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超聲波強化酶法合成L-抗壞血酸癸酸酯及其抗氧化性研究

2013-12-08 06:43晏日安曾永青
食品工業科技 2013年2期
關鍵詞:癸酸抗壞血酸脂肪酶

李 卓,晏日安,*,曾永青

(1.暨南大學食品科學與工程系,廣東廣州 510632;2.廣州市食品工業研究所,廣東廣州 510410)

L-抗壞血酸(VC)是一種常用的水溶性抗氧化劑,然而其親水性限制了其在疏水相體系中的應用,尤其是在脂溶性食品方面的應用,如抗油脂氧化等。當L-抗壞血酸分子的羥基通過酯化接入疏水性的長鏈脂肪酸基團后,其親油性增加,使之成為一種兼具抗氧化性和乳化性兩種性能的優良食品添加劑。L-抗壞血酸脂肪酸酯高效、安全、無毒,易溶于醇、醚及油脂中,對高溫、光照、重金屬、酸堿條件均較抗壞血酸穩定。部分種類的L-抗壞血酸脂肪酸酯已經被用來代替傳統的抗氧化劑[1],如L-抗壞血酸棕櫚酸酯(L-AP)作為油脂類抗氧化劑已經應用在很多油脂及含油食品中。L-抗壞血酸脂肪酸酯的合成有化學合成法和酶催化法。雖然前者的得率較高,但反應條件劇烈,并要用到濃硫酸等腐蝕性催化劑[2]。后者是利用脂肪酶在有機介質中催化酯合成反應,該合成方法反應條件溫和,副反應少[3]。因此,國內外有很多對酶催化合成L-抗壞血酸脂肪酸酯的研究,但目前的研究主要集中在少數幾種L-抗壞血酸脂肪酸酯的合成和性質研究,如L-抗壞血酸棕櫚酸酯等[4-5]。本文研究了合成一種新型L-抗壞血酸脂肪酸酯-L-抗壞血酸癸酸酯(L-AD),并確定在超聲波場中酶法合成的最佳合成條件,所得產物L-抗壞血酸癸酸酯在室溫下為白色有光澤的針狀晶體,具有一定的油溶性,且抗氧化性強。L-抗壞血酸癸酸酯的合成過程中,水溶性的L-抗壞血酸在溶液的溶解度小和底物在反應過程中局部濃度不均勻是制約產率提高的因素。超聲波近年來已經應用在了許多化學合成領域,其產生的空化作用在化學合成方面有重要作用[6]。超聲波的高頻振動不僅可以促進底物L-抗壞血酸的溶解,增大其濃度促進酯化反應平衡右移以提高產率[2,7],并且可以使底物均勻分散在溶劑中,有效解決局部濃度不均勻的問題,提高底物與酶的有效碰撞次數,加速反應的進行。本工作研究了新型抗氧化劑L-抗壞血酸癸酸酯的酶法合成,通過超聲波場的作用來提高反應速度、提高產率,確定了合成的最佳條件,并研究了L-抗壞血酸癸酸酯的分離純化方法,對產物的純度和結構進行了分析鑒定,同時測試了固定化脂肪酶(Novozym?435)可以重復使用的次數。另外,從羥基自由基體系、DHHP自由基體系、還原力測試以及氧化誘導時間測定等方面對L-抗壞血酸癸酸酯抗氧化性進行研究,為新型L-抗壞血酸脂肪酸酯衍生物的合成與應用提供了理論依據。

1 材料與方法

1.1 材料與設備

L-抗壞血酸、鄰二氮菲 天津市天新精細化工開發中心;癸酸 上海凌峰化學試劑有限公司;叔丁醇、無水硫酸鎂、變色硅膠、硫酸亞鐵、三氯化鐵、三氯乙酸 天津市福晨化學試劑廠;乙酸乙酯、正己烷、4A分子篩 天津市富宇精細化工有限公司,以上材料均為分析純;二苯苦味肼基自由基(DHHP·) 美國SIGMA-ALDRICH公司;大豆油 中糧集團有限公司;葵花籽油 金龍魚股份有限公司。

