蘭州市健康人群小而密低密度脂蛋白膽固醇生物參考區間的建立*

吳 燕，何津春，朱槿宏，周珊珊，楊 波，武鳳儀

(1.蘭州大學第一醫院檢驗科，甘肅蘭州 730000；2.河北省兒童醫院檢驗科，河北石家莊 050000；3.蘭州大學第一臨床醫學院，甘肅蘭州 730000)

中國的成人血脂異常已經達到4.5億人，總體患病率為40.4%，與2002年比較大幅度上升[1]。人群血清膽固醇水平的升高將會導致2010-2030年我國心血管事件增加約920萬件。大量的研究證明，血脂異常與心腦血管疾病發病率密切相關，有效預防和控制血脂水平異?？墒蛊浒l病率減少50%～70%[2-3]，近5年來，心腦血管疾病病死率已穩居首位，有效預防和控制血脂異?？滩蝗菥?，其意義非常重大。小而密低密度脂蛋白膽固醇(sd LDL-C)是一個較新的血脂指標，近來研究發現，與普通低密度脂蛋白(LDL)相比，sd LDL-C致動脈粥樣硬化能力更強，已被美國膽固醇教育計劃(NCEP)委員會成人治療組列入新發現的重要心血管病危險因素之一。但是蘭州本地區的sd LDL-C基線水平不明，因此，本研究旨在探討蘭州市健康人群sd LDL-C的生物參考區間[4]。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年12月1日至2017年11月1日在蘭州大學第一醫院體檢中心體檢項目全部合格且實驗室檢查均無異常的健康人群562例作為研究對象，研究對象經過血清學檢查、詢問病史、心電圖、超聲波檢查等排除心腦血管疾病、惡性腫瘤、嚴重感染、糖尿病、高血壓、高脂蛋白血癥、肝臟和腎臟疾病患病史及家族史，且在半年內均未服用過任何降血脂藥物者。男性244例，年齡1～90歲，中位年齡為47歲；女性318例，年齡4～93歲，中位年齡為41歲。上述健康人群空腹血脂均在正常范圍，即血清膽固醇(TC)<5.20 mmol/L、三酰甘油(TG)<1.700 mmol/L、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)<1.550 mmol/L、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)<3.100 mmol/L。

1.2檢測方法 所有人群均在空腹12 h后采集靜脈血標本，血液標本經離心機3 000 r/min離心5 min，在2 h內完成血清sd LDL-C的檢測。sd LDL-C的檢測方法使用過氧化物酶法，試劑盒由北京九強生物技術股份有限公司生產。檢測儀器采用奧林巴斯AU5831全自動生化分析儀。

1.3標本分組 所有標本按照廠家提供的年齡段分組對比，見表1，共錄入蘭州市健康人群562例，女性318例，根據年齡分為6個亞組：<20歲為1組，21～<30歲為2組，31～<40歲為3組，41～<50歲為4組，51～<60歲為5組，≥60歲為6組。男性244例，根據年齡分為6個亞組：<20歲為7組，21～<30歲為8組，31～<40歲為9組，41～<50歲為10組，51～<60歲為11組，≥60歲為12組。

2 結 果

2.1與廠家提供的參考區間比對 蘭州市健康人群按照公司提供的試劑說明書參考區間分組后，采用非參數檢驗結果顯示，各組間比較差異有統計學意義(P=0.00)。分組后數據為非正態分布，采用百分位數法得到2.5%～97.5%及0.5%～99.5%的參考區間[5]，見表1。

2.2不同性別人群各年齡組sd LDL-C分布情況 本研究將562例健康體檢人員按性別分為男、女兩個組，又按性別分為6個亞組(總共12個組)進行分析比較[6]，蘭州市人群女性年齡各亞組sd LDL-C比較，差異無統計學意義(P=0.302)；蘭州市人群男性年齡各亞組sd LDL-C比較，差異無統計學意義(P=0.257)。男性sd LDL-C水平較同年齡段女性sd LDL-C水平高(P<0.05)。各年齡段分組的中位數及百分位數見表2。

