復方元芪利喘顆粒的制備工藝研究

王海龍，陳大忠*

（1.中國人民解放軍聯勤保障部隊第962醫院，黑龍江 哈爾濱 150080；2.黑龍江中醫藥大學，黑龍江 哈爾濱 150040）

復方元芪利喘顆粒為名老中醫臨床經驗方，由淫羊藿，黃芪，五味子，知母，麻黃五味中藥組成。具有溫陽益氣，化痰平喘的功效。本研究根據相關文獻報道[1-2]，確定水提取的最佳提取工藝。在此基礎上進行顆粒劑的制備工藝考察[3]，旨在研究出質量穩定可控、服用方便中藥復方顆粒劑。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

98-1-B型電子恒溫電熱套(天津市泰斯特儀器有限公司)；AL204型電子天平（梅特勒-托利多儀器）；DGG9240B電熱恒溫鼓風干燥箱（上海森信實驗儀器

有限公司）；水分測定儀（上海儀電分析儀器有限公司）；SB-5200DT超聲波清

洗機（寧波新藝超聲波設備有限公司）；儀表恒溫水浴鍋（上海樹立儀器儀表有限公司）；waters 2695型高效液相分析儀（美國waters公司）。

1.2 試藥

處方中淫羊藿，麻黃，五味子等各味藥材均購自哈藥集團世一堂中藥飲片有限責任公司。淫羊藿苷對照品（購自中國藥品生物制品檢定院，批號：110737-200415）。實驗中所用的其他試劑均為分析純。甲醇、乙腈為色譜純，其他試劑均為分析純。

2 實驗方法與結果

2.1 復方元芪利喘顆粒水提工藝條件的優選

稱取處方中各味藥材，按照正交試驗設計分別考察溶劑用量、提取時間和提取次數，以總固形物的出膏率和淫羊藿苷總提取含量為指標優化最佳提取工藝。

2.2 淫羊藿苷含量測定

2.2.1 對照品溶液的制備：精密取淫羊藿苷對照品1.13 mg，加甲醇稀釋溶解并定容于10 ml容量瓶中，搖勻，備用（0.113 mg/ml）。

2.2.2 供試品溶液的制備取本品2 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入稀乙醇20 ml，稱重，超聲處理1 h，再稱重，補足重量，搖勻，濾過，取續濾液即得。

2.2.3 色譜條件與系統適應性試驗：色譜柱用十八烷基鍵合硅膠為填充劑[4-5]；以乙腈-水（30：70）為流動相，檢測波長為270 nm；流速1.0 ml/min；柱溫30℃，理論板數按淫羊藿苷峰計算不低于1500。

2.2.4 標準曲線的繪制：分別精密吸取淫羊藿苷對照品溶液2、4、6、8、10、12 μl，按上述色譜條件測定，記錄峰面積，以淫羊藿苷進樣量為橫坐標，峰面積積分值為縱坐標，繪制標準曲線，得線性回歸方程為Y=203126X+1024610.6，r=0.9999，結果表明，淫羊藿苷進樣量在0.904-2.034 μg呈良好線性關系。

2.2.5 精密度試驗：精密吸取2.1.3項下供試品溶液10 μl，重復進樣6次，測定，結果峰面積的RSD為1.8%，表明儀器精密度良好。

2.2.6 穩定性試驗：同一批供試品溶液，分別于0，2，4，6，8，10小時按上述色譜條件進樣測定6次。結果淫羊藿苷色譜峰面積RSD為2.3%。表明供試品溶液在10小時內穩定性較好。

2.2.7 重復性試驗：取同一樣品6份，分別制備供試品溶液，進樣測定，結果提取物中淫羊藿苷的含量為2.24mg/g，RSD為2.8%。結果表明該方法重復性良好。

2.2.8 加樣回收試驗：精密稱取本品共6份，分別精密加入淫羊藿苷對照品，按上述方法制成供試品溶液，進樣測定峰面積積分值，計算回收率，結果平均回收率98.86%，RSD為2.4%。

2.3 正交實驗結果

采用三因素三水平正交設計試驗優選最佳提取工藝條件。根據單因素試驗結果以提取時間（A）、提取次數（B）、水溶劑用量（C）為考察因素，利用淫羊藿苷提取率和出膏率權重綜合評分為指標，選用L9(34)正交表進行試驗，結果見表1。

表1 提取工藝優選正交試驗表

表2 綜合評分法方差分析

方差分析發現，因素A、B、C對提取效果的影響具有顯著性差異，其中因素

A2＞A3＞A1；B2＞B1＞B3，但B2和B1相近，沒有顯著性差異，而C3＞C2＞C1但C3與C2相近，二者也沒有顯著性差異，結合實際生產中的成本和周期，確定為水提取的最佳工藝為A2B2C3，即加水10倍量，煎煮2次，每次2小時。

2.4 提取工藝的驗證試驗

按處方組成，稱取以上各味藥材平行3份，按優選出的最佳提取工藝條件加入10倍量水，提取2次，每次2小時，合并水煎煮液，濃縮至干，測定淫羊藿苷含量和總固形物重量[6]。計算淫羊藿苷提取率和總固形物出膏率。結果表明，3份提取物中淫羊藿苷提取率為76.82%，RSD為1.71%；總固形物出膏率為28.462%，RSD為1.38%，驗證結果確定該工藝穩定、合理、可行。

3 討 論

采用HPLC法測定提取物中淫羊藿苷的含量，色譜條件成熟，以淫羊藿苷作為代表性成分能夠反映出水提取工藝的提取效率；在此基礎上，引入提取物的出膏率并結合淫羊藿的含量作為綜合評價指標，對二者賦予不同的權重系數[7-8]，計算綜合評分分值，以綜合評分數值對正交設計結果進行統計學處理后，優化篩選出復方元芪利喘顆粒水提工藝的最佳條件，通過驗證結果客觀、重現性好。