聚醚砜濾芯對舒血寧注射液生產質量的影響

周曉雨，孫勝斌，陳翔宇，張巖巖，姜國志，陳鐘，

（1.河北神威藥業有限公司，河北廊坊065000；2.河北省中藥注射液工程技術研究中心，河北石家莊051430；3.神威藥業集團有限公司，河北石家莊051430；4.中藥注射劑新藥技術開發國家地方聯合工程實驗室，河北石家莊051430）

聚醚砜濾芯對舒血寧注射液生產質量的影響

周曉雨1，孫勝斌2，3，陳翔宇3，張巖巖3，姜國志4，陳鐘3，4

（1.河北神威藥業有限公司，河北廊坊065000；2.河北省中藥注射液工程技術研究中心，河北石家莊051430；3.神威藥業集團有限公司，河北石家莊051430；4.中藥注射劑新藥技術開發國家地方聯合工程實驗室，河北石家莊051430）

目的探討聚醚砜（PES）濾芯對舒血寧注射液生產質量的影響。方法對過濾前后的濾芯進行完整性測試，電鏡分析，溶出物分析及不揮發性殘留物測定，并測定總黃酮含量及指紋圖譜。結果與結論過濾前后的濾芯泡點，電鏡圖無明顯差異，可能引入舒血寧注射液的溶出物有聚乙烯吡咯烷酮、己內酰胺和聚乙二醇，但放大至工藝批量時溶出物濃度很低，可忽略，1支10英寸的PES濾芯的不揮發性殘留物不會超過0.161 0 g。過濾過程對舒血寧注射液的總黃酮含量及指紋圖譜無明顯影響。PES濾芯對舒血注射液生產質量無顯著影響。

聚醚砜濾芯；舒血寧注射液；溶出物；影響

膜過濾技術已被廣泛應用于制藥行業，是制藥純化、無菌保證過程的重要手段［1-2］。對于液體過濾，除菌濾芯的膜材的標稱孔徑一般為0.22 μm，且1 cm2有效過濾面積在工藝條件下可對缺陷型假單胞桿菌（Brevundimonas diminuta，ATCC19146）截留107CFU［3］。除菌濾芯的膜有親水和疏水之分，一般的液體無菌制劑產品溶劑均為注射用水，故選擇親水性除菌濾芯。聚醚砜（PES）濾芯的優點是具有獨特的親水性濾膜結構，孔徑分布均勻，孔隙率高，且具有廣泛相容性，耐酸、耐堿性能好，故多數無菌制劑的終端除菌過濾均選擇PES除菌濾芯。但需注意的是，2010年版《藥品生產質量管理規范》規定，與藥品直接接觸的生產設備表面應當平整、光潔、易清洗或消毒、耐腐蝕，不得與藥品發生化學反應、吸附藥品或向藥品中釋放物質［4］。近年來，對與藥品直接接觸的包裝材料、生產設備的研究越來越多，其中研究安瓿對藥品的影響較深入具體［5-7］，而同樣是與藥品直接接觸的過濾器材的深入研究卻鮮見報道。筆者研究了除菌過濾時使用的除菌濾芯對舒血寧注射液生產質量的影響，以探討濾芯的理化變化，對產品的有效成分的吸附或截留情況及主要成分物質基礎的變化情況。

1　儀器與試藥

1.1儀器

CPA225D型電子天平（賽多利斯科學儀器＜北京＞有限公司）；PHS-3C型pH計（上海理達儀器廠）；Palltronic FlowstarⅣ型自動完整性測試儀（頗爾過濾器＜北京＞有限公司）；VE-9800型電子顯微鏡（基恩士＜中國＞有限公司）；LC-20A液相色譜儀（島津＜中國＞有限公司）；氣質聯用儀（賽默飛世爾科技＜中國＞有限公司）。

1.2試藥

PES濾芯（科百特過濾器材有限公司，規格為10英寸，批號為CO0913092441，CN2813082762，CN1078561603）。舒血寧注射液（神威藥業集團有限公司，批號為150526C1，150527C1，150528C1，規格每支5 mL）。甲醇、乙腈為色譜級，其他試劑為AR級。蘆丁對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為100080-200707）；銀杏葉對照提取物（中國食品藥品檢定研究院，批號為110866-201204）。

2　方法與結果

2.1方法

2.1.1除菌濾芯處理

選擇3支除菌濾芯，分別過濾舒血寧注射液，過濾后的濾芯用5%氫氧化鈉溶液浸泡5 min后，用70℃注射用水沖洗30 min后備用，過濾前后的舒血寧注射液備用。

2.1.2濾芯泡點測定

采用PALL完整性測試儀測定濾芯使用前后的泡點值，儀器參數設置為：測試壓力2 750 mbar，測試時間600 s，最小泡點值3 400 mbar，最大壓力6 000 mbar。