SB25-12DTDN型超聲波處理機 寧波新芝生物科技有限公司;RE-52 AAB型旋轉蒸發器 上海嘉鵬科技有限公司;X-5型顯微熔點測定儀 北京泰克儀器有限公司;KDC-1044型低速離心機 科大創新股份有限公司;DZF-6030A型真空干燥箱 上海一恒科學技術有限公司;2XZ型旋片式真空泵 上海儀器供銷公司;EQUINOX 55型紅外光譜儀 布魯克光譜儀器公司;4000Q Trap型質譜儀 AB SCIEX公司;UV-1601型紫外可見分光光度儀 北京瑞利分析儀器有限公司;743型Rancimat氧化穩定性測試儀 瑞士萬通中國有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 L-抗壞血酸癸酸酯的合成方法 150mL圓底燒瓶,在固定化脂肪酶(Novozym?435)用量為L-抗壞血酸質量的20%,L-抗壞血酸初始濃度為0.2mmol/mL、底物癸酸與L-抗壞血酸的摩爾比為3∶1、4A分子篩用量為每10mL溶劑1g、水浴恒溫55℃,超聲波功率密度為0.40W/cm2,反應時間為4h的條件下時,反應液經固液分離,分出酶、分子篩,所得濾液經減壓蒸餾蒸出溶劑,得到粗產物經真空干燥后用乙酸乙酯溶解,再經水洗、分液后用無水硫酸鎂干燥12h,抽濾得濾液經減壓蒸餾得到的產物用甲苯重結晶兩次,正己烷洗滌,真空干燥5h,稱產物質量并計算產率。

紅外光譜用布魯克光譜儀器公司EQUINOX 55型傅立葉變換紅外光譜儀測定,晶體直接測量,掃描范圍4000~500cm-1。

質譜由美國AB SCIEX公司的4000Q Trap質譜儀測定,采用電噴霧ESI離子源,電子能量70eV,傳輸線溫度275℃,離子源溫度200℃,采用負離子模式,母粒子m/z330,激活電壓1.5V,質量掃描范圍0~1000。

1.2.2 L-抗壞血酸癸酸酯的純度測定 產物用顯微熔點儀測定產物熔程,測得產物熔程須在2℃以內。并且用國標GB16314-1996的碘量法方法測定產物的純度[8]。

1.2.3 L-抗壞血酸癸酸酯對羥自由基清除能力的測定 對羥基自由基清除能力的測定采用Fenton反應[9]。先配制0.75mmol/L鄰二氮菲無水乙醇溶液,取該液1mL,加2mL的0.2mmol/L磷酸鹽緩沖液(pH7.4),充分混勻后加入0.75mmol/L硫酸亞鐵溶液1mL,混勻后加入1mL不同濃度的L-抗壞血酸癸酸酯樣品為處理樣,對照樣加入1mL蒸餾水以補充體積;最后加入0.01%H2O21mL,空白對照不加0.01%H2O2,以蒸餾水補充體積。反應液在37℃保溫1h后,于536nm處測定吸光度。同時與TBHQ、VC、AP比較清除能力。樣品對羥自由基的清除率按下式計算:

清除率(%)=(A536處理-A536對照)/(A536空白對照-A536對照)×100

1.2.4 L-抗壞血酸癸酸酯對DHHP自由基清除能力的測定 配制濃度為0.2mmol/L的DPPH·乙醇溶液,分別吸取不同濃度的L-抗壞血酸癸酸酯樣品的乙醇溶液2mL,加入0.2mmol/L的DPPH·乙醇溶液2mL,搖勻后在室溫黑暗處放置30min。以無水乙醇調零,測定517nm處的吸光值A樣品。再測定2mL DPPH溶液與2mL乙醇在517nm處的吸光值ADPPH·。同時與TBHQ、VC、AP比較清除能力[10]。樣品對DPPH·清除率按下式計算:清除率(%)=(ADPPH·-A樣品)/ADPPH·×100

