Carisolv 去齲效果的體外研究

汪婷婷，李虎

（蘇州大學附屬口腔醫院，江蘇 蘇州）

0 引言

隨著粘結材料的不斷發展，去齲的洞型制備逐漸轉向保守，即微創治療。Carisolv 化學機械法就是其中的一種。目前，多數研究認為Carisolv 能夠保留更多的牙體組織[1]，但是關于Carisolv 的去齲效果仍有爭議[2,3]，以往研究多采用掃描電鏡觀察去齲后的洞底形態，本研究采用牙齒脫鈣組織切片進行評價，從組織病理學角度評價Carisolv 的去齲效果。

1 材料和方法

1.1 主要材料和儀器

（1）主要材料

Carisolv 凝膠（賽維生物有限公司，深圳）；Carisolv 手工器械（MediTeam Dental AB，Sweden）；蘇木素-伊紅染色液。

（2）儀器

DM4000B 正 置 顯 微 鏡（Leica，Germany）；Rm2265 全自動半薄輪轉切片機（Leica，Germany）；低速硬組織切片機（IsoMet，USA）；高速渦輪手機；低速渦輪手機

1.2 方法

1.2.1 離體牙收集

從門診收集拔除的齲壞恒磨牙，齲病的診斷標準依照WHO 制定的口腔流行病調查標準[4]，根據齲病的“色、形、質”三方面的變化，以質變為準，用探針探及底部發軟，齲損進展至牙本質層。所有牙齒用自來水清洗干凈后，1 牙放1 生理鹽水小瓶儲存，置4℃冰箱保存，備用。

1.2.2 去齲操作

將收集好的45 個離體牙隨機分為三組，分別采用如下操作：（1）A 組（空白組）

15 個離體齲壞磨牙用0.9%生理鹽水沖洗窩洞后，不做任何處理。

（2）B 組（實驗組）

用Carisolv 化學機械法去齲，15 個離體牙，將Carisolv的凝膠混勻，注入少量凝膠到齲洞內，約30s 后，選擇合適的Carisolv 工具，刮除齲壞組織，重復上述步驟直至凝膠不再渾濁為止。以不卡住鋒利的探針認為去齲完全，再用0.9% 生理鹽水沖洗窩洞即可，備用。

（3）C 組（對照組）

用傳統機械法去齲，15 個離體牙使用慢速球鉆磨除所有齲壞組織，去齲干凈的標準同B 組，用0.9%生理鹽水沖洗窩洞，備用。

1.2.3 制作牙齒切片

離體牙去齲完成后，用低速硬組織切片機先截去牙根，然后沿牙冠近遠中方向將齲洞分為前、中、后3 塊，制作脫鈣樣本，每部分各制20 張切片，厚5μm，即每個離體牙共60 張切片，HE 染色。

1.2.4 評價

（1）評價標準

在200×的視野下，切片窩洞底被染成藍色的牙本質小管認為是“感染的牙本質小管”，根據其數目分為以下4 個等級：0 分：無感染的牙本質小管；1 分：1- 感染牙本質小管；2分：10-感染牙本質小管；3 分：20-感染牙本質小管。

（2）觀察視野選取及評分

每個牙齒的窩洞分為3 塊，每個窩洞塊各制20 張切片。從每個窩洞塊的切片中各隨機選取2 張切片，即每個牙齒選6 張切片，按上述評分標準進行評分。所有的切片由1 位觀察員獨立進行盲評，計算6 張切片的平均得分，作為該牙齒的去齲效果的最終得分，評價去齲的徹底性。

1.3 統計學方法

數據錄入采用Epidata3.1 軟件，統計學分析軟件用SPSS 13.0，經方差齊性檢驗，知方差不齊（P=0.003）。經秩和變換后，多樣本的比較采用Kruskal-Wallis H 秩和檢驗；組間兩兩比較，對數據重新編秩次，采用S-N-K 法進行檢驗，檢驗水準ɑ=0.05。

2 結果

2.1 去齲結果

每個離體牙的切片，隨機選取6 張切片后，按上述標準進行觀察和評分，求出6 張切片的平均值，作為該離體牙去齲效果的得分。

A 組（空白組），90 張切片，562 個評分視野，評分以“3 分”最多，均值得分（2.835±0.0602），該組的牙齒切片內可見牙本質小管被破壞，甚至呈串珠樣，融合的牙本質小管內充滿細菌等壞死物（見圖D）。

