星蔞承氣湯對缺血性中風大鼠自由基代謝及腦水腫的影響

周喜燕　李　彬　呂以靜　李　寧（山東省青島市海慈醫療集團，山東 青島 266000）

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星蔞承氣湯對缺血性中風大鼠自由基代謝及腦水腫的影響

周喜燕李彬呂以靜李寧
（山東省青島市海慈醫療集團，山東 青島 266000）

目的 探討星蔞承氣湯治療缺血性中風的作用機制。方法 SD大鼠隨機分為假手術組、模型組和治療組，采用自體糞便灌胃加鼠腦立體定位注射法復制痰熱腑實證缺血中風大鼠模型，分別測定各組大鼠血SOD、MDA的含量及腦組織含水量，并在不同時點評定神經功能缺損評分。結果 治療組腦組織含水量明顯低于模型組（P＜0.01）。治療組與模型組相比較，SOD水平升高，MDA水平降低，差異均有統計學意義（P＜0.01）。結論 星蔞承氣湯可提高大鼠血SOD含量，降低MDA含量，減輕腦組織水腫，提示其有抗自由基損傷的作用。

星蔞承氣湯缺血性中風痰熱腑實腦水腫SODMDA

缺血性中風病 （腦梗死）是最常見的腦血管病急癥，約占全部腦血管病的70%，其病死率約10%，致殘率達50%以上，在存活者中復發率達40%以上，而復發次數越多其病死率和致殘率越高［1］。臨床研究提示，約有40%～50%的患者在缺血中風急性期表現出痰熱腑實證，痰熱阻滯、腑氣不通，成為此時病機的主要矛盾［2］。星蔞承氣湯作為化痰通腑法的代表方劑目前被廣泛應用于臨床，且療效顯著，但其作用機制尚未完全闡明。本研究通過觀察星蔞承氣湯對缺血性中風痰熱腑實證大鼠自由基代謝及腦水腫的影響，從動物實驗角度探討其可能的作用機制。

1　資料與方法

1.1藥物與試劑星蔞承氣湯：全瓜蔞15 g，膽南星9 g，生大黃6 g（后下），芒硝6 g（沖服）。藥材由青島市海慈醫療集團中藥制劑室提供，制得煎液備用，生藥含量為4.8 g/mL；檢測試劑盒均購自南京建成生物醫學工程研究所。

1.2動物與分組雄性健康SD大鼠，體質量250～300 g，由青島市實驗動物中心提供，動物許可證號：20140007。將大鼠隨機分為假手術組、模型組和治療組，每組8只。

1.3模型制備

1.3.1痰熱腑實證模型大鼠適應性喂養3 d后，第4日，模型組、治療組復制痰熱腑實證模型［3］：用10%自體糞便灌胃（1 mL/100 g），每日1次，連續3 d。大鼠每日定量投放飼料（10 g/100 g體質量），飲水不限，每日收集糞便1次，觀察糞便性狀、記錄糞便粒數及糞便質量。假手術組以等量涼開水灌胃，每日1次，連續3 d。

1.3.2急性缺血性中風模型實驗第7日，模型組和治療組參考文獻［4］方法制備急性缺血中風大鼠模型。用10%水合氯醛進行腹腔麻醉 （用量300 mg/kg），將大鼠俯臥位固定于腦立體定向儀上，麻醉后，在模型鼠顱頂沿正中線做一切口，長約1.5 cm，暴露出顱骨，以前囟做為標志，向前0.9 mm，向左旁開5.2 mm，向下8.7 mm植入ET-1導管；將ET-1（60 pmol/μL）以0.6 μL/min的速率注射到MCA附近，留針5 min，后緩慢拔針，退針后縫合頭皮；術口局部以酒精消毒。分別于缺血2、24、72 h，參照Zea Longa評定標準［5］進行神經功能評分。評分標準：0分：無神經功能缺失癥狀，活動正常；1分：不能完全伸展對側前爪；2分：爬行時出現向右轉圈；3分：行走時，身體向偏癱側傾倒；4分：不能自發行走，意識喪失；5分：死亡。剔除評分為0分和4分及以上者，隨機補充保證每組8只。

1.4給藥方法治療組大鼠術后麻醉清醒后即予星蔞承氣湯7.0 g/（kg·d）灌胃（按大鼠與人體表面積等效劑量折算，相當于70 kg體質量成人臨床劑量的7倍），連續3 d。假手術組、模型組術后麻醉清醒后灌服等體積涼開水，連續3 d。

1.5標本采集及檢測

1.5.1超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）檢測經大鼠眼眶采血，取5 mL至分離膠管中，4℃，3000 r/min離心10 min，取上層血清，采用放射免疫分析法測定SOD，硫代巴比妥酸（TBA）比定法測定MDA，操作過程中嚴格按照試劑盒說明進行。

1.5.2腦組織含水量測定將各組采血后的大鼠斷頭取腦，除去嗅球、腦干及小腦，取右腦半球樣本稱質量，后放入105℃的烤箱內烘烤，48 h后再次稱質量。腦含水量=［（濕質量-干質量）/濕質量］×100%。

