干細胞移植對終末期肝病患者免疫、肝功能及相關指標的影響*

吳玉卓，楊 樂，翟玉峰，張懷宏，霍麗亞

(1.鄭州大學附屬醫院南陽市中心醫院感染科，河南南陽 473000；2.南陽醫學高等?？茖W?；A醫學部，河南南陽 473000)

干細胞移植對終末期肝病患者免疫、肝功能及相關指標的影響*

吳玉卓1，楊 樂2，翟玉峰1，張懷宏1，霍麗亞1

(1.鄭州大學附屬醫院南陽市中心醫院感染科，河南南陽 473000；2.南陽醫學高等?？茖W?；A醫學部，河南南陽 473000)

目的 探討干細胞移植對終末期肝病(ESLD)前后患者免疫、肝功能及相關指標影響。方法 選取鄭州大學附屬醫院南陽市中心醫院ESLD患者163例，隨機單盲取法分為2組，對照組81例給予常規、對癥治療，觀察組82例在對照組基礎上給予骨髓間充質干細胞(BMSC)移植，觀察兩組治療前后免疫、肝功能及甲胎球蛋白(AFP)、凝血酶原活動率(PTA)、血漿總蛋白(TP)水平變化。結果 觀察組治療后免疫功能指標CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+比值、TP、PTA水平均高于同組治療前及對照組同期(P<0.05)，AFP、丙氨酸轉氨酶(ALT)、天冬氨酸轉氨酶(AST)、總膽紅素(TBIL)均低于同組治療前及對照組同期(P<0.05)。兩組患者并發癥發生率比較，差異無統計學意義(P>0.05)。結論 BMSC移植治療ESLD，可改善患者免疫功能，提高肝功能，降低AFP水平。

骨髓；間質干細胞移植；終末期肝??；免疫功能；肝功能；甲胎蛋白類；血漿總蛋白；凝血酶原活動率

終末期肝病(end-stage liver disease,ESLD)即肝硬化，是由各種病因長期作用于肝臟，使肝臟出現再生結節和假小葉改變，嚴重影響肝臟功能，且可促使門靜脈發生高壓，易引發肝性腦病及消化道大出血，危及患者生命健康[1]。臨床多給予常規對癥支持治療，但療效甚微，無法逆轉疾病進程。隨著干細胞移植技術的深入研究，發現干細胞具有自我更新、繁殖、分化及擴增等潛能，且應用于臨床均取得滿意效果。骨髓間充質干細胞(BMSC)是臨床最早發現的具有多向分化潛能的干細胞，且具有獨特的免疫調控功能[2]。為進一步研究BMSC在ESLD臨床效果及對免疫功能的影響，現將采用BMSC移植治療82例肝硬化患者的效果，報道如下。

1 資料與方法

表1 兩組患者治療前后免疫指標比較±s)

a：P<0.05，與治療前比較；b：P<0.05，與對照組治療后比較。

1.1 一般資料 收集鄭州大學附屬醫院南陽市中心醫院2014年1月至2015年1月收治的ESLD患者163例，患者均經肝臟增強CT等檢查確診，均有不同程度乏力、食欲缺乏、腹脹、下肢水腫及脾臟腫大等臨床癥狀及體征，符合《實用內科學》相關診斷標準[3]。符合干細胞移植治療要求，經研究說明，患者均自愿參加本次研究，并簽訂知情同意書。肝功能Child-Pugh評分(12.59±2.37)分，1年內未經干擾素及激素療法治療，經本院醫學倫理委員會審批同意?；颊呔懦闻K腫瘤、嚴重心肺功能疾病、惡性病變患者，排除合并肝腎綜合征、肝性腦病及對本次研究指標有影響的其他疾病。隨機單盲取法分為2組，觀察組82例，年齡(48.75±2.66)歲，男50例，女32例，其中乙型肝炎23例，酒精性肝炎21例，丙型肝炎20例，自身免疫性肝炎18例；Child-Pugh評分B級46例，C級36例；對照組81例，年齡(48.72±2.69)歲，男48例，女33例，其中乙型肝炎26例，酒精性肝炎19例，丙型肝炎22例，自身免疫性肝炎14例；Child-Pugh評分B級42例，C級39例。兩組患者年齡、性病、病因等臨床資料對比，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 治療方法 對照組患者僅給予常規、對癥治療，均給予核苷類抗病毒藥物阿德福韋酯膠囊(商品名：阿迪仙；批準文號：國藥準字H20070123；廠家：珠海聯邦制藥股份有限公司中山分公司；規格：10mg/粒)抗病毒治療，1粒/次，每天1次，連用24周。同時給予飲食調理、注意休息及對癥治療。觀察組在對照組基礎上給予BMSC移植治療，BMSC抽取位置為髂后上棘，抽取量約180 mL左右，進行分離、純化及檢測后4 ℃冰箱保存備用。移植穿刺點為股動脈，肝臟血管造影后經置管注入促肝細胞生長素150 μg及備用干細胞，撤管并加壓包扎穿刺點，術后制動8 h。

