面采用廣州市廣聯津化工有限公司的去離子水、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀等物品。試劑制作的步驟：明確試劑提取標準，試劑提取標準為乙腈與水的比例為9:1。制作磷酸鹽緩沖液，制作標準為pH 7.4(50 mm PBS)，需要使用磷酸氫二鉀7.27 g、磷酸二氫鉀1.24 g、氯化鈉8.76 g進行溶解，離子水的含量為1L。
畜禽業 2021年6期2021-06-23
- 花生油中黃曲霉毒素B1高效液相色譜 檢測方法的探索與研究
霉毒素總量免疫親和柱。甲醇-水（70+30）；磷酸鹽緩沖溶液（PBS）：8.00 g氯化鈉、1.20 g磷酸氫二鈉、0.20 g磷酸二氫鉀、0.20 g氯化鉀，用900 mL水溶解，用鹽酸調節pH至7.4，用水定容至1 000 mL；1% Triton X-100（或吐溫-20）的PBS： 取10 mL Triton X-100， 用PBS定 容 至1 000 mL。所用試劑均為分析純。黃曲霉毒素B1（AFTB1）標準溶液，標準值2.0 μg·mL-1，由
現代食品 2021年7期2021-06-16
- 糧食中黃曲霉毒素B1檢測的免疫磁珠法樣本前處理應用研究
方法主要為免疫親和柱凈化法、固相萃取柱凈化法、液液萃取、Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe法(QuEChERS)[13-18]。這些提取方式不僅操作繁瑣，效率不高，而且需要大量使用包括正己烷、乙酸乙酯、石油醚等在內的各種有機溶劑，此類有機溶劑易對環境產生二次污染，也會對操作人員的健康產生傷害。免疫磁珠為磁性微球和免疫配基結合而成的納米級材料，表面通常帶有氨基、羧基、羥基或巰基等化學官能團，該官能團與不同的免疫配基如
糧食與飼料工業 2021年2期2021-04-27
- 小麥粉中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇測定方法比較與分析
萃取柱法和免疫親和柱法對小麥粉樣品進行前處理，采用高效液相色譜法測定小麥粉中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的含量，并對這3種前處理方法進行了比較分析。1 實 驗1.1 材料與試劑甲醇(色譜純)，默克公司；磷酸氫二鈉、磷酸二氫鉀、氯化鈉、氯化鉀、鹽酸均為分析純，國藥集團化學試劑有限公司；聚乙二醇(相對分子質量8000)，Sigma-Aldrich；乙腈中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇標準溶液(100 μg/mL)，北京壇墨質檢科技有限公司；Poly-Sery HLB Pro固相萃取
廣州化工 2020年23期2020-12-16
- HPLC 檢測植物油中黃曲霉毒素B1 含量的不確定度評價
C 技術（免疫親和柱凈化法）、SPE 技術（固相萃取凈化法））、液相色譜-質譜法（IAC 技術，SPE 技術），檢測方法品種多，適用范圍不同，使得黃曲霉毒素檢測選擇繁瑣，效率低下，同時一些檢測方法的重復性差，引入的不確定度分量多，導致結果在置信區間的范圍寬。針對現有技術缺點，本文做了采用ICA 技術的高效液相色譜法對植物油中的黃曲霉毒素B1 進行測定，并進行不確定度評價，分析各不確定度分量對測定結果的影響，從而在試驗過程中控制各分量的輸入，使測試結果更加可
廣州化學 2020年5期2020-11-02
- 原子轉移自由基聚合法合成分子印跡聚合物及其吸附性能的研究
層色譜法、免疫親和柱-高效液相色譜法等[4 - 6]。樣品前處理技術對于分析檢測至關重要，而且在復雜樣品中痕量赭曲霉毒素A的分析中要求更為嚴格[7]。近年來，分子印跡聚合物(Molecularly Imprinted Polymers，MIPs)以其精確、特異性的吸附能力、高重復性、低檢出限、又不易受復雜樣品基體干擾的特點，正被逐漸應用于痕量物質的前處理中，彌補了傳統固相萃取和免疫分析的不足[8 - 10]。圖1 赭曲霉毒素A(OTA)和氯霉素的結構式Fi