2　結　果

2.1各組大鼠神經功能缺失評分的比較見表1。結果示，經星蔞承氣湯治療后，治療組大鼠神經功能缺損評分較治療前及同時點模型組相比明顯改善 （P＜0.01），差異具有統計學意義。

表1　各組大鼠不同時點神經功能缺失評分比較（分，±s）

表1　各組大鼠不同時點神經功能缺失評分比較（分，±s）

與模型組同時點比較，*P＜0.01；與本組2 h時比較，△P＜0.01。

組別n　72 h 2 h　24 h假手術組8　0模型組　8　2.625±0.521 0 0 2.250±0.707　2.625±0.518治療組　8　1.375±0.517*△2.125±0.641　2.375±0.926

2.2各組大鼠血指標的比較見表2。模型組與假手術組相比，SOD水平降低、MDA水平升高，差異均有統計學意義（P＜0.05）；經星蔞承氣湯治療后，治療組與模型組相比較，SOD水平升高（P＜0.01），MDA水平數值降低，差異有統計學意義（P＜0.01）。

表2　各組大鼠血清SOD、MDA水平比較（±s）

表2　各組大鼠血清SOD、MDA水平比較（±s）

與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與假手術組比較，△P＜0.05，△△P＜0.01。下同。

組別　n　SOD（U/L）　MDA（nmol/L）假手術組　8　252.491±31.285　2.684±0.472模型組　8　116.738±40.169△　5.364±0.419△治療組　8　173.298±56.108**　3.983±0.522**

2.3各組大鼠腦組織含水量的比較見表3。治療后，與模型組、假手術組比較，治療組腦組織含水量明顯下降，差異有統計學意義（P＜0.01）。

表3　各組大鼠腦組織含水量比較（±s）

表3　各組大鼠腦組織含水量比較（±s）

組別　n　含水量（%）假手術組　8　18.44±2.04模型組　8　21.23±1.58治療組　8　14.94±2.37**△△

3　討　論

實驗研究發現，在缺血性中風的急性期，腦血流中斷后再灌注雖然能恢復缺血組織的血供、挽救瀕死的神經細胞，但同時也對神經細胞產生了一個快速的級聯反應損傷，最終導致神經細胞凋亡或壞死，即缺血-再灌注損傷［6］。腦缺血再灌注損傷是由多種因素參與的、復雜生理病理過程，其中氧自由基的生成及其引起的脂質過氧化是其損傷的重要機制之一［7］。機體在正常情況下，可產生少量的自由基，但被體內的自由基清除系統很快清除，組織細胞不會被損傷；但當腦缺血再灌注時，體內自由基清除系統功能下降，大量氧自由基在腦內缺血再灌注區產生，廣泛攻擊缺血區的生物膜結構（富含不飽和脂肪酸雙鏈），導致脂質過氧化，出現“瀑布狀”連鎖反應，引起生物膜結構和功能的破壞［8-9］。SOD作為機體細胞內重要的抗氧化酶和自由基清除劑，可以通過減少腦組織損傷后自由基的過度生成并加速其清除，減輕氧自由基對生物膜結構及其功能的破壞，從而保護組織細胞；MDA是脂質過氧化的最終產物，測定MDA可直接反應體內自由基水平，其高低又間接反映了機體受自由基攻擊的嚴重程度［10-11］。當機體發生病變時體內SOD和MDA的含量也發生改變。

中醫學認為中風后氣機逆亂，痰熱毒邪內蘊，阻于中焦形成痰熱腑實證，是中風病急性期的主要證候之一，是影響病情程度和轉歸預后的重要因素。星蔞承氣湯是王永炎教授在觀察中風患者病情發展、結合臨床實踐總結出來的化痰通腑法的代表方劑［12］。文獻研究表明，星蔞承氣湯治療急性腦梗死，可起到以下幾方面的功效：一是通降陽明胃腑之氣，折伐肝氣，可平降肝陽；二是借陽明泄下之力以引血下行，以降氣化痰祛瘀，促進患者神經功能的恢復［13-14］；三是星蔞承氣湯為苦寒清熱攻下之劑，方中瓜蔞清熱祛痰，理氣散結；膽南星清熱息風通絡化痰，配瓜蔞祛中焦之濁邪；生大黃后下，通腑蕩滌腸胃，峻下熱結；芒硝軟堅散結，配生大黃共達通降腑氣；4藥相配，化痰熱、通腑氣，能改善中風病急性期諸癥［15］。

本研究觀察發現造模后模型組、治療組模型血SOD含量較假手術組均下降，MDA含量升高，差異有統計學意義（P＜0.05）。治療后治療組SOD含量升高，MDA含量下降，腦組織含水量降低，有統計學意義（P＜0.05），說明星蔞承氣湯可顯著提高急性缺血中風大鼠的SOD活性，使體內氧自由基減少，從而減少了氧自由基引起的脂質過氧化損傷；降低MDA含量，可減輕缺血所致的腦組織自由基損傷，給損傷組織的修復創造一個較好的環境。因此星蔞承氣湯在臨床治療急性缺血性中風的過程中療效顯著，可能是通過減輕氧自由基損傷、消除腦水腫實現的。

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1004-745X（2016）05-0846-03

10.3969/j.issn.1004-745X.2016.05.028

2015-12-02）