1.2.2 觀察指標 兩組患者均于治療前及治療后8周抽取肘靜脈空腹靜脈血5 mL送檢，由同組醫護采集血液標本及送檢，并由同組檢驗醫師完成檢查項目。檢查項目包括：免疫指標(CD3+、CD4+、CD8+并計算CD4+/CD8+比值)、血清甲胚球蛋白(AFP)、肝功能指標[丙氨酸轉氨酶(ALT)、天冬氨酸轉氨酶(AST)、總膽紅素(TBIL)]、血漿總蛋白(TP)及凝血酶原活動率(PTA)。

2 結 果

2.1 兩組患者治療前后免疫功能比較 兩組患者治療前各項免疫指標比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，治療后各項免疫指標與同組治療前比較，差異均有統計學意義(P<0.05)，兩組患者治療后各項免疫指標比較，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

2.2 兩組患者治療前后血清AFP水平比較 兩組患者治療前AFP比較，差異無統計學意義(P>0.05)；治療后與同組治療前比較，差異有統計學意義(P<0.05)，兩組患者治療后AFP比較，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 兩組患者治療前后血清AFP水平比較

a：P<0.05，與治療前比較；b：P<0.05，與對照組治療后比較。

2.3 兩組患者治療前后肝功能及凝血功能指標水平比較 治療前兩組患者ALT、AST、TBIL、TP、PTA水平比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，治療后ALT、AST、TBIL、PTA與同組治療前比較比，差異有統計學意義(P<0.05)，觀察組治療后TP與同組治療前比較，差異有統計學意義(P<0.05)，觀察組治療后ALT、AST、TBIL、TP、PTA與對照組比較差異有統計學意義(P>0.05)，見表3。

表3 兩組患者治療前后肝功能及凝血功能指標比較±s)

a：P<0.05，與治療前比較；b：P<0.05，與對照組治療后比較。

2.4 兩組患者不良反應比較 兩組治療期間均未見大出血、休克及感染等嚴重不良反應。觀察組有3例胃腸反應；對照組有2例胃腸反應，2例發熱患者，均給予對癥治療好轉。兩組患者并發癥發生率比較，差異無統計學意義(χ2=0.162，P>0.05)。

3 討 論

ESLD引發原因較多，最終可因低蛋白血癥、凝血功能障礙等并發癥導致患者死亡，部分患者可形成肝惡性病變[4]。傳統觀點認為ESLD不可逆轉，隨著研究深入，已證實ESLD受嚴重度影響，但均有一定“回歸”[5]。臨床研究證實，ESLD患者存在一定免疫功能損害，其引發原因可能為肝纖維化產生大量炎性因子及自由基等，加重肝功能損害進程，同時可造成凝血功能損害及肝臟惡變可能[6-7]。故研究ESLD患者免疫功能、肝功能、AFP及凝血功能對疾病的治療具有指導意義，可反映患者預后。

干細胞自我復制、多向分化等潛能已廣泛用于受損嚴重組織、器官修復[8-9]。BMSC是干細胞的一種，肝內特定條件下可分化為肝臟細胞，完成肝臟組織修復與重建，是ESLD治療的新途徑[10]。BMSC移植技術具有操作簡單，移植途徑相對較多，其中以經門靜脈及肝動脈途徑進入肝臟干細胞數量最多，故成為臨床常用途徑[11-12]。