分析科學學報 2020年4期2020-09-17
- 全自動免疫親和固相萃取超高效液相色譜法測定糧油中黃曲霉毒素
成本較高。免疫親和柱具有有機溶劑消耗少、基質干擾少、特異性強、靈敏度高和適用于各種復雜基質的樣品等特點[12,13]，因此免疫親和層析凈化高效液相色譜法是目前國際上普遍采用的黃曲霉毒素精確定量和確認的方法[14-16]。大部分實驗室對樣品中黃曲霉毒素檢測前處理時采用手動凈化。而手動凈化由于過程繁瑣、耗時長等因素制約，導致每天處理樣本量少。當樣品量較大時，存在時效性差、人為因素影響大等問題。S. Jinap等[17,18]建立了免疫親和柱在線凈化高效液相色譜
中國糧油學報 2020年7期2020-09-03
- 神經性貝類毒素免疫親和柱的制備與應用
-13]。免疫親和柱(immunoaffinity column，IAC)是一種基于抗原抗體反應的新型層析柱，可選擇性吸附樣品提取液中的目標化合物，在特異性富集毒素的同時凈化樣品基質，凈化效果好。作為新型高效的前處理凈化技術，免疫親和柱凈化技術正在不斷改進發展，在生物毒素檢測領域應用越來越廣泛[14-16]。試驗擬以PbTX-2為研究對象，研制NSP免疫親和柱的裝柱，并建立NSP的免疫親和柱凈化—液相色譜—串聯質譜分析方法，以期經免疫親和柱凈化的樣品提取液
食品與機械 2020年2期2020-04-13
- 免疫親和柱在果蔬有機磷農藥殘留測定前處理中的應用研究
種多功能的免疫親和柱（MycoSep 226 AflaZon+）可直接應用于水果、蔬菜有機磷農藥殘留檢測中凈化有機磷的乙腈提取液。免疫親和柱是一種特殊的SPE 柱，以極性、非極性及離子交換等幾類基團組成填充劑，可選擇性吸附樣液中的脂類、蛋白類等雜質，現主要被用于黃曲霉毒素含量測定的前處理凈化過程中[8-9]。應用該柱對果蔬中有機磷農藥殘留提取液進行凈化處理，可有效去除脂類、蛋白類等雜質，有機磷農藥則可順利通過。該方法凈化速度快，省時省力，有望在今后農藥殘留
浙江林業科技 2019年4期2019-12-13
- 免疫親和柱凈化結合高效液相色譜法測定小麥粉中的脫氧雪腐鐮刀菌烯醇
譜測定法、免疫親和柱結合高效液相色譜法、同位素稀釋液相色譜-串聯質譜法是檢測脫氧雪腐鐮刀菌烯醇常用的方法[2]。本文使用免疫親和柱結合高效液相色譜法檢測小麥粉中的嘔吐毒素，能很好地滿足實驗分析標準。1 儀器及試劑脫氧雪腐鐮刀菌烯醇免疫親和柱、紫外檢測器或二極管陣列檢測器（Agilent高效液相色譜儀）、超聲波、渦旋振蕩器、離心機、真空壓力泵與玻璃注射器。2 標準儲備溶液及標準工作溶液標準儲備溶液（25 μg/mL）：移取1 mL標準儲備溶液于10 mL容量
食品安全導刊 2019年18期2019-09-23
- 超速離心法與QIAGEN膜親和柱法提取前列腺癌細胞培養上清外泌體的方法學比較*
、磁珠法以及膜親和柱法等[7-8]，超速離心法是外泌體提取的金標準，但超速離心法耗時耗力，并且提取率低；沉淀法雖然簡單，但會同時沉淀許多雜蛋白，并且商品化試劑成本高；磁珠法適用于提取血液等起始量要求較低的生物樣本來源的外泌體，用途有限；膜親和柱法適用于提取包括細胞上清、血液及尿液等多種生物體液來源的外泌體，且操作相對簡便?；诖?，本研究通過常規的外泌體鑒定方法，對比了超速離心法和QIAGEN膜親和柱法提取外泌體的特點，為外泌體的基礎和臨床研究提供方法學參考
現代檢驗醫學雜志 2019年3期2019-06-21
- 肝素親和柱在乳鐵蛋白檢測中的應用優化
