不同免疫檢驗方法檢測乙肝病毒感染血清標志物的對比評價

張軼

[摘要] 目的 探討不同免疫檢驗方法檢測乙肝病毒感染血清標志物的效果差異性。方法 方便選擇2016年8月—2017年8月間該院收治的80例乙肝病毒感染患者實施觀察研究，對所有患者均實施電化學發光法、酶聯免疫吸附法檢測，分析總結兩種免疫檢測方式對患者血清標志物（表面抗原HBsAg、表面抗體HBsAb、e抗原HBeAg、e抗體HBeAb、核心抗體HBcAb）檢測結果差異性。結果 電化學發光法檢測HBsAg、HBeAg、HBeAb陽性率70.0%、31.3%、28.8%較酶聯免疫吸附法52.5%、17.5%、15.0%相比明顯升高（P=0.023、0.043、0.035）。電化學發光法檢測HBsAb、HBcAb陽性率17.5%、72.5%較酶聯免疫吸附法15.0%、70.0%相比差異無統計學意義（P=0.668、0.727）。實施電化學發光法對乙肝病毒感染診斷準確率97.5%較酶聯免疫吸附法檢測準確率83.8%明顯較高（P=0.003）。結論 免疫檢驗方法中電化學發光法檢測乙肝病毒感染血清標志物效果優于酶聯免疫吸附法。

[關鍵詞] 免疫檢驗；電化學發光法；酶聯免疫吸附法；乙肝病毒感染；血清標志物

[中圖分類號] R5 [文獻標識碼] A [文章編號] 1674-0742（2017）12（c）-0035-03

[Abstract] Objective This paper tries to investigate the difference clinic effect of different immunoassay methods in detecting serum markers of hepatitis B virus infection. Methods 80 patients with hepatitis B virus infection were convenient selected from August 2016 to August 2017 in this department. All patients were examined by electrochemiluminescence and enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， and the results of two immunoassay methods Patient serum markers （surface antigen HBsAg， surface antibody HBsAb， e-antigen HBeAg， e-antibody HBeAb， core antibody HBcAb） test results differences. Results The positive rates of HBsAg， HBeAg and HBeAb by electrochemiluminescence were 70.0%， 31.3% and 28.8%， respectively， which were significantly higher than those by enzyme-linked immunosorbent assay of 52.5%， 17.5% and 15.0% （P=0.023， 0.043， 0.035）. The positive rate of HBsAb and HBcAb detected by electrochemiluminescence was 17.5%， 72.5% compared with 15.0% and 70.0% of enzyme-linked immunosorbent assay （P=0.668， 0.727）. The diagnostic accuracy of electrochemiluminescence assay for hepatitis B virus infection was 97.5%， which was significantly higher than that of enzyme-linked immunosorbent assay （83.8%） （P=0.003）. Conclusion Immunoassay method in the detection of hepatitis B virus infection by electrochemiluminescence method serum markers better than enzyme-linked immunosorbent assay.

[Key words] Immunoassay； Electrochemiluminescence； Enzyme-linked immunosorbent assay； Hepatitis B virus infection； Serum markers

乙肝病毒感染是引起引發乙型病毒性肝炎、肝硬化、肝癌的重要因素，嚴重威脅患者生命安全。加強對乙肝病毒感染的早期診斷，及時確定患者感染狀況是防治乙型病毒性肝炎的關鍵。乙肝病毒感染血清標志物檢測是了解乙肝病毒感染后機體免疫過程的重要指標，也是當前臨床了解乙肝病毒感染的重要檢測方式[1]。目前臨床檢測乙肝病毒感染血清標志物的方式主要分為電化學發光法和酶聯免疫吸附法。但臨床對于上述兩種檢查方式的選擇仍存在一定爭議?；谝陨显?，對2016年8月—2017年8月間該院收治的80例乙肝病毒感染患者均實施了電化學發光法和酶聯免疫吸附法檢測患者血清標志物狀況，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選擇該院收治的80例乙肝病毒感染患者實施觀察研究?；颊咧泻心?8例，女32例；患者年齡跨度20～76歲，平均年齡（45.3±9.5）。納入標準：實施臨床檢測、病毒檢測等確診為乙肝病毒感染患者；自愿簽署知情同意書患者；研究過程經醫院倫理委員會批準。排除標準：其他病毒性感染患者；惡性腫瘤性疾病、嚴重心肺腎功能損傷患者；妊娠、哺乳狀態患者；其他類型肝炎及肝病患者；精神障礙患者；不配合檢查患者。endprint