1.2.5 L-抗壞血酸癸酸酯還原能力的測定 采用普魯士藍法[11],并略作改進。先將樣品配成一定質量濃度溶液,取0.5mL L-抗壞血酸癸酸酯樣品溶液,加入到2.5mL 0.2mol/L的磷酸緩沖溶液(p H6.6)和2.5mL 1%的鐵氰化鉀(K3Fe(CN)6)的離心管中,混合均勻,50℃水浴20min后快速冷卻,加入2.5mL 10%的三氯乙酸溶液,2000r/min離心10min。取上清液2.5mL,加入2.5mL蒸餾水和0.5mL 0.1%的三氯化鐵溶液,混合均勻,室溫下靜置反應10min,于700nm處檢測吸光值。溶液在700nm處的吸光值越高,則樣品的還原能力越強。同時與TBHQ、VC、AP比較還原力。

1.2.6 L-抗壞血酸癸酸酯在油脂中的抗氧化性能的測定 通過測定各添加抗氧化劑的油樣氧化誘導期,比較抗氧化性[12]。精確稱取20mg各抗氧化樣品,用無水乙醇分出1.0mg/mL乙醇溶液,根據需要用移液管準確移取一定量的抗氧化劑溶液分別加入到3.00g油樣中,配成相應200ppm級的試樣,然后在Rancimat儀上測定各油樣的氧化誘導期,空氣流速為10mL/min,實驗溫度為120℃。同時與TBHQ、VC、L-抗壞血酸棕櫚酸酯(AP)比較氧化誘導期。

1.2.7 數據分析 所有的數據都是進行過三次重復實驗,特定數據使用SPSS軟件程序進行了統計分析,通過方差分析和多組樣本間差異顯著性分析。p<0.05時,該組數據被認為具有顯著性差異。

2 結果與討論

2.1 L-抗壞血酸癸酸酯的合成及分離純化

2.1.1 溶劑對產率的影響 溶劑對脂肪酶催化合成的效率有很大影響,原因之一在于溶劑的極性是否合適。溶劑的極性會直接影響酶的活性和穩定性,溶劑的極性過大會使酶的水化層逐漸被破壞,導致酶的失活。選擇合適的溶劑也需考慮反應物和產物在溶劑中的溶解性,L-抗壞血酸分子具有一定極性,癸酸分子為非極性,因此要選擇一種具有合適極性的溶劑可以同時溶解L-抗壞血酸和癸酸,同時又不會造成酶的失活。且兼顧溶劑揮發性、沸點、成本、毒性等影響產品產業化的因素。

圖1 溶劑對L-AD產率的影響Fig.1 Effect of solvent on yield of L-ascorbic decanoate

當固定化脂肪酶(Novozym?435)用量為L-抗壞血酸質量的20%,L-抗壞血酸初始濃度為0.2mmol/mL、底物癸酸與L-抗壞血酸的摩爾比為3∶1、4A分子篩用量為每10mL溶劑1g、水浴恒溫55℃,超聲波功率密度為0.40W/cm2,反應時間為4h時,分別使用正己烷、氯仿、叔戊醇、叔丁醇、四氫呋喃、丙酮、乙醇和甲醇作為溶劑進行實驗,結果如圖1所示。由圖1可知,極性適中的叔戊醇、叔丁醇、四氫呋喃和丙酮都可以作為合成L-抗壞血酸癸酸酯的溶劑,叔戊醇與叔丁醇產率幾乎相同,但叔丁醇的沸點比叔戊醇低很多,因此,減壓蒸餾除去溶劑時相對容易且耗能較低,且叔丁醇市售價格較叔戊醇便宜很多,考慮產業化因素,選擇叔丁醇作為合成L-抗壞血酸癸酸酯的溶劑。

