漾濞泡核桃青皮中二芳基庚烷類成分研究

李冬梅++彭友倫++劉光明

[摘要]綜合運用硅膠、Sephadex LH20、MCI等柱色譜方法對漾濞泡核桃青皮的乙酸乙酯部位化學成分進行了研究，并利用各種波譜技術（MS，1HNMR，13CNMR，2DNMR）對化合物結構進行了鑒定。結果從乙酸乙酯部位分離得到4個二芳基庚烷類化合物，分別鑒定為：二氫楓楊素（1），1（4′羥基苯基）7（3″甲氧基苯基） 3′，4″環氧3α庚醇（2），楓楊素（3）和1（4′羥基苯基）7（3″甲氧基4″羥基苯基）3α庚醇（4）。其中，化合物1（二氫楓楊素，dihydropterocarine）為新化合物，化合物2～4首次從該植物中分離得到。

[關鍵詞]泡核桃；青皮；化學成分；二芳基庚烷類

Study on diarylheptanoids from green peel of Juglans sigillata

LI Dongmei*， PENG Youlun， LIU Guangming

（College of Pharmacy and Chemistry， Dali University， Dali 671000， China）

[Abstract]The chemical constituents from green peel of Juglans sigillata were isolated by column chomatographies over silica gel， Sephadex LH20， and MCI. Four diarylheptanoids were isolated and their structures were characterized as dihydropterocarine（1）， 3′，4″epoxy1（4′hydroxyphenyl）7（3″methoxylphenyl）heptan3αol（2）， pterocarine（3）， and 1（4′hydroxyphenyl）7（3″methoxy4″hydroxyphenyl）heptan3αol（4） Compound 1 is a new compound， named as dihydropterocarine Compounds 24 were isolated from the plant of J. sigillata for the first time.

[Key words]Juglans sigillata； green peel； chemical constituents； diarylheptanoids

泡核桃Juglans sigillata D系胡桃科胡桃屬植物，又名茶核桃（云南）、鐵核桃，產于云南、貴州、四川西部、西藏雅魯藏布江中下游。胡桃屬植物具有悠久的藥用歷史，胡桃楸青皮始載于宋《開寶本草》，后各代醫家多以其清熱解毒、祛風療癬、止痛止痢等功效入藥。核桃青皮又名青龍衣，為胡桃科植物的青果皮，未成熟時包裹在果實核外，果實成熟后自然脫落并變為褐色[12]。目前漾濞泡核桃青皮的研究報道相對較少，主要是對其化學成分及揮發性成分進行了研究[3 4]。漾濞泡核桃在大理州種植面積較廣，泡核桃青皮產量較高、資源豐富，對其進行研究，可為進一步開發和利用該植物資源提供科學依據。

二芳基庚烷類化合物普遍存在于胡桃屬植物中，是胡桃屬植物中一類重要的抗腫瘤活性成分[58]。該類化合物的結構特點為：2個特征性很強的芳香環與七碳線型長鏈相連。根據其化學結構特點可分為3種結構亞類：即線型二芳基庚烷（Ⅰ型）、大環二芳基庚烷（Ⅱ型）和大環二芳基環氧庚烷（Ⅲ型），在胡桃屬植物中目前發現的二芳基庚烷類主要為Ⅰ型和Ⅲ型[89]。

本課題組主要對漾濞泡核桃青皮乙酸乙酯部位的化學成分進行了研究，從中分離得到4 個二芳基庚烷類化合物，分別鑒定為：二氫楓楊素（1），1（4′羥基苯基）7（3″甲氧基苯基） 3′，4″環氧3α庚醇（2），楓楊素（3）和1（4′羥基苯基）7（3″甲氧基4″羥基苯基）3α庚醇（4）。其中，化合物1（二氫楓楊素，dihydropterocarine）為新化合物，化合物2～4為首次從該植物中分離得到，見圖1。

1材料

梅特勒1/1萬電子分析天平；旋轉蒸發儀（BUCHI Rotavapor R210）；低溫冷卻循環泵（鞏義市予華儀器有限公司）；Sephadex LH20（Amersham Biosciences，Sweden）；MCIgel CHP20P（日本三菱化學公司）。所用試劑除石油醚、氯仿、丙酮、乙酸乙酯、甲醇為工業純，經重蒸后使用外，其余均為分析純。

實驗用漾濞泡核桃青皮采自云南省大理州漾濞縣，經大理大學藥學與化學學院生藥教研室周濃副教授鑒定為胡桃科胡桃屬植物泡核桃J sigillata的青皮，樣品標本保存于大理大學藥學與化學學院有機藥化教研室。

