血清學三聯篩查聯合羊水穿刺在18、21-三體綜合征產前診斷中的應用

趙詠梅，張傳英，陳儉輝，趙連芳

(遂寧市中心醫院產前診斷實驗室，四川遂寧 629000)

我國新生兒缺陷率較高，新生兒缺陷率占出生總人數的4%～6%，每年有20～30萬缺陷新生兒出生，給家庭和社會帶來巨大負擔[1-2]。因此，降低新生兒的缺陷率，提高出生人口素質，是我國亟待解決的重大問題。據統計，18-三體綜合征(又叫愛德華氏綜合征)和21-三體綜合征(又叫唐氏綜合征)為常見的新生兒缺陷疾病[3]，患兒多表現為智力低下和結構畸形，對患兒后期生活造成極大影響。因此，孕婦在孕期進行科學的產前診斷具有重要意義[4]。目前，臨床上主要采取血清學篩查等無創型篩查對孕早、中期孕婦進行產前檢查。血清學三聯篩查為檢測孕婦血清甲胎蛋白(AFP)、β-人絨毛膜促性腺激素(β-HCG)及雌三醇(μE3)水平，雖然其具有一定局限性[5-6]，但該法操作簡便，為無創型檢查，且價格經濟合理，已被廣大醫護人員及孕婦所接受。疑似懷有缺陷及遺傳病胎兒的孕婦，可進一步通過羊水穿刺檢查。羊水穿刺是目前常見的有創型產前診斷檢查，通過培養羊水細胞檢查胎兒是否患有染色體疾病[7]。因此，本研究采用血清學三聯篩查對孕中期孕婦進行科學的產前檢查，對高危孕婦進一步進行羊水穿刺，檢查胎兒是否患有染色體疾病，旨在探究血清學三聯篩查聯合羊水穿刺在18、21-三體綜合征產前診斷中的應用價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2015年1月至2017年12月來本院進行血清學三聯(AFP、β-HCG、μE3)篩查的26 158例孕婦為研究對象，孕婦年齡20～42歲，平均(27.45±6.86)歲，孕周15～20+6周，平均孕周(17.45±4.54)周。月經正常者，孕周期從末次月經開始計算，月經不正常者，通過B超檢測孕周期。排除非單胎妊娠、患重大疾病、慢性疾病的孕婦。以年齡為分組標準，將孕婦分為兩組，年齡≥35歲為高齡組，年齡<35歲為低齡組。

1.2儀器與試劑 磁性微粒子化學發光法(貝克曼庫爾特公司生產，儀器型號：Access2)和其配套試劑盒及風險評估軟件(上海騰程科技制備)；羊水培養基(美國Gibco公司生產)。

1.3檢查方法 抽取孕婦肘靜脈血3 mL，靜置0.5 h后置于4 000 r/min轉速下離心5 min，吸取血清，將血清置于-20 ℃下保存。采用磁性微粒子化學發光檢測儀及其配套的雙標試劑(AFP、β-HCG)及試劑盒(μE3)來檢測孕婦血清標志物中AFP、β-HCG及μE3水平，所有檢測于1周內完成[8]。血清標志物的生化值結合孕婦的年齡、孕周及體質量信息，采用風險評估軟件對孕婦進行篩查風險率評估。設定21-三體綜合征高風險臨界值(cut-off值)為1/270，cut-off值1/1 000～1/270即為高風險；18-三體綜合征高風險cut-off值為1/350，cut-off值1/1 000～1/350即為高風險。篩查后，對高風險孕婦進一步進行羊水穿刺檢查[9]。在B超指導下，抽取孕婦羊水20 mL(最初2 mL棄去)均分于2個離心管中，于1 200 r/min轉速下離心10 min，棄去上層清液，下層懸濁液接種于2個細胞培養瓶中，向培養瓶中加入3 mL羊水培養液后置于5%二氧化碳恒溫培養箱中培育7 d。7 d后更換培養液，繼續培養至顯微鏡下可見分裂期細胞。隨后，加入秋水仙堿后繼續培育3.5 h，后置于1 200 r/min轉速下離心10 min，得到下層細胞沉淀。經低滲、預固定、固定、制片等處理，于顯微鏡下觀察染色體核型。所有孕婦均隨訪至其產后3個月。

2 結 果

2.1血清學三聯篩查結果 通過血清學三聯篩查結果發現，26 158例孕婦中，18-三體綜合征和21-三體綜合征的篩查陽性率分別為0.58%和7.15%，總陽性率為7.73%，見表1。

表1 血清學三聯篩查結果

2.2羊水穿刺檢查結果 對血清學三聯篩查為陽性的孕婦進一步行羊水穿刺檢查，共有1 921例高風險孕婦接受羊水穿刺檢查(接受率為95.00%)，結果顯示，其中21-三體綜合征22例，18-三體綜合征13例，染色體異常結果見表2。

