血清藥物化學在中藥領域應用研究進展

★ 胡律江 曾文雪 雷景邦 趙曉娟 郭慧玲

(1.江西中醫藥大學 江西 南昌 330004；2.湖南中醫藥大學 湖南 長沙 410208；3.江西省食品藥品稽查局 江西 南昌 330029)

近年來，血清藥理學和血清藥物化學在闡明中藥藥效物質基礎及探討其藥理作用機制的研究中得到廣泛的應用。中藥所含成分復雜，只有被吸收入血的成分才能發揮療效，因此給藥后進入血液的成分才是與功能主治相吻合的物質，才是真正治療疾病的關鍵。這主要包含三類物質，首先是中藥或復方中成分的原型，其次是中藥或復方中成分經各種酶和腸菌群的作用產生的代謝產物，第三是生理活性物質，如激素類、遞質等。

1988年田代真一[1,2]首次針對藥效物質基礎提出了假設，他認為“中藥產生生物活性的成分可能是中藥經過菌群代謝之后的產物”，并在此基礎上引出了一個全新概念“血清藥物化學”。1997年，我國學者王喜軍[3]正式提出了“中藥血清藥物化學”的概念與實施細則，并將血清藥理學和血清藥物化學的研究方法引入復方藥效物質基礎的研究，取得了許多有價值的研究成果。探討中藥或復方藥效物質基礎及作用機制的研究，已成為中藥研究的關鍵,由于含藥血清的藥理效應受到其主要化學成分的影響，因而可通過血清藥物化學的方法明確血中移行成分，確定中藥及其復方中的指標性成分，深入探究藥理效應的作用基礎。目前，國內許多學者對血清藥物化學進行了大量的研究，為中藥藥效物質基礎和作用機制奠定了基礎，現對其應用研究現狀進行綜述。

1 血清藥物化學在單味藥中研究現狀

1.1 李月婷等[4]通過對比葒草提取液，給藥后含藥血清和空白血清的超高效液相色譜指紋圖譜，以葒草含藥血清對氧化損傷心肌細胞存活率，乳酸脫氫酶漏出率、丙二醛含量、超氧化歧化酶活力的影響為評價指標，從大鼠血清中發現25個移行成分，其中9個為原型成分，16個可能是其體內代謝產物，推測可能其為葒草保護心肌細氧化損傷的物質基礎。

1.2 霍世霞等[5]對高良姜中高良姜素、山奈素、槲皮素對照品與含藥血清的HPLC圖譜對比，并從原藥材中制備分離純化及進行結構鑒定確定高良姜素是高良姜中入血成分。

1.3 沈嬋娟等[6]通過比較茯苓醇提物、空白血清和含藥血清的HPLC圖譜，結果顯示雌雄大鼠入血成分略有差異，雄性大鼠含藥血清中有11種移行成分，其中6中為原型藥物，5中為代謝產物，雌性大鼠含藥血清中有9種移行成分，其中5種為原型藥物，4中為代謝產物，提示藥物代謝存在性別差異。

1.4 黃柏[7]中16個成分入血，7個以原型藥物存在，9個為代謝產物，初步確定巴馬丁和小檗堿為黃柏的主要入血成分。

1.5 謝長等[8]對菝葜抗炎活性部位進行血清藥物化學研究表明，菝葜提取物含藥血清中發現了45種入血成分，另發現新婦苷、黃杞苷、白藜蘆醇、槲皮素為主要入血成分，即可能為菝葜抗炎活性部位的藥效物質基礎。

1.6 雷公藤[9]提取物給藥后24h內血中先后出現了8個移行成分，其中5個為原型藥物，2個為代謝產物，1個為血清固有產物。雷公藤為8個入血成分之一。

沒食子酸的研究表明[10]，給藥后血清中確定5個血中移行成分，4個為原型成分，另外1個入血成分則可能是某種化學成分的代謝產物。4個入血成分可能為沒食子的體內直接作用物質，3種含藥血清中均含沒食子酸，提示沒食子的作用物質可能是沒食子鞣質在體內降解后的沒食子酸。