2提取與分離

干燥泡核桃青皮 10 kg，粉碎后用75%甲醇加熱回流提取2次，每次2 h，提取液經減壓濃縮后得到浸膏856 g。浸膏經硅膠柱色譜，依次用石油醚、乙酸乙酯和甲醇洗脫并分別回收溶劑，得到乙酸乙酯部位浸膏960 g。乙酸乙酯部位浸膏經丙酮溶解后，用2倍量硅膠拌樣，20倍量硅膠（200～300目）裝柱進行柱色譜，氯仿甲醇（20∶1～2∶1）梯度洗脫，洗脫液經TLC檢測后合并相似組分，得P1～P10共10個組分。其中P2（123 g），經MCI柱色譜，50%～100%甲醇梯度洗脫并收集各個流分，經TLC檢測后合并相似流分，得P21～P28共8個組分，其中P26經反復硅膠柱色譜，石油醚乙酸乙酯（10∶1～1∶1）梯度洗脫，分離得到化合物1（510 mg）和化合物2（151 mg）。P25經硅膠柱色譜，氯仿甲醇（20∶1～5∶1）梯度洗脫，洗脫液經TLC檢測后合并相似組分，得P251～P257共7個組分，其中P252經硅膠柱色譜，石油醚乙酸乙酯（10∶1～1∶1）梯度洗脫，再經Sephadex LH20柱色譜（氯仿甲醇 1∶1）得化合物3（54 mg）。P253經硅膠柱色譜，石油醚乙酸乙酯（10∶1～1∶1）梯度洗脫，分離得到化合物4（65 mg）。endprint

3結構鑒定

化合物1白色粉末，HRESIMS m/z 315151 5[M+H]+，分子式為C19H22O4。UV光譜在2825，2035 nm處有最大吸收，[α]163D-111（c 021，MeOH），IR譜提示有羥基（3 438，1 267 cm-1），苯環（2 929，1 598，1 514，1 503，1 500 cm-1）。10%硫酸乙醇溶液TLC顯色呈灰色。在化合物1的1HNMR譜（CD3COCD3）中，根據氫原子峰的裂分情況及偶合常數，推斷化合物1結構中含有2個1，3，4三取代苯環[ δH：563（1H，d，J =18 Hz），658（1H，d，J=80 Hz），643[（1H，dd，J=80，18 Hz）]和[（δH：673（1H，d，J=18 Hz），685（1H，d，J=80 Hz），669（1H，dd，J=80，18 Hz）]。另外，在13CNMR和DEPT譜中，觀測到有12個芳香碳原子信號（δC 110～150），6個亞甲基碳原子信號（δC 20～40）和1個叔碳原子信號（δC 717），分析13CNMR 和 DEPT 譜可知，化合物1結構中含有2個苯環，6個CH2和1個連氧叔碳原子，從而推測化合物1為二芳基庚烷類化合物?；衔?的波譜數據與文獻[1011]報道的楓楊素對照發現，主要區別在于楓楊素中δ 210左右的羰基碳原子信號消失，而出現了1個δ 717的叔碳原子信號，因此該化合物應為楓楊素的還原產物，通過對化合物1的HSQC和HMBC分析，見圖2，進一步證明了該化合物的結構為楓楊素3羰基的還原產物。

通過與已知化合物3′，4″epoxy1（4′hydroxyphenyl）7（3″methoxylphenyl）heptane3hydroxy[6]對比發現，該已知化合物與化合物1的區別僅僅只在C3″上的取代情況不同，化合物1的C3″上為羥基取代，而已知化合物3′，4″epoxy1（4′hydroxyphenyl）7（3″methoxylphenyl）heptane3hydroxy的C3″為甲氧基取代。同時，該已知化合物和化合物1的結構中都只存在1個手性碳原子，即C3的立體構型決定了2個化合物的絕對構型。該已知化合物

的旋光度為[α]25D-3907（c 024，MeOH），而化合物1的旋光度為[α]163D-111（c 021，MeOH），二者均為左旋光性，因此推斷化合物1的絕對構型與已知化合物相同，即為R構型，3位為αOH。因此，將其結構鑒定為：（R）1（4′羥基苯基）7（3″羥基苯基）3′，4″環氧3α庚醇，并將其命名為二氫楓楊素（dihydropterocarine）。同時，通過對化合物1的HSQC和HMBC分析，見圖2，對化合物1的波譜數據進行了歸屬，其波譜數據見表1。