2.1.2 反應時間對產率的影響 L-抗壞血酸在叔丁醇中的溶解度有限,隨著反應進行,L-抗壞血酸在溶劑中逐漸溶解,且酯化反應需要一定的時間才達到平衡。當條件為固定化脂肪酶(Novozym?435)用量為L-抗壞血酸質量的20%,L-抗壞血酸初始濃度為0.2mmol/mL、底物癸酸與L-抗壞血酸的摩爾比為3∶1、4A分子篩用量為每10mL溶劑1g、水浴恒溫55℃,超聲波功率密度為0.40W/cm2,反應時間由1~6h時的產率變化如圖2所示。由圖2可知,反應時間對于L-抗壞血酸癸酸酯的產率有很大影響,在4h內隨著時間的延長,產率逐漸升高;超過4h后,產率提升緩慢并逐步趨于平穩,反應基本處于平衡狀態,再延長反應時間并不能夠有效提高產率,因此,最佳反應時間選為4h。

圖2 時間對L-AD產率的影響Fig.2 Effect of reaction time on yield of L-ascorbic decanoate

2.1.3 溫度對產率的影響 固定化脂肪酶催化的酯化反應需要在合適的溫度下才能進行,其催化效率也與溫度密切相關。當固定化脂肪酶(Novozym?435)用量為L-抗壞血酸質量的20%,L-抗壞血酸初始濃度為0.2mmol/mL、底物癸酸與L-抗壞血酸的摩爾比為3∶1、4A分子篩用量為每10mL溶劑1g、超聲波功率密度為0.40W/cm2,反應時間為4h時,水浴溫度由40℃升至65℃時的產率變化如圖3所示。由圖3可知,在40~55℃時,升溫有利于酶促反應速度的升高,使得酯化反應的產率迅速提高,當溫度為55℃時L-抗壞血酸癸酸酯產率達到最高。但當溫度超過55℃時,隨著溫度的繼續升高,L-抗壞血酸癸酸酯產率卻有所下降。此外,產物的抗氧化基團連烯二醇結構在高溫下易被破壞,如果過高溫度也會降低產物的產率。因此,反應的最佳溫度選為55℃。

圖3 溫度對L-AD產率的影響Fig.3 Effect of temperature on yield of L-ascorbic decanoate

2.1.4 脂肪酸與L-抗壞血酸摩爾比對產率的影響 底物的摩爾比對L-抗壞血酸癸酸酯產率有直接影響。固定化脂肪酶(Novozym?435)催化酯化反應是L-抗壞血酸和癸酸反應生成L-抗壞血酸癸酸酯和水的可逆反應,為了使其中一種底物反應轉化率提高,即平衡右移,可以使另一底物過量。在本反應中,L-抗壞血酸在溶劑叔丁醇中溶解度較低,溶解于溶劑中的L-抗壞血酸不斷與癸酸反應,同時未溶解的L-抗壞血酸不斷溶解補充,所以在反應過程中其濃度基本無變化。因此,使在叔丁醇中的溶解度遠大于L-抗壞血酸溶解度的癸酸過量,可以提高L-抗壞血酸的轉化率。當條件為固定化脂肪酶(Novozym?435)0.35g,L-抗壞血酸10mmol,4A分子篩5g,叔丁醇50mL,水浴恒溫55℃,超聲波功率密度為0.40W/cm2,反應時間為4h,癸酸物質的量由10~50mmol時產率的變化如圖4所示。由圖4可知,當癸酸與L-抗壞血酸的摩爾比從1∶1上升至3∶1時,L-抗壞血酸的轉化率明顯提高,繼續增大癸酸的濃度,L-抗壞血酸酯的產率不再繼續上升。因此,反應的底物癸酸和L-抗壞血酸的最佳摩爾比選為3∶1。

圖4 底物的摩爾比對L-AD產率的影響Fig.4 Effect of substrate molar ratio on yield of L-ascorbic decanoate

2.1.5 超聲波功率密度對產率的影響 如上文所述,超聲波產生的作用會促進L-抗壞血酸的溶解和促進底物濃度均勻,進而促進L-抗壞血酸癸酸酯產率的提高和反應時間的減少。當固定化脂肪酶(Novozym?435)用量為L-抗壞血酸質量的20%、L-抗壞血酸初始濃度為0.2mmol/mL、底物癸酸與L-抗壞血酸的摩爾比為3∶1、4A分子篩用量為每10mL溶劑1g、水浴恒溫55℃,反應時間為4h時,超聲波功率密度由0.00~0.40W/cm2時產率的變化如圖5所示。由圖5可知,酶催化效率受到底物擴散速度的影響,局部濃度不均勻會導致產率低,超聲波的功率密度影響了底物擴散的速度。超聲波的工作頻率固定為40k Hz,當功率密度小于0.16W/cm2時產率很低,當超聲波的功率密度繼續提高時,產率明顯提高,當達到處理機最大功率密度0.40W/cm2時,產率達到78.48%。最佳功率密度定為0.40W/cm2。