1 mL）肝素親和柱作為目標化合物純化和濃縮的前處理步驟[19-20]，由于是首次將該親和柱應用到乳鐵蛋白的檢測中，故對應用條件進行了摸索和優化，包括：肝素親和柱的承載量、淋洗液和洗脫液的濃度、pH值等參數的優化等，建立一種適合乳鐵蛋白檢測的前處理凈化方法。1 材料與方法1.1 試劑與儀器乳鐵蛋白標準物質（批號：SP113101）：Tatua公司提供；乙腈為（色譜純）：美國默克公司；無水乙醇、氯化鈉、磷酸、磷酸氫二鈉、三氟乙酸（均為分析級）：國藥集團化學試
食品研究與開發 2019年6期2019-03-19
- 膠體金免疫層析法快速定量檢測飼料中黃曲霉毒素B1殘留
；AFB1免疫親和柱（Romer公司）；玻璃纖維濾紙（Whatman公司）；ROSA黃曲霉毒素B1膠體金快速定量檢測條（Charm公司）。Waters 2695高效液相色譜儀（Waters公司）；孵育器、讀數儀（Charm公司）。1.2 快速定量膠體金免疫層析法準確稱取樣品5.0g試樣于50ml具塞錐形瓶中，加入20ml試樣提取液，密閉，振蕩10min，8000 r/min離心5min，取離心后上清液100μl于另一離心管中，加 入1.0 ml稀釋緩沖液，
獸醫導刊 2019年4期2019-02-12
- 鄰苯二甲酸酯類污染物雌激素結合活性篩查
2競爭結合受體親和柱（受體蛋白通過6×His標簽與親和柱（Ni-NTA-Sefinose Column）上的Ni通過配位結合得到受體親和柱）上的雌激素受體（Estrogen receptor，ER），剩余未結合的游離態E2通過離心分離后，與熒光標記E2抗體結合。剩余游離熒光標記E2抗體與傳感界面上固定的E2-BSA結合，在倏逝場激發下產生熒光，熒光強度與外源化合物的雌激素結合活性呈負相關，由此可以定性考察化合物的雌激素結合活性大小。1 材料與方法1.1 材
生物技術通報 2019年1期2019-01-23
- 高效液相色譜測定乳制品、谷物粉及飼料中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及其乙?；苌?/a>
ADON）免疫親和柱（產品編號：HCM30508，柱容量≥1 000 ng） 北京華安麥科生物技術有限公司；Agilent 1260高效液相色譜儀（配備紫外檢測器）美國Agilent公司；AB265-S分析天平 瑞士Mettler-Doledo公司；3k30高速離心機 德國Sigma公司；GM 200高速粉碎機（轉速10 000 r/min） 德國Retsch公司；篩網（孔徑1～2 mm） 安平縣鴻凱金屬絲網制品廠；TurboVapLV氮吹儀 瑞典Biot
乳業科學與技術 2019年1期2019-01-23
- 免疫親和柱在真菌毒素檢測中的應用
建立了復合免疫親和柱－在線光化學衍生－高效液相色譜同時測定谷物及其制品中9種真菌毒素的檢測方法，該方法重現性好、靈敏度高、結果準確。真菌毒素免疫親和柱主要利用真菌毒素抗體作為配基來吸附真菌毒素，具有較好的靶標識別性和特異性，可以去除樣品基質干擾，降低真菌毒素凈化的損失，提高結果的準確性，適用于混合糧食和油料基質中低濃度真菌毒素的檢測[2]。本文對免疫親和柱在真菌毒素檢測中的應用進行了相關的總結與分析，為免疫親和柱的應用與發展提供一定的理論基礎。2 真菌毒素
食品安全導刊 2019年21期2019-01-05
- 中藥飲片中真菌毒素前處理方法進展
凈化方式為免疫親和柱凈化法，但并未對其余中藥材及真菌毒素進行限量規定。真菌毒素種類繁雜，且在不同種類和不同基質中藥之間都存在著很大的差異，使檢測難度增大。其前處理方法的好壞在很大程度上決定了檢測結果的準確性，因此為了提高檢測結果的準確性，研究不同的基質的中藥和不同的毒素的前處理方法尤為重要。1 分類綜述1.1 提取方法表1 各國對真菌毒素的限量標準一種好的提取方法不僅要求提取充分，而且要求提取的物質中含有盡量少的非目標組分，這將有利于之后毒素的分離和純化。
世界中醫藥 2018年12期2018-12-25
- 復合免疫親和柱-高效液相色譜法同時測定谷物及其制品中9種真菌毒素