1.2 方法

對所有患者均實施電化學發光法、酶聯免疫吸附法檢測乙肝病毒感染血清標志物（表面抗原HBsAg、表面抗體HBsAb、e抗原HBeAg、e抗體HBeAb、核心抗體HBcAb）狀況。采集患者清晨空腹狀態靜脈血5 mL，分置于兩支試管，常規離心分離，轉速為3 000 r/min，5 min后取血清實施檢查。電化學發光法：使用全自動化學發光免疫分析儀及配套檢測試劑實施檢查，實施電化學發光法檢測。酶聯免疫吸附法檢測：使用AWARENESS酶標儀酶標儀及相關試劑盒實施檢查，行酶聯免疫吸附法檢測。所有檢測過程均參照器械使用說明書及試劑盒使用說明書實施，使用定值參比血清進行質控。

1.3 觀察指標

（1）分析總結兩種免疫檢測方式對患者血清標志物檢測結果差異性。（2）分析總結兩種免疫檢測方式對患者乙肝病毒感染檢測準確性。檢測結果陽性標準為：①電化學發光法：HBsAg陽性：檢測水平>0.05 IU/mL；HBsAb陽性：檢測水平>10 IU/mL；HBeAg陽性：標本相對光強度/臨界相對光強度水平≥1.0；HBeAb陽性：標本相對光強度/臨界相對光強度水平≤1.0；HBcAb陽性：標本相對光強度/臨界相對光強度水平≥1.0。②酶聯免疫吸附法：HBsAg陽性：標本相對光強度/臨界相對光強度水平≥1.0；HBsAb陽性：標本相對光強度/臨界相對光強度水平≥1.0；HBeAg陽性：標本相對光強度/臨界相對光強度水平≥1.0；HBeAb陽性：標本相對光強度/臨界相對光強度水平≤1.0；HBcAb陽性：標本相對光強度/臨界相對光強度水平≤1.0[2]。

1.4 統計方法

用SPSS 20.0統計學軟件處理數據，用[n（%）]表示檢測陽性率及準確率，χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種免疫檢測方式對患者血清標志物測結果差異性分析

電化學發光法檢測HBsAg、HBeAg、HBeAb陽性率較酶聯免疫吸附法相比明顯升高（P<0.05）。電化學發光法檢測HBsAb、HBcAb陽性率較酶聯免疫吸附法相比差異無統計學意義（P>0.05）。詳見下表1。

2.2 兩種免疫檢測方式對患者乙肝病毒感染檢測準確性分析

實施電化學發光法檢測確診存在乙肝病毒感染78例，實施酶聯免疫吸附法檢測確診存在乙肝病毒感染67例。實施電化學發光法對乙肝病毒感染診斷準確率97.5%較酶聯免疫吸附法檢測準確率83.8%明顯較高，差異有統計學意義（χ2=8.901，P=0.003）。

3 討論

乙肝病毒感染是導致乙型肝炎發生的主要原因。乙肝病毒屬于DNA病毒，為嗜肝DNA病毒科，其耐熱、耐低溫、耐紫外線能力較強，治療難度較大，當乙肝病毒侵入機體后，將攻擊機體肝臟，并在肝細胞內定植、繁殖、復制，引起肝細胞損傷，誘發乙型肝炎發生。且臨床研究顯示乙肝病毒還具有泛酸性，其對于胃黏膜細胞、胰腺細胞、膽管上皮細胞、腎小管細胞等相關細胞也具有一定損傷作用，影響患者生命安全。加強對乙肝病毒感染的早期診斷，及時對患者進行針對性抗病毒治療是控制患者肝損傷狀況，積極預防肝硬化及肝癌發生的關鍵。

乙肝病毒血清標志物是了解機體免疫反應的重要指標。HbsAg是乙肝病毒外殼蛋白，其本身不具備傳染性，乙肝病毒感染后HbsAg水平將明顯升高。HbsAg是乙肝病毒感染的重要標志，可在一個病毒感染后1～2周內出現，并在感染2～6個月明顯升高，部分患者可表現為持續性陽性狀態。HBsAb是在HBsAg刺激下產生的相應抗體，可與HBsAg結合，并與其他免疫過程共同清除乙肝病毒，控制機體乙肝病毒感染狀況。HBsAb是中和抗體，可反映乙肝病毒感染后機體免疫反應狀況，當HBsAb明顯升高時，提示機體在乙肝病毒感染后已經出現免疫力，其多在血清HBsAg轉陰后2周左右才能在血清中檢出。HBeAg是乙肝病毒核心顆粒中的可溶性蛋白質，存在于HBcAg內，多在HBcAg裂解后溶入血清，HBeAg多在HbsAg出現時間與消失時間之間出現，是乙肝病毒感染的重要指標，HBeAg陽性時表示患者具有高傳染性，處于病情活動期。HBeAb是因HBeAg刺激產生的相應抗體，其對機體無保護作用，HBeAb的出現表示乙肝病毒復制過程相對靜止，患者病情得到控制，傳染性較低。HBcAb是乙型肝炎核心抗原刺激肝細胞產生的免疫球蛋白，其本身對機體無保護作用，HBcAb的出現反映了乙肝病毒復制活躍度狀況，其水平越高表示患者傳染性越強。HBcAb可持續數十年甚至終身陽性[3-4]。因此，及時了解患者乙肝病毒血清標志物狀況是了解患者病情狀態及機體免疫狀況的重要指標。