化合物2淺黃色油狀物，EIMS m/z 328 [M]+，分子式為C20H24O4。1HNMR（CDCl3，400 MHz）δ：285，281（2H，ddd，J=22，96，164 Hz，H1），143（2H，m，H2），320（1H，m，H3），182，145（2H，m，H4），150（2H，m，H5），196（ 2H，m，H6），282，251（2H，m，H7），562（1H，d，J=20 Hz，H2′ ），667（1H，d，J=80 Hz，H5′），656（1H，dd，J=20，80 Hz，H6′），696（1H，d，J=20 Hz，H2″），703（1H，d，J=80 Hz，H5″），688（1H，dd，J=20，80 Hz，H6″），373（3H，s，3″OCH3），562（1H，br s，4′OH）。13CNMR（CDCl3，100 MHz）δ：282（C1），419（C2），78 4（C3），434（C4），201（C5），287（C6），363（C7），1339（C1′），1126（C2′），1479（C3′），1431（C4′），1152（C5′），1221（C6′），1402（C1″），1150（C2″），1524（C3″），1427（C4″），1240（C5″），1220（C6″），562（3″OCH3）。以上波譜數據與文獻報道的3′，4″epoxy1（4′hydroxyphenyl）7（3″methoxylphenyl）heptane3hydroxy[6，10]對比，故化合物2鑒定為1（4′羥基苯基）7（3″甲氧基苯基） 3′，4″環氧3α庚醇。

化合物3白色粉末，EIMS m/z 312 [M]+，分子式為C19H20O4。根據化合物3的DEPT譜可知含有2個苯環，6個CH2和1個羰基碳，推斷該化合物為二芳基庚烷類化合物。1HNMR（CD3COCD3，400 MHz）δ：266（2H，m，H1），215（2H，t，J=16 Hz，H2），173（2H，m，H4），137（2H，m，H5），146（2H，m，H6），253（2H，m，H7），545（1H，d，J=15 Hz，H2′），671（1H，d，J=81 Hz，H5′），642（1H，dd，J=80，15 Hz，H6′），678（1H，d，J=16 Hz，H2″），660（1H，dd，J=80，18 Hz，H5″），668（1H，dd，J=80，16 Hz，H6″）。13CNMR（CD3COCD3，100 MHz）δ：278（C1），412（C2），2098（C3），468（C4），194（C5），278（C6），361（C7），1340（C1′），1133（C2′），1489（C3′），1447（C4′），1160（C5′），1223（C6′），1408（C1″），1183（C2″），1490（C3″），1410（C4″），1236（C5″），1225（C6″）。以上波譜數據與文獻報道的楓楊素[11]對比，故化合物3鑒定為1（4′羥基苯基）7（3″羥基苯基）3′，4″環氧3庚酮，即楓楊素（pterocarine）。endprint

化合物4白色粉末，EIMS m/z 33018[M] +，分子式為C20H26O4。1HNMR（CD3COCD3，400 MHz）δ：263（2H，m，H1），335（1H，m，H3），252（2H，t，J=75 Hz，H7），166143（8H，m，H2，4，6，5），702（2H，d，J=84 Hz，H2′，6′），674（2H，d，J=84 Hz，H3′，5′），679（1H，d，J=18 Hz，H2″），671（1H，d，J=80 Hz，H5″），662（1H，dd，J=80，18 Hz，H6″），379（3H，s，3″OCH3）。13CNMR（CD3COCD，100 MHz）δ：319（C1），407（C2），708（C3），382（C4），261（C5），328（C6），362（C7），1349（C1′），1301（C2′），1159（C3′），1563（C4′），1159（C5′），1301（C6′），1342（C1″），1129（C2″），1482（C3″），1454（C4″），1156（C5″），1215（C6″），562（3″OCH3）。以上波譜數據與文獻[12]報道的1（4′hydroxyphenyl）7（3″methoxy4″hydroxyphenyl）heptane3αhydroxy對比，故化合物4鑒定為1（4′羥基苯基）7（3″甲氧基4″羥基苯基）3α庚醇。

漾濞泡核桃青皮具有豐富的植物資源，本課題組從漾濞泡核桃青皮的乙酸乙酯部位分離得到4個二芳基庚烷類化合物，二芳基庚烷類化合物是胡桃屬植物中一類重要的抗腫瘤活性成分。本研究將為漾濞泡核桃青皮的進一步抗腫瘤活性研究奠定物質基礎。

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[責任編輯丁廣治]endprint