-19]或免疫親和柱串聯[20]的方式對提取的樣品溶液進行凈化處理,但是前兩種方法受樣品基質效應影響較大,凈化不夠徹底,容易產生干擾;當需要測定的真菌毒素種類較多時,免疫親和柱串聯的方式也難以適用。近些年,復合免疫親和柱成了研究的熱點[21-23],然而受到抗體種類的影響,商品化復合免疫親和柱的使用仍有一定的局限性。本實驗有針對性地從商品化免疫親和柱中獲取所需填料,混勻并重新裝填后制成真菌毒素復合免疫親和柱,在此基礎上,建立了在線光化學衍生-高效液相色譜同
色譜 2018年12期2018-12-06
- 小麥中脫氧雪腐鐮刀菌烯醇的液相色譜檢測與膠體金試紙法分析比較
信公司）、免疫親和柱（美國Vicam公司）。色譜純甲醇（中國國藥）、色譜純乙腈（中國國藥）、聚乙二醇PEG8000（美國Vicam公司）、超純水（美國Millipore公司）。嘔吐毒素標準儲備溶液（純度大于99.5%）：200 μg/mL。嘔吐毒素標準工作溶液：分別取0.1mL嘔吐毒素標準溶液，氮氣儀吹干后，用流動相（甲醇+乙腈+水=10+10+80）分別配制濃度為100、300、500、1 000、2 000、4 000 μg/L以及6 000 μg/L
現代食品 2018年19期2018-12-05
- 免疫親和柱凈化-高效液相色譜法檢測兩種飲料中雙酚A含量
究首次采用免疫親和柱凈化-高效液相色譜法聯用技術檢測豆奶和橙汁飲料中雙酚A含量,對檢測飲料類復雜基質食品中雙酚A含量具有參考作用。1 材料與方法1.1 材料與儀器雙酚A免疫親和柱 柱容量500 ng/支 美國VICAM公司;1.5 μm玻璃纖維濾紙 美國3M公司;0.22 μm有機相濾膜 上海安譜公司;乙腈 色譜純，德國Merck公司;甲醇 色譜純，德國Merck公司;氯化鈉 分析純，廣州化學試劑廠;磷酸氫二鈉 分析純，廣州化學試劑廠;磷酸二氫鉀 分析純，
食品工業科技 2018年20期2018-10-24
- 高效液相色譜-柱后衍生法檢測大米中黃曲霉毒素B1方法分析
方法大多用免疫親和柱來凈化、分離，其凈化效果優異。本文主要采用高效液相色譜-柱后衍生法檢測大米樣品中的黃曲霉毒素B1，用乙腈-水溶液的混合溶液提取，提取液經免疫親和柱凈化和富集，凈化液濃縮、定容和過濾后經液相色譜分離，柱后（碘試劑衍生），經熒光檢測器檢測，外標法定量。1 試劑和材料甲醇（CH3OH），色譜純；乙腈（CH3CN），色譜純；氯化鈉（NaCI）；磷酸氫二鈉（Na2HPO4）；磷酸二氫鉀（KH2PO4）；氯化鉀（KCI）；鹽酸（HCI）；Trito
現代食品 2018年15期2018-09-21
- 我國主導制修訂的《玉米規格》等兩項國際標準正式發布
量的測定一免疫親和柱凈化高效液相色譜法》（IS0 15141：2018）兩項國際標準，經國際標準化組織（ISO）批準，于2018年7月正式出版。玉米是世界三大主糧之一，2017/18年全球貿易量達到1.45億噸?！队衩滓幐瘛罚↖S0 19942）標準是糧食領域重要的產品標準，規定了國際貿易中玉米的最低質量要求。該標準在充分考慮進口國和出口國利益的基礎上，統一了玉米質量指標的術語定義和檢測方法，并參照我國玉米標準設定了水分和雜質含量要求。赭曲霉毒素A （OT
中國食品 2018年16期2018-09-10
- 免疫親和柱—超高效液相色譜法測定維生素飲料中維生素B12
色譜法結合免疫親和柱對樣品進行分析，免疫親和柱對維生素B12具有較高的選擇性，可以對樣品維生素B12進行純化和富集，再經超高效液相色譜法檢測樣品從而達到分析準確、快速、成本低、操作簡單的目的。因此，將免疫親和柱—超高效液相色譜法運用到成分復雜的飲料中低含量維生素B12的測定具有重大的意義。1 試驗與材料1.1 儀器與試劑超高效液相色譜儀(美國Waters公司)；超聲波清洗儀，美國Auto science公司；氮吹儀，中國安譜公司；固相萃取儀，美國CNW公司