圖5 超聲波的功率密度對L-AD產率的影響Fig.5 Effect of ultrasonic power density on yield of L-ascorbic decanoate

2.1.6 固定化脂肪酶使用次數對產率的影響 工業化生產需要控制成本,本實驗中酶的價格相對于其他原料較高,為了降低成本,固定化酶需要進行重復使用,本實驗考察了固定化酶在功率密度為0.40W/cm2、工作頻率為40k Hz時重復使用8次的效果。當固定化脂肪酶(Novozym?435)用量為L-抗壞血酸質量的20%、L-抗壞血酸初始濃度為0.2mmol/mL、底物癸酸與L-抗壞血酸的摩爾比為3∶1、4A分子篩用量為每10mL溶劑1g、恒溫55℃,超聲波功率密度為0.40W/cm2,反應時間為4h,使用次數與產率的關系如圖6所示。由圖6可知,前4批次產率都在60%以上,最高產率為首次使用時的產率78.48%,后4批次產率明顯降低到40%以下,可能是脂肪酶的在多批次合成之后出現了鈍化,也可能是固定化脂肪酶酶受到超聲波的空化作用太強烈使得一部分固定化酶的結構出現變形甚至破碎、脫落。因此,固定化脂肪酶的合適使用次數為4次。

圖6 固定化酶的使用次數對L-AD產率的影響Fig.6 Effect of the immobilized lipase reused times on yield of L-ascorbic decanoate

2.2 產物的鑒定

2.2.1 產物的純度測定 由超聲波場中固定化脂肪酶催化合成處的粗產物,分離提純后得到的為白色有光澤的針狀晶體,測得熔點為94.1~94.9℃,用國標GB16314-1996的碘量法[8]測定產物的純度為98.6%。

2.2.2 產物的紅外光譜檢測 從紅外光譜圖(圖7)中可以看出3390cm-1處出現-OH的吸收峰,在2919cm-1出現了CH2的C-H伸縮振動吸收峰,在1730cm-1出現了羧酸酯基的伸縮振動吸收峰,在1654cm-1出現了L-抗壞血酸的C=C的吸收峰,指紋區的吸收峰(1290、1144、723cm-1)進一步提供了證明,符合L-抗壞血酸癸酸酯的結構特征。

圖7 L-抗壞血酸癸酸酯的紅外光譜圖Fig.7 Infrared spectrogram of L-ascorbic decanoate

2.2.2 產物的質譜檢測 質譜圖(圖8)中的分子離子峰329.6(M-1)和660.1(2M-1)也證實了所得產物為L-抗壞血酸癸酸酯。

2.3 L-抗壞血酸癸酸酯的抗氧化性測定

圖8 L-抗壞血酸癸酸酯的質譜圖Fig.8 Mass spectrogram of L-ascorbic decanoate

2.3.1 L-抗壞血酸癸酸酯對羥自由基清除能力的測定 采用鄰二氮菲Fe2+氧化法測定L-抗壞血酸癸酸酯對羥自由基的清除能力,原理是鄰二氮菲與Fe2+能夠生成穩定的橙紅色絡合物,此絡合物在510nm波長處有最大吸收,反應體系中定量加入Fe+2和H2O2,通過Fenton反應產生羥基自由基,自由基和H2O2把一部分Fe2+氧化為Fe3+,使橙紅色絡合物減少,加入抗氧化劑可與體系中的自由基和氧化劑反應,抑制Fe2+的減少,通過測定吸光度的變化以評價抗氧化劑清除羥基自由基能力的高低。