表2 胎兒染色體異常結果

2.3高低篩查風險孕婦妊娠結局對比 2 022例高風險孕婦中，151例發生不良妊娠結局。其中21-三體綜合征22例(1.15%)，18-三體綜合征13例(0.68%)，聯合B超等其他檢查，還有116例孕婦發生不良妊娠結局。24 136例低風險孕婦中，有526例孕婦發生不良妊娠結局。高風險孕婦的不良妊娠結局發生率明顯高于低風險孕婦(P<0.05)，見表3。

表3 高低篩查風險孕婦妊娠結局對比

2.4高低年齡孕婦篩查高風險率對比 高齡組孕婦21-三體綜合征陽性篩查率為28.28%，18-三體綜合征陽性篩查率為3.18%；低齡組孕婦21-三體綜合征陽性篩查率為6.36%，18-三體綜合征陽性篩查率為0.48%。高齡組孕婦篩查高風險率明顯高于低齡組(P<0.05)，見表4。

表4 高低年齡孕婦篩查高風險率對比

2.5不同年齡孕婦21、18-三體綜合征發生率對比 高齡組孕婦經羊水穿刺檢查，21-三體綜合征4例，18-三體綜合征3例；低齡組21-三體綜合征18例，18-三體綜合征10例。高齡組孕婦21-三體綜合征和18三體綜合征發生率明顯高于低齡組(P<0.05)，見表5。

表5 不同年齡孕婦21-三體綜合癥和18-三體綜合征發生率對比

3 討 論

隨著我國二胎政策的開放，新生兒出生率正逐漸升高，18、21-三體綜合征等患兒的出生率也呈升高趨勢[10]，因此，采取有效且科學的產前篩查和診斷對降低缺陷兒出生率，提高我國人口素質具有重要的意義。血清學三聯篩查為無創型檢查，且其操作簡單，具有經濟優勢，能有效篩查胎兒染色體異常。對篩查后高風險孕婦進一步行羊水穿刺檢查，通過培養羊水細胞檢查，可以觀察胎兒是否患有染色體疾病[11-12]，血清學三聯篩查聯合羊水穿刺已成為18、21-三體綜合征等染色體疾病產前診斷的主要技術手段之一[13]。

本研究采用血清學三聯篩查對孕中期孕婦進行科學的產前篩查，對篩查高風險孕婦進一步行羊水穿刺，檢查胎兒是否患有染色體疾病。通過血清學三聯篩查結果發現，26 158例孕婦中，18-三體綜合征和21-三體綜合征的篩查陽性率分別為0.58%和7.15%，總陽性率為7.73%。1 921例孕婦進一步接受羊水穿刺做胎兒染色體檢查，其中21-三體綜合征22例(1.15%)，18-三體綜合征13例(0.68%)。另外，高風險孕婦不良妊娠結局發生率明顯高于低風險孕婦(P<0.05)。龐春玉等[14]對5 922例孕中期孕婦進行血清學三聯篩查，結果顯示，篩查高風險孕婦473例，其中21-三體綜合征高風險416例(7.02%)，18-三體綜合征高風險5例(0.08%)，高風險篩查組妊娠異常率明顯高于低風險篩查組(P<0.05)，本研究21-三體綜合征高風險率(7.15%)結果與其相近，18-三體綜合征高風險率(0.58%)結果明顯高于其研究結果。說明血清學三聯篩查對18、21-三體綜合征能有效評估孕婦懷有染色體缺陷胎兒的風險性，對高風險孕婦進一步行羊水穿刺檢查，觀察胎兒是否存在染色體異常，對妊娠結局具有一定的指導意義，從而降低缺陷胎兒出生率。隨著孕婦年齡的增長，子宮和卵子均不斷老化，更容易造成胎兒染色體異常[15]。因此，本研究還探索了年齡與胎兒染色體異常之間的關系，研究發現，高齡組孕婦21-三體綜合征陽性篩查率為28.28%，18-三體綜合征陽性篩查率為3.18%；低齡組孕婦21-三體綜合征陽性篩查率為6.36%，18-三體綜合征陽性篩查率為0.48%。高齡組孕婦篩查高風險率明顯高于低齡組(P<0.05)，該結果與朱翔等[9]報道相似。由此可見，血清學三聯篩查對預防高齡孕婦發生不良妊娠結局具有積極的意義。

綜上所述，血清學三聯篩查聯合羊水穿刺行胎兒染色體檢查對18、21-三體綜合征的預防具有較高的應用價值，對不良妊娠結局具有一定的指導，對預防缺陷新生兒具有重要的意義，能提高健康新生兒出生率，提高我國人口綜合素質。