中國食物與營養 2018年3期2018-04-04
- 免疫親和柱凈化-HPLC法測定植物油中黃曲霉毒素
0203)免疫親和柱凈化-HPLC法測定植物油中黃曲霉毒素賴宣丞，廖長儒，曾德斌(海南省疾病預防控制中心檢驗檢測所理化科,海南 ?？?570203)目的： 建立一種免疫親和柱凈化-高效液相色譜同時測定植物油中黃曲霉毒素B1,B2,G1，G2的方法。方法： 試樣用甲醇水(55+45，體積比)提取，提取液經離心、過濾、稀釋后，用免疫親和柱凈化，采用高效液相色譜-大體積流通池熒光檢測器檢測。結果： 在優化條件下，黃曲霉毒素B1,G1的檢出限分別為0.067μg/
山東化工 2017年14期2017-09-16
- 不同凈化柱處理對小麥粉中4 種鐮刀菌毒素的凈化效果
-PREP免疫親和柱和實驗室制備聚苯乙烯-二乙烯苯樹脂免疫親和柱在檢測小麥粉中4 種鐮刀菌毒素（玉米赤霉烯酮、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素）過程中的前處理效果。選擇MycoSep?226多功能凈化柱、DZT MS-PREP免疫親和柱和實驗室制備聚苯乙烯-二乙烯苯樹脂免疫親和柱，通過不同的提取和前處理方法，以及建立高效液相色譜-串聯質譜檢測法，對小麥粉中的4 種鐮刀菌毒素進行測定。DZT MS-PREP免疫親和柱處理小麥粉樣品所得的回收率為8
食品科學 2017年14期2017-07-20
- 黃曲霉毒素免疫親和柱性能評價方法及應用
黃曲霉毒素免疫親和柱性能評價方法及應用徐文遠1，倪新1，崔淑華2，朱萬燕1（1.臨沂出入境檢驗檢疫局，山東臨沂276034；2.山東出入境檢驗檢疫局食品農產品檢測中心，山東青島266002）探索建立一種簡便可靠的黃曲霉毒素免疫親和柱性能評價方法并利用該方法對國內市場上5個主流品牌產品進行對比評價。依據評價結果進行產品采購使用，經3年多實用經驗證明了方法的可靠性。該性能評價方法不僅能夠從確保檢測質量和降低檢測成本兩方面指導親和柱的采購還能夠協助倒逼生產商不斷
食品研究與開發 2017年14期2017-07-18
- 針對糧油產品略析其真菌毒素的檢測工作
速均質器、免疫親和柱等，其中黃曲霉毒素B1、赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮免疫親和柱都屬于ToxinFast產品。AflaTest顯色劑；玉米赤霉烯酮顯色劑；甲醇；乙腈；苯；冰乙酸；Tween-20溶液；PBS緩沖液；3種真菌毒素檢測質控樣品全部為國家計量標準物質中心產品。黃曲霉毒素B1測定黃曲霉毒素B1提取與凈化。隨機選取50g研磨好的樣品備用，在攪拌容器中加10gNaCl，然后按4：1的比例加入總量為100ml的甲醇/水，進行快速攪拌1min。然后把提取到
食品界 2017年3期2017-04-19
- 不同免疫親和柱對飼料中黃曲霉毒素檢測結果的影響研究
G2的測定免疫親和柱凈化——高效液相色譜法》（GB/T 30955—2014）的發布實施，更促進了免疫親和柱在飼料霉菌毒素檢測的廣泛推廣。國際、國內的生物技術公司也紛紛推出各自的免疫親和層析柱，但不同品牌柱子的特異性、重現性和穩定性也良莠不齊，故筆者選取兩家公司的黃曲霉毒素免疫親和柱進行對比試驗。1 儀器與材料1.1 儀器與設備Waters2695高效液相色譜儀（美國Waters公司）、熒光檢測器（美國Agilent公司）、光化學衍生系統（美國Romer公
飼料工業 2017年14期2017-01-08
- 醬油中黃曲霉毒素B1含量的檢測
該方法采用免疫親和柱凈化提取，利用熒光檢測器（帶柱后光化學衍生系統）檢測，檢測方法簡單快捷、線性好，回收率高。醬油；黃曲霉毒素B1；免疫親和柱；熒光檢測器；光化學衍生試劑和溶液 除非另有規定，所用水為蒸餾水或去離子水；乙腈（色譜純）；乙腈-水溶液（8+2）：取80ml乙腈加20ml水；氯化鈉（分析純）吐溫-20（分析純）；黃曲霉毒素B1標準溶液（3ug/ml）,保存于4℃備用；黃曲霉毒素B1系列標準工作液：準確移取適量的黃曲霉毒素B1標準溶液，用甲醇稀釋成
