核酸檢測技術在基層血站血液篩查中的應用

馬成林

（海東市中心血站，青海 海東 810600）

基層血站為醫療機構提供血液，基層血站的血液篩查能力影響到醫療結構的用血安全，關系到患者的生命安全，因此必須重視對血液的篩查。對輸血傳播病原體進行篩查能有效保障血液的安全，常用的方法主要包括核酸檢測與血清學檢測[1]。酶聯免疫吸附試驗（ELISA）一直在HCV、HBV、VIV以及梅毒螺旋體的檢測中廣泛應用，但是這一方法受到隱匿性感染、窗口期感染、病毒變異等因素的影響，檢測后仍然存在一定的風險[2]。我國于2010年開始進行核酸檢測試點，2015年正式將其納入到《血站技術操作規程》中。本次研究主要探討將核酸檢測技術應用于基層血站血液篩查中的效果，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

隨機選擇2018年3月～2019年3月期間本站ELISA法檢測無反應性無償獻血標本共4200份，獻血者均符合現行《獻血者健康檢查要求》中的相關規定，體檢合格，年齡18～55歲。

1.2 方法

采血時均為肘靜脈血，采集于2支抗凝管中分別進行ELISA法檢測與核酸檢測，用于ELISA法檢測的試管中不加入分離膠，核酸檢測的抗凝管中加入分離膠。嚴格按照相關規范進行冷藏、保存以及處理。對ELISA法檢測陰性的標本，均進行核酸檢測，核酸檢測的過程中，采用全自動混樣儀準確制備標本，之后進行樣本檢測與擴增。檢測儀器自動算出CT值，如果發現有擴增曲線在閾值線以上（即我們說的陽性），對核酸檢測技術發現陽性的補充進行血清學實驗，從而進行確認。

2 結 果

4200份ELISA顯示陰性的標本中，核酸檢測發現陽性11份，構成比1.5%（63/4200）；經血清學實驗檢測發現HBV感染8例，構成比72.86%（8/11）。無HIV RNA與HCV RNA。

3 討 論

核酸擴增檢測技術采用分子診斷技術對病原體的核酸進行直接檢測，當前我國血液篩查中的常用技術主要包括實時熒光PCR技術與逆轉錄介導的擴增技術，主要步驟是提取核酸、擴增以及檢測。這一技術的主要優勢在于高度自動化、高敏感性以及特異度，通過這一技術能將血液樣本中含量極低的核酸檢測出來，病毒感染后的數天之內即可檢查出來，因此這一技術的采用使得病原體檢測的“窗口期”得到了明顯的縮短[3]。

從本次研究的結果上看來，ELISA法檢測顯示陰性的標本中，有11份標本被檢測為陽性，其構成比為1.5%，11例核酸檢測顯示陽性的標本中，有8例經血清學實驗檢測為HBV感染，其構成比為72.86%，提示提示核酸檢測技術應用于基層血站的血液篩查中的敏感性較ELISA法更高，其特異度也較為理想，這能明顯提高基層血站血液篩查的能力，能有效預防攜帶病毒的血液被使用，為臨床用血安全提供了保障[4]。本次研究中，假陽性2例，其原因可能是：（1）本站開展核酸檢測的時間較短，工作人員尚缺乏足夠的操作經驗，由于操作不夠熟練造成的檢測出現假陽性；（2）標本血樣的運輸以及保存不夠規范，運輸時間過長、環境溫度過高等造成核酸物質被分解；（3）存留確認血樣的過程中，病毒顆粒在血漿中為泊松分布，濃度分布不均勻，血樣中的病毒濃度不夠高，造成未能檢出[5]。

ELISA法檢測受到病毒變異、隱匿性感染以及窗口期等眾多因素的影響，血液檢驗過程中存在一定的漏檢率，采用核酸檢測的方法能有效降低漏檢率，將這一方法與ELISA法相結合，能有效確保臨床的用血安全。因此本次研究認為，將這一技術應用于基層血站的血液篩查能耐有效減少漏檢，其應用價值較高。

綜上所述，核酸檢測技術在基層血站中的應用使得血站對經輸血傳播性病毒的篩查能力得到了提高，將其與血清學檢測相結合，能確保臨床用血安全。