電化學發光免疫法與酶聯免疫吸附法是目前臨床檢測血清學指標的常用方法。酶聯免疫吸附法是將受檢標本與酶標抗原及抗體在不同步驟下與固相載體表面抗原及抗體發生特定反應，通過酶與底物出現的特定顏色反應實施定量檢測的檢測方式[5]。該檢測方式不僅可用于抗原測定，還可用于抗體測定，其檢測過程較為簡單，檢測成本較低，臨床應用較為廣泛。電化學發光法是利用化學檢測中待測物濃度與體系化學發光強度在一定條件下表現為線性定量關系，通過儀器檢測體系電化學發光強度，進而確定待測物含量的檢測方式[6]。實施電化學發光法檢測時診斷范圍較廣，操作較為簡單，操作時間較短，優勢較多。在殷蓓琦等人[7]的相關研究中，對酶聯免疫法、免疫膠體金法、電化學發光免疫分析法3種檢測方式的效果實施了分析，結果顯示電化學發光免疫分析法敏感性最高，達96.0%，其次為酶聯免疫法80.0%，免疫膠體金法最低，為72.0%。該研究中電化學發光法對乙肝病毒感染診斷準確率97.5%也較酶聯免疫吸附法83.8%更高，2種研究結果相符。該研究中電化學發光法檢測HBsAg、HBeAg、HBeAb陽性率及乙肝病毒感染診斷準確率較酶聯免疫吸附法相比明顯升高（P<0.05）。分析原因是，實施酶聯免疫吸附法檢測時，檢測結果受試劑質量、保存過程等因素影響，穩定性較差，且酶聯免疫吸附法只能進行定量檢測，極易出現誤診和漏診。實施電化學發光法檢測可減少上述因素的影響，且檢查過程重復性高，可將免疫測定與電化學發光原理結合，達到良好的定量檢測效果，減少漏診和誤診[8-9]。

綜上所述，免疫檢驗方法中電化學發光法檢測乙肝病毒感染血清標志物效果優于酶聯免疫吸附法，運用價值更高。

[參考文獻]

[1] 吳淑霞，范軍，張儉，等.兩種方法檢測乙型肝炎病毒血清標志物結果分析[J].寧夏醫科大學學報，2015，37（3）：344-346.

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[3] 安靜娜，李冬冬，陳其霞，等.電化學發光免疫法與酶聯免疫吸附法檢測乙型肝炎病毒血清標志物的結果分析[J].中國輸血雜志，2015，28（4）：374-376.

[4] 盧婷，李發科，羅杰，等.酶聯免疫吸附試驗檢測乙型肝炎病毒血清學標志物的性能評價[J].檢驗醫學與臨床，2015（5）：582-584.

[5] 楊梅，晏紅.化學發光免疫分析法檢測乙肝病毒感染性標志物的臨床應用[J].標記免疫分析與臨床，2016，23（4）：448-450.

[6] 鮑春，陳德黎，王秀華，等.兒童乙型肝炎病毒疫苗免疫效果監測及強化免疫最小年齡探討[J].實用預防醫學，2017，24（4）：394-396.

[7] 殷蓓琦，黃秋芳.三種不同免疫檢測法對乙肝血清學標志物檢測的結果對比分析[J].標記免疫分析與臨床，2017，24（6）：682-685.

[8] 潘煥，張貴萍，陸韋，等.學齡兒童體檢乙型肝炎病毒血清標志物檢測結果分析[J].中華醫院感染學雜志，2016，26（18）：4237-4239.

[9] 何英愛，姚葉林，劉見歡，等.兩種方法測定乙型肝炎病毒血清標志物的比較研究[J].檢驗醫學與臨床，2016，13（z2）：123-125.

（收稿日期：2017-09-24）endprint