食品安全導刊 2016年29期2016-11-18
- 以聚苯乙烯-二乙烯苯為載體的多目標免疫親和柱的制備及應用
體的多目標免疫親和柱的制備及應用張家寧，丁軻*，韓濤，陳湘寧（北京農學院食品科學與工程學院，食品質量與安全北京實驗室，農產品有害微生物及農殘安全檢測與控制北京市重點實驗室，北京 102206）選取3 種不同聚苯乙烯-二乙烯苯基材，通過硝基化、氨基化、活化、偶聯抗體等步驟制備免疫親和柱，用于4 種鐮刀菌毒素（玉米赤霉烯酮、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇、T-2毒素、HT-2毒素）的同時純化，并將3 種基材制備的免疫親和柱進行比較。以Cleanert PS型聚苯乙烯-二乙
食品科學 2016年20期2016-11-07
- 談食品中黃曲霉毒素B1的檢測
液的處理、免疫親和柱等方面做了歸納分析?！娟P鍵詞】黃曲霉毒素B1的測定 注意事項 免疫親和層析法高效液相色譜法黃曲霉毒素B1(Aflatoxin B1簡寫為AFB1)是二氫呋喃氧雜萘鄰酮的衍生物，含有一個雙呋喃環和一個氧雜萘鄰酮(香豆素)。黃曲霉毒素B1是已知的化學物質中致癌性最強的一種。黃曲霉毒素B1對包括人和若干動物具有強烈的毒性，其毒性作用主要是對肝臟的損害。B1是最危險的致癌物，經常在玉米，花生，棉花種子，一些干果中常能檢測到。它們在紫外線照射下能
中國科技縱橫 2016年1期2016-06-02
- 超濾濃縮-HPLC法測定乳中乳鐵蛋白質量分數及功能性評價
先通過肝素免疫親和柱凈化、磷酸氫二鈉-氯化鈉溶液洗脫，然后采用超濾濃縮后直接測定。采用紫外檢測器檢測。本方法檢出限為0.01 mg/100 g。該法具有樣品處理簡單方便，靈敏度高，重現性好，分析時間短等優點。該方法測定的為具有活性功能的乳鐵蛋白含量，解決了乳鐵蛋白質量分數較低的生乳及各類液態乳只采用肝素親和柱凈化后測定靈敏度不能滿足測定要求的問題，對評價乳的營養價值提供準確數據。超濾濃縮；乳；乳鐵蛋白；高效液相色譜0 引言乳鐵蛋白（Lf）是乳中特有的功能性
中國乳品工業 2016年11期2016-02-20
- 免疫親和柱凈化-液相色譜-串聯質譜法測定海洋生物中河豚毒素
回收率低。免疫親和柱(IAC)是一種基于抗原抗體反應的新型層析柱，利用生物大分子具有對一類生物大分子特異識別和可逆結合的特性制作而成，具有獨特的選擇專一性和良好的吸附凈化性能。目前，尚未見以免疫親和柱作為前處理凈化手段檢測河豚毒素的相關報道，本實驗基于液相色譜串聯質譜的高靈敏性和精確性，利用免疫親和柱的獨特選擇識別性，建立一種快速、簡便、高效測定海洋生物中河豚毒素的分析方法。2 實驗部分2.1 儀器與試劑ACQUITY 超高效液相色譜-質譜儀Quattro
分析化學 2015年2期2015-06-21
- 基于蛋白A-瓊脂糖凝膠黃曲霉毒素B1免疫親和柱的制備
霉毒素B1免疫親和柱的制備龔 燕1，楊婷婷1，莫曉嵩2，張海濤1，黃 偉2，陸廷瑾1，張東升1,*，汪海峰3（1.江蘇省蘇微微生物研究有限公司，江蘇 無錫 214063；2.江蘇省糧食局糧油質量監測所，江蘇 南京 210011；3.南京財經大學食品科學與工程學院，江蘇 南京 210011）將初步純化的抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體，定向偶聯于蛋白A-瓊脂糖凝膠，制備成免疫親和層析柱。結果顯示，辛酸-飽和硫酸銨純化后的單抗質量濃度為17.5 mg/mL，純度為4
食品科學 2015年10期2015-01-03
- 黃曲霉毒素免疫親和柱重復利用的探討