B 組（實驗組），90 張切片，648 個評分視野，評分以“0 分”最多（見圖A），該組總均值為（0.2492±0.2306）。（見圖B）

C 組（對照組），90 張切片，621 個評分視野，評分以“0 分”最多，該組總均值得分（0.3117±0.2207）。（見圖C）

圖1 不同等級的評分結果（200×，HE）

用SPSS 軟件，經方差齊性檢驗，方差不齊（P=0.003）。采用Kruskal-Wallis H 秩和檢驗，顯示組間有差異（F=29.980，P=0.000）；對數據重經編秩次，用S-N-K 法進行組間兩兩比較，A 組和B 組、C 組之間差異有統計學意義，B組和C 組之間差異無統計學意義。3 組離體牙的切片評分視野得分情況見表1。

表1 3 組離體牙去齲后切片的評分情況

2.2 去齲后形態

本研究制備牙齒縱向切片，亦能夠清晰地反映去齲后窩洞底形態的變化，Carisolv 去齲后的洞底形態凹凸不平，648個評分視野，574 個視野凹凸不平（88.58%）；機械組則較為平坦，621 個視野，418 個視野較平坦（67.31%），經χ2檢驗，差異有統計學意義（χ2=84.07，P=0.000）。

2.3 去齲時間

B 組（實 驗 組）和C 組（對 照 組）去 齲 時 間 分 別 為（262.08±53.44）s 和（68.25±24.33）s，即（3.5-5.2）min 和（0.7-1.5）min，實驗組長于對照組，經t 檢驗，兩者差異有統計學意義（t=11.435，P=0.000）。

3 討論

3.1 染色方法的選用

臨床去齲過程中采用觸覺和視覺相結合的辦法，用肉眼觀察是否去凈齲壞組織，但是該法常與必須去除的齲壞牙本質量不相對應[5]。臨床上僅通過肉眼無法判斷牙本質小管是否被感染，本研究通過組織學方法從微觀角度進行觀察。正常成熟牙本質內的有機物以膠原蛋白為主，該膠原不易被酸性溶液溶解[6]，經脫鈣處理后，牙本質小管的形態則較好地保留下來[7]。因此本研究采用牙齒脫鈣切片觀察去齲后窩洞內感染牙本質的情況。

3.2 關于評分標準

關于切片的評分標準尚未有統一標準[8,9]。本研究依據洞底的內染成藍紫色的牙本質小管，該深染顆粒物內除有細菌外，可能還有牙本質碎屑，認為該牙本質小管被“感染”，并根據其數目的多少將其劃分為4 級，該標準既能反映去齲后洞底牙本質小管內的細菌，又能對其數量進行簡單的估計。結果顯示Carisolv 組和機械組兩種去齲方法的效果差異無統計學意義，本研究結果與Banerjee 等[10]和Pai 等[11]采用掃描電鏡觀察機械法和Carisolv 化學機械法的結果相似，說明該評分標準可靠。

3.3 關于洞底的形態

本研究通過牙齒縱切片觀察，Carisolv 化學法去齲后的窩洞洞底形態，有88.58%的視野顯示洞底凹凸不平，而機械組有67.31%的洞底形態較為平坦。Tsanova 等[12]用掃描電鏡觀察，均顯示Carisolv 去齲后的洞底凹凸不平，有少量的玷污層。且多數研究認為去齲后的洞底形態不會對材料的粘結固位產生不良影響[13-15]。

本研究分別用Carisolv 化學機械法和傳統機械法去齲，Carisolv 的凝膠需要先作用一段時間后，方可手工操作，耗時明顯較機械組長，這也是限制Carisolv 在臨床廣泛應用的一大因素。本研究采用體外實驗，且事先將釉牙本質界以上的齲壞組織去凈，然后分組，組間均衡，只比較兩組的去齲時間。Carisolv 組的時間比傳統機械組長，但是時間在5min 以內，臨床尚可接受?？傊?，Carisolv 化學機械法能夠有效地去除齲壞組織，達到臨床的去齲效果，去齲過程不特別依賴渦輪機，因此對于有牙科畏懼的患者不失為一種很好的治療方法。