表1 蘭州市人群與廠家提供的sd LDL-C參考區間對比

表2 蘭州市人群sd LDL-C分布情況[mmol/L,M(P25～P75)]

3 討 論

LDL-C是冠心病發生的一個重要風險因子，而且在冠心病的發生發展過程中起重要作用。而sd LDL-C作為LDL-C的主要組分，相對于大而輕低密度脂蛋白膽固醇，sd LDL-C更加容易侵入血管內皮細胞，沉積在血管壁上，由于它對血管壁的高侵入性，與LDL-C受體的低親和性，更長的血漿半衰期和對氧化應激的低耐受性，使sd LDL-C更容易導致動脈粥樣發生硬化[6-9]，是動脈粥樣硬化疾病較強的獨立危險因素。因此，在冠心病等動脈粥樣硬化疾病的風險預測方面，sd LDL-C較LDL-C更加具有意義。

sd LDL-C致動脈粥樣硬化、冠心病等的可能機制有，(1)易被氧化修飾：密度高的LDL亞組分(sd LDL)在人體內易被氧化修飾為氧化型LDL，而氧化型LDL易被吞噬細胞無限制的吞噬，從而發展成為泡沫細胞。(2)抗氧化劑含量低：研究發現，從健康人體血漿中分離的sd LDL顆粒中所含的輔酶Q10和維生素E的含量顯著低于大而輕LDL和中密度LDL顆粒，其內的過氧化物很高。(3)清除緩慢：在體外細胞培養時，健康人血漿中密度高的LDL顆粒與LDL受體的親和力明顯小于其他LDL顆粒。sd LDL顆粒由于通過受體途徑降解緩慢而在體內的滯留時間長于其他LDL顆粒，這將增加其在血管中被氧化的概率以及被巨噬細胞吞噬形成泡沫細胞的可能性。(4)易黏附：體外研究發現sd LDL易與血管壁上的蛋白多糖結合，從而黏附在血管壁上。如果發生在體內，則黏附的sd LDL很可能通過某種途徑進入人血管內皮細胞，在細胞多種氧化酶的作用下，sd LDL在血管壁內發生氧化修飾，從而誘發動脈粥樣硬化、冠心病等多種疾病的發生。

臨床主要采用sd LDL-C監測與冠心病發生和發展的關系,血清sd LDL-C水平升高導致冠心病患病的危險性增加，sd LDL-C檢測對預測冠心病發生具有一定臨床意義。除此之外，sd LDL-C與糖尿病、腦卒中、家族性高脂蛋白血癥等疾病均有相關影響。因此，心腦血管疾病、糖尿病、高血脂等患者，均為檢測sd LDL-C的目標適應人群。

有研究表明[10-12]，sd LDL-C與冠心病的發生和發展有著重要的密切關系。近年來，sd LDL-C的實驗室檢測已經實現，但是sd LDL-C在人群中的分布情況很難進行統一[13]。本實驗室使用的廠家參考區間設定根據上海、湖北、廣西、內蒙古等地2 199例“健康者”血清標本得出。本研究結果表明，蘭州市相同年齡段健康人群的參考區間與試劑盒比對差異較大，因此，非常有必要根據蘭州市人群的sd LDL-C分布情況來設定相應的參考區間，通過本研究建立起來的生物參考區間受到測定條件、環境、檢測儀器等多種不可控因素的影響，僅為蘭州地區實驗室提供參考。本研究發現，蘭州市人群血清中sd LDL-C水平以男性21～30歲的sd LDL-C水平最高，男性的sd LDL-C水平高于同年齡女性。本研究的目的是對蘭州市健康人群的sd LDL-C水平進行調查，sd LDL-C的表達和在血清中水平的高低是否還可能受到激素水平和其他因素的影響有待筆者進一步研究，在后續的研究和調查中將進一步探討sd LDL-C水平的臨床診斷價值和療效評價。