圖9 L-抗壞血酸癸酸酯對羥自由基的清除能力的測定Fig.9 Hydroxyl radical clearing capacity of L-ascorbic decanoate

由圖9可知,在一定質量濃度范圍內,各抗氧化劑對羥自由基的清除能力都隨著濃度的增加而增強,因為在極性較強的溶劑中L-抗壞血酸溶解度大,且相同質量濃度試樣中有抗氧化活性的連烯二醇結構所占比重相對較高。此法測定結果為L-抗壞血酸的清除羥自由基的能力較強,L-抗壞血酸癸酸酯和L-抗壞血酸棕櫚酸酯次之,TBHQ最弱,且各抗氧化劑清除能力與其質量濃度基本成量效關系。

2.3.2 L-抗壞血酸癸酸酯對DPPH自由基清除能力的測定 DPPH自由基分析法被廣泛用于抗氧化性的測定。此法是根據DPPH自由基有單電子,在517nm處有一強吸收,其醇溶液呈紫色的特性。當有自由基清除劑存在時,由于與其單電子配對而使其吸收逐漸消失,其褪色程度與其接受的電子數量成定量關系,因而可用分光光度計進行快速的定量分析。

由圖10可知,各試樣均對DPPH自由基有清除能力,清除率隨試樣濃度的增大而增強。在相同的質量濃度下,TBHQ對DPPH自由基清除能力最強,抗壞血酸次之,L-抗壞血酸癸酸酯和L-抗壞血酸棕櫚酸酯較弱,可能因相同質量試樣中有抗氧化活性的連烯二醇結構所占比重相對較高所致。

圖10 L-抗壞血酸癸酸酯對DPPH·清除能力的測定Fig.10 DPPH radical clearing capacity of L-ascorbic decanoate

2.3.3 L-抗壞血酸癸酸酯的還原性測定 還原力是表示抗氧化物質提供電子能力的指標之一,可檢驗化合物是否為良好的電子供體??寡趸镔|提供的電子可以把Fe+3還原為Fe+2,引起體系溶液顏色的改變,測定吸光度就可以判斷物質還原能力的強弱,還原力越強,抗氧化能力越強。

圖11 L-抗壞血酸癸酸酯的還原性測定Fig.11 Reducing power of L-ascorbic decanoate

由圖11可知,各試樣都具有一定的還原力,各物質的還原力隨著濃度的增加而增強??赡芤騿挝毁|量試樣中有抗氧化活性的連烯二醇結構所占比重相對較高,在相同的質量濃度下L-抗壞血酸癸酸酯和L-抗壞血酸棕櫚酸酯弱于L-抗壞血酸,但強于TBHQ。

2.3.4 L-抗壞血酸癸酸酯在油脂中的抗氧化性能的測定 通過將一定量的油脂在反應器中加熱并通入空氣,促使油脂氧化產生氫過氧化物,氫過氧化物受熱分解,產生短碳鏈揮發性物質如醇、醛、酸等,揮發性物質被吸收瓶中的去離子水吸收。通過測定吸收液的導電變化,來反應油脂的氧化穩定性,其表示方法為氧化誘導時間(用h表示)。誘導時間越長,抗氧化性越好,反之越差。

圖12 L-抗壞血酸癸酸酯在油脂中的抗氧化性能測定Fig.12 Antioxidant activity in oils of L-ascorbic decanoate

由圖12可知,各試樣均對兩種油脂的氧化誘導時間有延長作用,即有抗氧化作用。添加相同抗氧化劑試樣的葵花籽油比大豆油的氧化誘導時間短,符合規律:即不飽和脂肪酸越多,氧化速度越快。在兩種不同的油脂中,L-抗壞血酸癸酸酯的抗氧化能力稍強于L-抗壞血酸棕櫚酸酯,且兩者都強于TBHQ,L-抗壞血酸抗氧化性最弱。在相同質量濃度下,L-抗壞血酸雖然在清除羥自由基、DPPH自由基能力和還原力強于另外三種抗氧化劑,但是,L-抗壞血酸不能很好溶于油脂中,抗氧化的基團無法與油脂良好的接觸碰撞,導致抗氧化能力低。L-抗壞血酸癸酸酯克服了L-抗壞血酸油溶性不好的缺點,并且具有良好的抗氧化性;由于L-抗壞血酸癸酸酯分子的側鏈碳原子比L-抗壞血酸棕櫚酸酯分子的側鏈碳原子少了六個碳原子,所以相同質量濃度中L-抗壞血酸癸酸酯的連烯二醇結構的比重大于L-抗壞血酸棕櫚酸酯,可能導致L-抗壞血酸癸酸酯的抗氧化能力稍大于L-抗壞血酸棕櫚酸酯。