本研究結果顯示，BMSC對免疫指標具有改善作用?；加懈尾『?，CD8+水平相對增高，可產生大量代謝產物，促使肝細胞受損加重，逐漸形成ESLD[13]。干細胞移植后，干細胞復制或繁殖為肝細胞，促進固有肝細胞修復功能。同期可對免疫細胞具有調控作用，促進免疫細胞增殖及成熟，促使CD3+總量提高，促使CD4+及CD8+水平恢復動態平衡，“校正”CD4+/CD8+比值，從而達到改善免疫作用[14]。免疫功能改善，阻斷CD8+對肝組織繼續損害，可促進γ干擾素及生長因子分泌，促進固有肝細胞修復，從而使肝功能恢復。本研究觀察組治療后肝功能指標均高于同組治療前及對照組治療后(P<0.05)。表明BMSC具有促進及修復肝功能作用。張超等[15]研究顯示，骨髓干細胞對血液系統及降低肝性腦病、肝腎綜合征及消化道出血療效欠佳。但本研究結果顯示，觀察組治療后TP、PTA水平均高于同組治療前及對照組治療后(P<0.05)。與其研究結果不符，可能為常規、對癥治療導致，有待于進一步研究。但也可說明常規、對癥治療在ESLD中仍有一定治療價值，可改善患者凝血及造血功能等。

AFP在肝臟受損過程中，卵圓細胞、增生細胞細胞質內可產生AFP。形成肝癌后，肝癌細胞也可產生。故AFP水平可反映ESLD發生、發展過程，也可反映疾病治療情況。本研究觀察組治療后AFP水平低于同組治療前及對照組治療后(P<0.05)，表明BMSC移植治療ESLD可促使其“回歸”。

綜上所述，BMSC移植治療ESLD，可改善患者免疫功能，提高肝功能，降低AFP水平。

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Effects of stem cells transplantation on immune function,liver function and related indexes in patients with end-stage liver disease*

WuYuzhuo1,YangLe2,ZhaiYufeng1,ZhangHuaihong1,HuoLiya1

(1.DepartmentofInfection,NanyangMunicipalCentralHospital,AffiliatedHospitalofZhengzhouUniversity,Nanyang,Henan473000,China;2DepartmentofBasicMedicine,NanyangMedicalCollege,Nanyang,Henan473000,China)

Objective To investigate the effect of stem cells transplantation on immune function,liver function and related indexes in the patients with end-stage liver disease(ESLD).Methods A total of 163 cases of ESLD in Nanyang Municipal Central Hospital of Affiliated Hospital of Zhengzhou University were selected and divided into 2 groups by the randomized single blind method.Eighty-one cases in the control group were given the conventional symptomatic treatment,while 82 cases in the observation group

bone marrow mesenchymal stem cell(BMSC) transplantation based on the control group.The changes of immune function,liver function,alpha fetoprotein(AFP),rate of prothrombin activity(PTA) and plasma total protein(TP) level before and after treatment were observed in the two groups.Results The immune function indexes CD3+,CD4+,CD8+,CD4+/CD8+,TP and PTA levels after treatment in the observation group were significantly higher than those before treatment and in the control group(P<0.05),while the levels of AFP,alanine aminotransferase(ALT),aspartate aminotransferase(AST) and total bilirubin(TBIL) were lower than those before treatment in the same group and the control group(P<0.05).There was no statistically significant difference in complication occurrence rate between the two groups(P>0.05).Conclusion BMSC transplantation for treating ESLD can improve the immune function,improves the liver function and reduces the AFP level.

bone marrow;end-stage liver disease;mesenchymal stem cell transplantation;immune function;liver function;alpha-fetoproteins;plasma total protein;prothrombin activity rate

河南省衛生廳科研成果項目[宛科鑒字(2012)第103號99]。 作者簡介：吳玉卓(1977-)，副主任醫師，碩士研究生，主要從事各種肝病及感染性疾病的發病機制及診治研究。

0.3969/j.issn.1671-8348.2017.18.015

R575.3

A

1671-8348(2017)18-2492-03

2017-01-08

2017-03-06)