2.1.3濾膜電鏡分析

過濾前從一根濾芯中取出部分濾膜，使用后從另一根濾芯中取出部分濾膜，用電子顯微鏡分別測試，觀察濾膜表面有無明顯侵蝕痕跡，濾膜孔徑有無明顯變化。

2.1.4溶出物分析

將1支經前處理的濾芯置于專用抽提裝置中，加入1 500 mL模擬溶劑20%乙醇-80%純化水（pH=2.98）在50℃下往復抽提24 h，所得溶液為溶出液。對溶出液進行高效液相色譜（HPLC）法分析和氣相色譜-質譜（GC-MS）法分析。

2.1.5不揮發性殘留物（NVR）測定

取溶出液750 mL，減壓濃縮至50 mL后，再轉移至預先恒重的稱量瓶中，于105℃干燥至恒重，測定每支濾芯的不揮發性殘留物。

2.1.6總黃酮醇苷含量及指紋圖譜測定

參照舒血寧注射液質量標準中總黃酮醇苷和指紋圖譜項下方法［8］測定。

2.2結果

2.2.1過濾前后泡點

該型號的濾芯合格泡點值為≥3 200 mbar。由表1可見，完整性均符合要求，且過濾前的相對偏差均在±5%范圍內，較穩定、可靠。

表1　過濾前后濾芯的泡點

2.2.2濾膜電鏡分析

由圖1可見，使用后濾膜表面無明顯侵蝕痕跡，膜孔徑亦無明顯變化。

圖1　使用前后濾膜的掃描電鏡對比圖

2.2.3溶出物分析

圖2　PES濾芯在模擬溶劑（20%乙醇-80%純化水，pH=2.98）中的溶出物RP-HPLC圖

HPLC分析：由圖2可知，測試用的PES濾芯在模擬溶劑（20%乙醇-80%純化水，pH=2.98）中往復抽提條件下，向溶劑體系中釋放的溶出物主要有兩種，根據濾芯生產過程中的添加成分，采用保留時間比對的方法，對這個溶出峰進行初步定性為聚乙烯吡咯烷酮（RT=1.714 min）和己內酰胺（RT=3.070 min）。由圖3可知，兩支不同批次的濾芯溶出物完全一致。

圖3　兩支不同批次濾芯的溶出物RP-HPLC圖

表2　PES濾芯在模擬溶劑（20%乙醇-80%純化水，pH=2.98）中的溶出物初步定性結果匯總表

GC-MS分析：對比空白溶劑與濾芯溶出液（10倍濃縮）GC-MS分析圖（圖4），濾芯溶出液中出現6個可辨認峰，可能的主要溶出物為己內酰胺和聚乙二醇，其中RT為10.91，13.96，16.77，19.29，21.57 min的均為聚乙二醇分子斷裂而成的化合物，即測試的主要溶出物確定為己內酰胺和聚乙二醇。

圖4　PES濾芯在模擬溶劑（20%乙醇-80%純化水，pH=2.98）中的溶出物（10倍濃縮）GC-MS分析TIC圖

為了確認在實際生產過程中溶出物濃度很低，用GC-MS再次對稀釋至工藝批量的溶出液進行分析。由圖5可見，在GC-MS分析檢測限條件下，稀釋至工藝批量的溶出液中已不存在GC-MS可檢測到的物質，即使溶出最多的己內酰胺的濃度也低于檢測限（0.01 ppm），說明實際生產中溶出物濃度很低，可忽略。

圖5　稀釋至工藝批量的溶出物GC-MS分析TIC圖

2.2.4不揮發性殘留物（NVR）

1支10英寸PES材質SPSH-SM 0.22 μm濾芯在用20%乙醇-80%純化水（pH=2.98）作為模擬溶劑時，溶出總量不會超過0.161 0 g。見表3。

表3　NVR分析結果

2.2.5總黃酮含量與指紋圖譜

由表4和圖6可知，過濾前后舒血寧注射液的總黃酮含量無顯著變化，以過濾前為標準圖譜，過濾后的指紋圖譜與過濾前的圖譜比對，其相似度分別為0.999，0.998，0.999，說明過濾時濾芯對舒血寧注射液的黃酮類成分的物質基礎無明顯影響。