3 結論

超聲波可以顯著促進L-抗壞血酸的溶解,加速固定化脂肪酶在叔丁醇中催化合成L-抗壞血酸癸酸酯,提高產率,縮短反應平衡時間。同時適當過量的癸酸,合適的溶劑、反應時間、反應溫度以及超聲波功率密度可以使產率達到最高,最佳的條件為:酶用量為L-抗壞血酸質量的20%、L-抗壞血酸初始濃度為0.2mmol/mL、底物癸酸與L-抗壞血酸的摩爾比為3∶1、4A分子篩用量為每10mL溶劑1g、恒溫55℃,超聲波功率密度為0.40W/cm2,反應時間為4h,最高產率達到78.48%。L-抗壞血酸癸酸酯具有很強的清除羥自由基、DPPH自由基能力和還原力,在一定質量濃度下優于L-抗壞血酸棕櫚酸酯,且前兩個指標優于TBHQ;并且克服了L-抗壞血酸油溶性不好的缺點,添加入油脂后的抗氧化作用明顯。因此,L-抗壞血酸癸酸酯是一種有潛力的抗氧化劑,有廣泛的應用價值。

[1]李炎.食品添加劑制備工藝[M].廣州:廣東科技出版社,2001:163-164.

[2]Wen B,Eli W,Xue Q,et al.Ultrasound accelerated esterification of palmitic acid with vitamin C[J].Ultrasonics Sonochemistry,2007(14):213-218.

[3]Chang SW,Yang CJ,Chen FY,et al.Optimized synthesis of lipase-catalyzed l-ascorbyl laurate by Novozym?435[J].Journal of Molecular Catalysis B:Enzymatic,2009,56:7-12.

[4]姜新慧,晏日安,曾永青.非水相中脂肪酶催化合成L-抗壞血酸棕櫚酸酯[J].食品科技,2011,35(5):258-261.

[5]Burham H,Rasheed RAGA,Noor NM,et al.Enzymatic synthesis of palm-based ascorbyl esters[J].Journal of Molecular Catalysis B:Enzymatic,2009,58:153-157.

[6]Lerin LA,Feiten MC,Richetti A,et al.Enzymatic synthesis of ascorbyl palmitate in ultrasound-assisted system:Process optimization and kinetic evaluation[J].Ultrasonics Sonochemistry,2011(18):988-996.

[7]Humeau C,Girardin M,Rovel B,et al.Effect of the thermodynamic water activity and the reaction medium hydrophobicity on the enzymatic synthesis of ascorbyl palmitate[J].Journal of Biotechnology,1998,63:1-8.

[8]中國國家標準化管理委員會.GB16314-1996,食品添加劑L-抗壞血酸棕櫚酸酯[S].北京:中國國家標準化管理委員會,1996.

[9]李曉霞,晏日安,段翰英.白皮杉醇的合成及抗氧化活性研究[J].食品與發酵工業,2010,37(4):78-81.

[10]莫正昌,鄧靖,汲廣全,等.鹿蹄草提取物體外抗氧化活性評價[J].食品科學,2010,31(3):19-21.

[11]劉杰超,王思新,焦中高,等.蘋果多酚提取物抗氧化活性的體外實驗[J].果樹學報,2005,22(2):106-110.

[12]楊敏,周瑞寶,宋偉.不同大豆品種提取油脂氧化穩定性研究[J].糧食與油脂,2007(11):21-23.

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