魚 劉英慧免疫親和柱是20世紀90年代在分析領域得到應用的一種新技術，它是將一定量的單克隆抗體偶聯在合適的擔體上，制成相應的免疫親和柱。該柱具有高選擇性吸附和抗干擾的特性，凈化效果好，檢測靈敏度高，是目前國際上較為常用的檢測真菌毒素樣品前處理方法之一[1]?！吨袊幍洹?010年版一部[2]、《歐洲藥典》7.0[3]、GB/T 18979-2003[4]中均采用該方法進行黃曲霉毒素的測定。隨著《中國藥典》中收載需檢測黃曲霉毒素的中藥材和制劑的品種的增加，以
中國現代藥物應用 2014年1期2014-03-27
- 葡萄酒中赭曲霉毒素A檢測方法優化
樣品時再用免疫親和柱凈化后用高效液相色譜檢測進行確證，方 法具有快捷、靈敏、準確等特點，回收率、精密度都能達到檢測要求。赭曲霉毒素A；葡萄酒；高效液相色譜法；酶聯免疫吸附測定法；方法優化赭曲霉毒素是曲霉菌屬和青霉菌屬的某些菌種產生的二級有毒代謝產物，包含7種結構類似的化合物，其中赭曲霉毒素A(ochratoxi n A，OTA)在自然界中分布最廣泛，毒性最強，對人類和動植物影響最大。OTA是一種穩定的無色結晶化合物，具有耐熱性，易溶于稀 的碳酸氫鈉溶液和極
食品科學 2013年24期2013-10-27
- 免疫親和柱的制備及在真菌毒素檢測中應用的研究進展
理[5]。免疫親和柱凈化處理方法可選擇性地將真菌毒素從提取液中分離出來，提高了熒光分析的靈敏性，降低檢測限[2]。與其他提取方法比較，免疫親和柱的前處理凈化技術還有其他優勢。主要表現：a.提取時避免使用有毒有機溶劑，減少對操作人員的損害；b.方便快捷，簡化了前處理步驟；c.由于凈化處理徹底，減少了基質中的雜質干擾，數據更加可靠。本文對免疫親和柱的原理和制備方式進行了介紹，并且針對幾種常見的真菌毒素，綜述了免疫親和柱凈化技術在這幾種真菌毒素檢測分析上的應用。
食品工業科技 2013年24期2013-08-15
- 免疫親和柱同時凈化 HPLC 法測定植物油中黃曲霉毒素和玉米赤霉烯酮
［4］應用免疫親和柱凈化-光化學柱后衍生-高效液相色譜法結合熒光檢測器測定了植物油中的黃曲霉毒素B1、B2、G1和G2，隋凱等［5］應用免疫親和柱凈化-高效液相色譜法熒光法測定了玉米中的玉米赤霉烯酮，李軍等［6］應用免疫親和柱同時凈化-高效液相色譜法測定了谷物中的黃曲霉毒素、赭曲霉毒素A 和玉米赤霉烯酮。免疫親和柱作為樣品前處理的方法能有效地將干擾物質去除。采用免疫親和柱作為樣品前處理手段，減少了有機溶劑的使用和目標分析物的損失，具有結合容量大、回收率高、
食品工業科技 2013年9期2013-08-07
- 免疫親和柱凈化-高效液相色譜法測定乳粉中游離葉酸含量
驗擬以葉酸免疫親和柱凈化、己烷磺酸鈉為離子對試劑，無需柱后衍生，建立了反相高效液相色譜法測定乳粉中葉酸含量的方法。其中將免疫親和柱凈化用液相色譜分析用于乳粉樣品中葉酸測定是一個創新，目前文獻中還未見有類似的報道。此方法可以滿足乳品企業出廠檢驗與品控及質監部門監督的需要。1 材料與方法1.1 材料與儀器甲醇 色譜純；pH7.4磷酸鹽緩沖液 分別稱取1.24g KH2PO4（分析純）、7.27g K2HPO4（分析純）和8.76g NaCl（分析純）溶解于1L
食品工業科技 2013年6期2013-05-18
- 膠體金免疫層析法快速定量檢測飼料中嘔吐毒素
疫法[12]和親和柱凈化-高效液相色譜法[13]。但這些分析方法需要大型的儀器設備、操作過程復雜、時間長，無法在現場和基礎中小型實驗室使用。近年來膠體金免疫層析技術在真菌毒素快速檢測中得到應用[14-15]，但主要以定性檢測為主[15-17]，存在顯色模糊，人為判斷有誤差，假陽性假陰性比例高等問題。本文建立并驗證了膠體金免疫層析法快速定量檢測飼料中嘔吐毒素的分析方法。1 試驗材料和方法1.1 試劑和材料除注明外,試劑均為分析純,試驗用水均為超純水。iChe
飼料工業 2013年14期2013-02-20
- 蘇丹紅Ⅰ免疫親和柱的研制與鑒定