表4　過濾前后舒血寧注射液總黃酮含量變化

3　討論

3.1模擬溶劑選擇

在溶出物分析時，理想情況下，最好使用實際藥液作為提取介質，但實際藥液組分對分析過程產生干擾時，應使用最接近實際產品的模型溶劑［9］。本研究中采用了模擬溶劑提取法，同樣是避免產品組分的干擾。由于舒血寧注射液的黃酮有效成分及輔料中含有羥基及多羥基醇類物質，最低的pH可達到3.0，且注射液的總固體與純化水的比例約為20∶80，因此最終模擬溶劑選擇為pH=2.98的20%乙醇-80%純化水。

3.2溶出物考察

通過采用HPLC及GC-MS方法對溶出物分析，最終初步確定，PES濾芯可能引入舒血寧注射液的成分有聚乙烯吡咯烷酮、己內酰胺和聚乙二醇，說明濾芯的清洗程序及與藥液接觸的時間及批量的重要性，均應嚴格控制，以防止濾芯溶出物的積累。

3.3不足

過濾前后指紋圖譜分析時，受大類成分分析條件的影響，本文僅針對舒血寧注射液代表的有效成分黃酮類物質進行比較，無明顯影響，而黃酮類成分僅占舒血寧注射液總固體的25%～30%，對其他固體物的影響仍需進一步研究分析。

［1］馬明巖，寧雙波，張恩春.原料藥生產除菌過濾器裝置的應用［A］.第九屆沈陽科學學術年會論文集（醫藥科學與生物技術分冊）［C］.沈陽，2012.

［2］田長峰.醫藥用濾芯可再生性研究［J］.廣東化工，2013，40（16）：64.

［3］U.S.Food and Drug Administration.FDA Guideline on Sterile Drug Products Produced by Aseptic Processing［Z］.2004.

［4］衛生部.藥品生產質量管理規范（2010年修訂）第七十四條［Z］.2011-01-17.

［5］李雪峰，李峰，劉莉莉，等.銀杏二萜內酯葡胺注射液與中性硼硅玻璃安瓿的藥物相容性試驗研究［J］.世界科學技術，2014，16（12）：2 676-2 680.

［6］張波.低硼硅玻璃安瓿、中性硼硅玻璃安瓿與碳酸氫鈉注射液之間的關系［J］.黑龍江醫藥，2012，25（3）：386-387.

［7］任傳杰，李坤娓，黃國英，等.不同棕色玻璃安瓿對鹽酸氨溴索注射液光穩定性的影響［J］.藥學研究，2015（8）：461-463.

［8］WS3-B-3707-98-2004-2012，國家食品藥品監督管理局藥品標準［S］.

［9］U.S.Food and Drug Administration.Container Closure Systems for Packaging Human Drugs and Biologics［Z］.1999.

Influence of PES Filter Cartridge on the Production Quality of Shuxuening Injection

Zhou Xiaoyu1，Sun Shengbin2，3，Chen Xiangyu3，Zhang Yanyan3，Jiang Guozhi4，Chen Zhong3，4
（1.Hebei Shineway Pharmaceutical Co.，Ltd.Langfang，Hebei，China065000；2.Hebei Engineering Research Center for TCM Injection Shijiazhuang，Hebei，China051430；3.Shineway Pharmaceutical Group Co.，Ltd.，Shijiazhuang，Hebei，China051430；4.State-Local Joint Engineering Laboratory of New Drugs Development Technology for TCM Injection Shijiazhuang，Hebei，China051430）

ObjectiveTo study the influence of PES filter cartridge on the production quality of Shuxuening Injection.M ethodsThe filter cartridge before and after filtration was conducted integrity test，SEM analysis，dissolution analysis，non volatile residue determination，and the content of total flavonoids and fingerprint of Shuxuening liquid were determined.Results and ConclusionThe PES filter of bubble point and electron micrographs showed no significant difference before and after filtration，Soluble substances that may enter the Shuxuening Injection were polyvinylpyrrolidone，caprolactam and polyethylene glycol，but they can be ignored when the process was enlarged to industrial size，the NVR of 10 inch PES filter cartridge did not exceed 0.161 0 g.There was no significant effect on total flavonoids and fingerprint of Shuxuening Injection in the filtering process.PES filter has no significant effect on the production quality of Shuxuening Injection.

PES filter cartridge；Shuxuening Injection；soluble substance；influence

TQ461；R286.0

A

1006-4931（2016）17-0025-04

國家重大新藥創制專項，項目編號：2014ZX09201022-004。

周曉雨（1984-），助理工程師，主要從事藥品質量及產業化研究，（電子信箱）448548170@qq.com；孫勝斌，工程師，主要從事藥品工藝技術、質量研究及產業化研究，本文通迅作者，（電子信箱）sunshengbin2003@ 163.com。

（2016-05-22）