1.7 程星燁等[11]采用LC-MS/MS對延胡索活性部位入血成分進行研究，通過對保留時間比對、離子碎片解析等綜合分析，堅定了9個入血成分均為原型成分，同時也發現部分生物堿是以葡萄糖酸醛結合物的形式存在。

1.8 龍血竭[12]給藥后在含藥血清中發現6個入血成分，其中5個都屬原型成分，分別為，3,4'-二羥基-5-甲氧基二苯乙烯、劍葉龍血素B,4'-羥基-4,2'-二氫查耳酮(新化合物)、劍葉龍血素A和龍血素B；1個可能為原型成分或代謝產物。

此外，還有學者對金銀花、防風、五味子、烏藥、淫羊藿等藥材進行了血清藥物化學研究，為深入研究中藥藥效物質基礎和闡明作用機制奠定了一定的基礎。

2 血清藥物化學在中藥復方物質基礎方面的研究現狀

2.1 對當歸芍藥散的研究表明[13]，給藥后大鼠入血成分中有7個被確定為原型吸收、1個被確定為代謝產物吸收，并發現當歸芍藥散的藥效成分可能為芍藥苷磺酸鹽、芍藥內酯苷、芍藥苷、阿魏酸、川芎內酯I、藳本內酯和丁烯酜內酯。

2.2 郭輝等[14]對大黃附子湯的研究表明，給藥后發現18個入血成分，其中初步確定4個為原型成分，14個為代謝產物，血中移行成分主要來源于大黃和附子兩味君藥，復方中的蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、細辛脂素均以原型形式直接吸收入血，初步推測其為治療寒積腹痛的藥效物質基礎。

2.3 地黃飲子研究表明[15]，給藥后家兔血清中9個入血成分，其中2個為原型成分，7個為代謝產物，這些分別來源于五味子、遠志、石菖蒲、巴戟天、山茱萸、肉蓯蓉、附子和麥冬。

2.4 復方貞術調脂膠囊研究表明[16]，給藥后血清中發現有28個藥源性成分，其中10個為原型成分，18個為代謝產物。體內藥效物質并非體外成分的簡單相加，經體內生物轉化和選擇性吸收，體外主要成分巴馬汀和小檗堿在體內經代謝后含量明顯降低，而丹酚酸A和丹酚酸B等含量較高的物質在實驗中未被檢測到。

2.5 生脈散的研究表明[17]，給藥后血清中產生18個血中移行成分，利用質譜數據表征血中移行成分的結構，其中13個為原型藥物，5個為代謝產物，推測他們有可能為生脈散的體內直接作用物質。

2.6 呂永海等[18]采用RRLC-Q-TOF/MS檢測到復方丹參片的入血成分，14個原型藥物和8個代謝產物，其中丹參醛、丹參新醌B、丹參素的糖結合物(M1)和丹參新醌B的甲基化產物(M8)等是利用LC-MS首次在大鼠體內檢測到。利用UPLC-Q-TOF/MS鑒定了心肌缺血大鼠血漿中的22個生物標志物，其中7個標志物出現在嘌呤代謝途徑中，丹參酮ⅡA和丹參酚酸B分別具有調節鈣離子通道和抑制腎上腺素β受體的作用。

此外，對燈盞細辛提取物、芍藥甘草湯、舒胸片、四逆散、酸棗仁湯、三黃瀉心湯、大承氣湯等的血清藥源性成分的研究初步明確了復方中眾多化學成分在體內的吸收情況，為中藥是我藥效物質基礎研究奠定了一定的基礎。