)蘇丹紅Ⅰ免疫親和柱的研制與鑒定朱立鑫1,2，裘雪梅1，陳興龍1,2，劉仁榮1,*，徐 玲1，徐富勇1,2(1.江西科技師范學院生命科學學院，江西 南昌 330013；2.南昌大學生命科學與食品工程學院，江西 南昌 330047)以羧基化的瓊脂糖凝膠4FF為載體，采用碳化二亞胺法偶聯抗蘇丹紅Ⅰ(SudanⅠ)單克隆抗體，制備蘇丹紅Ⅰ免疫親和柱(IAC)。將SudanⅠ樣品過免疫親和柱，乙腈洗脫后以高效液相色譜法(HPLC)檢測，紫外檢測波長為478nm，流
食品科學 2012年15期2012-10-27
- 花生及其制品中多種霉菌毒素殘留同時測定方法*
分析法(有免疫親和柱-熒光分光光度法和免疫親和術-HPLC法、酶聯免疫吸附法、微柱篩選法和一步式檢測金標試紙法)等檢測手段[6]，國家標準和行業標準中也有相關測定方法規定，但對多種霉菌毒素的同時測定尚沒有相關的標準方法。國外報道Veronica Maria Teresa Lattanzio等[7]利用液相色譜-串聯質譜法對玉米中多種霉菌毒素及其代謝產物同時檢測，但提取凈化手段繁瑣或效果不佳，基質單一，不適合于開展日常的檢測。筆者利用液相色譜-串聯質譜技術對
化學分析計量 2012年6期2012-08-21
- 飼料中伏馬毒素的檢測方法
檢測方法，免疫親和柱-熒光儀檢測法的原理為：將飼料樣品與提取液混合、均勻、過濾，然后將濾液通過鍵合有伏馬毒素特殊抗體的分離柱。用淋洗液通過分離柱，將伏馬毒素從抗體上分離下來。最后，將淋洗液注入熒光計進行測定。檢測范圍為0～10 mg/kg，檢測限為0.25 mg/kg，檢測時間約為15 min，回收率大于80%，變異系數小于15%。免疫親和柱-HPLC法的原理為：經甲醇-水(4∶1)提取，提取液通過FumoniTest免疫親和柱凈化，凈化液經柱前衍生、Sp
化學分析計量 2011年4期2011-04-12
- 免疫親和柱-高效液相色譜法檢測乳制品中氯霉素
0044）免疫親和柱-高效液相色譜法檢測乳制品中氯霉素李應國1，3，趙旭博2，張雷3，李賢良3，郗存顯3，王國民1，3，王雄4，果旗4，李正國1（1.重慶大學生物工程學院，重慶 400044；2.西北農林科技大學，陜西楊凌 712100；3.重慶市進出口食品安全工程技術研究中心，重慶 400020；4.北京中檢維康技術有限公司，北京 100044）建立免疫親和柱富集凈化、高效液相色譜-紫外法快速測定牛奶和奶粉中氯霉素殘留物。樣品用乙酸乙酯提取，經免疫親和色
中國乳品工業 2011年4期2011-01-08
- 免疫親和柱——高效液相色譜法檢測乳制品中玉米赤霉醇及其類似物
0044）免疫親和柱 ——高效液相色譜法檢測乳制品中玉米赤霉醇及其類似物張清杰1，謝潔1，果旗2，江帆2，王彥斐2，王雄2，聶長明1（1.南華大學 化學化工學院，湖南 衡陽 421001；2.北京中檢維康技術有限公司，北京 100044）采用高效液相色譜法檢測牛奶和奶粉中的6種玉米赤霉醇及其類似物，該方法準確、可靠、靈敏度高。樣品用乙腈提取，經免疫親和柱凈化后，用高效液相色譜-紫外檢測器檢測。結果表明，牛奶和奶粉中添加6種玉米赤霉醇及其類似物回收率均為80
中國乳品工業 2011年12期2011-01-04
- 高效液相色譜法測定谷物及其制品中赭曲霉毒素A
毒素A,用免疫親和柱凈化高效液相色譜法進行了驗證。關鍵詞赭曲霉毒素A;高效液相色譜法;谷物及其制品;OchraTest免疫親和柱中圖分類號O657.7+2;TS207.7文獻標識碼A文章編號 1007-5739(2009)14-0322-01赭曲霉毒素A是曲霉屬和青霉屬一些菌種的有毒產物,動物毒性試驗表明,赭曲霉毒素A具有免疫抑制毒性、神經毒性、致畸性及致癌性。1993年,國際癌癥研究中心已將赭曲霉毒素A列為可能的人類致癌物。被赭曲霉毒素A污染的谷物及其制
現代農業科技 2009年14期2009-06-25