3 血清藥物化學在其他領域的應用

近些年，藥食同源的中藥材成為我國功能性食品的資源寶庫。血清藥物化學在尋找食品功能因子和功能性食品功效物質基礎的研究方面起到了很大的作用。功能食品中的功能因子，與藥物中的藥效活性成分基本類似，因此中藥血清藥物化學的研究方法也可以應用到藥食同源的中藥材食品功能因子的開發，同時，該法較之傳統的研究方法，血中移行成分比原藥的化學成分減少了很多，這在很大程度上降低了研究的難度，提高了研究的針對性，也節約了研究成本，為我們的功能性食品研究提供了新的思路[19]。

此外，孫志翠等人提出[20]，借鑒“中藥血清藥物化學”研究思路，運用化學分析分離方法，觀察給藥后進入腦脊液的化學成分，通過關聯透過血腦屏障的移行成分與中藥復方的藥理效應，來闡明藥物透過血腦屏障來發揮作用的物質基礎，這一方法的引入為中藥復方體內的藥代動力學研究開辟了了新的道路，為中藥物質基礎的研究邁了新的一步。

4 研究中藥血清藥物化學的意義

4.1 促進了中藥血清藥理學和中藥藥代動力學發展 中藥血清藥理學是一種離體的實驗方法，是指給動物服藥后，再取經消化、吸收、分布，代謝和排泄等體內過程的含藥血清作為藥物源進行藥理學實驗的方法。在實驗中受到的影響因素較多，結果重現性低，引入血清藥物化學的方法，可以根據給藥后入血成分和血清HPLC指紋圖譜的變化規律，消除不利的因素，采取合理的實驗方案，利用化學分離技術有效的集合入血成分。

藥物動力學是應用動力學的基本原理，定量的描述藥物通過各種途徑進入人體內的吸收、分布、代謝和排泄等過程的動態變化規律。應用血清藥物化學可在眾多的復方成分中富集入血成分，形成有效成分群，從而更加清晰，全面的闡釋復方中藥效物質在體內經時量變化過程和藥代動力學模型，探討藥物動力學參數與藥物效應之間的關系，研究藥物制劑體外的動力學特征與動力學之間的關系，也可以推測體內藥量與時間的關系，以藥物動力學參數定量的描述藥物在體內的變化規律。

4.2 建立中藥及復方的質量標準 建立既符合中醫藥特色、又能走向國際的中藥質量標準體系，是中藥實現現代化、標準化的關鍵。中藥成分復雜，進入血液的成分才是起效的根本物質。因此通過指紋圖譜模式結合中藥血清藥物化學方法，同時以中藥復方中的主要成分和血中移行成分均為指標，既能合理地評價復雜的中藥復方的穩定性和真實性，也可以更真實全面的體現中藥多途徑多靶點的作用特點[21]。

4.3 有助于闡明中藥復方的配伍機制 配伍是中藥在臨床應用的特點，通過配伍可增強療效，降低毒副作用，擴大適應范圍，改變藥性藥味以適應病情需要。按照配伍變化的發生部位，分為藥物進入機體前由其理化性質的改變所引起的，稱之為體外配伍變化。體內藥物相互作用主要表現在藥物再吸收、分布、代謝與排泄過程中產生的協同、拮抗或毒副作用。利用現代科學方法和先進的技術，通過中藥血清藥物化學方法可以全面分析復方的血中移行成分、確定復方的藥效物質，闡明有效成分的體內動態變化和成分間相互作用及消長規律的研究，能夠在一定程度上科學地詮釋復方的配伍規律[22-24]。

4.4 促進了新藥開發 從植物藥、動物藥、礦物藥中提取有效成分或有效成分群是開發中藥新藥的重要途徑。在應用血清藥物化學研究的基礎上，進一步利用化學分析分離方法對中藥中有效成分分離并制備其血中移行成分，從而獲得有效成分或有效成分群。再以此有效成分或有效成分群為原料進行新藥開發與申報。因此中藥血清藥物化學為新藥開發開辟了新的研究方法和思路。

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