核酸與酶聯免疫檢測血液病毒的效果評價

高雯麗

（石河子紡織醫院 新疆 石河子 832000）

乙型肝炎病毒（HBV）為導致乙型肝炎的病原體，人類免疫缺陷病毒即艾滋病病毒（HIV），是導致人類免疫系統缺陷的一種病毒[1]。丙型肝炎病毒（HCV）具有異源性、可變性[2]。乙型肝炎病毒、艾滋病病毒、丙型肝炎病毒等均可通過血液進行傳播，因此加強血液病毒檢驗為減少、預防輸血中病毒傳染的重要方式[3]。酶聯免疫檢測為酶免疫測定技術中被臨床廣泛應用的技術方式，利用酶分子與抗體、抗抗體分子共價結合，進行測定，具有較高臨床價值[4]。核酸檢測方式通過檢測呼吸道標本、血液及糞便中判斷有無外來侵入的病毒的核酸，進而確定有無被病毒感染。選取154份無償獻血者血液樣本進行檢測，內容如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2018年5月—2019年5月我院無償獻血者血液樣本154份，分別對154份血液樣本進行酶聯免疫檢測、核酸檢測，對比酶聯免疫檢測、核酸檢測兩種檢測方式的臨床檢測結果。154份血液樣本中男性獻血者、女性獻血者分別85份、69份，年齡下限值為18歲，上限值為63歲，平均年齡（44.21±4.42）歲。采集無償獻血者血液樣本后將獲取的樣本均放在2～8℃條件下存儲，154份無償獻血者血液樣本經梅毒、轉氨酶檢測表示可進行實驗。

1.2 納入與排除標準

納入標準：①血液樣本合格，與各項目試驗技術要求相符。排除標準：①存在乙肝、甲肝病毒的血液樣本。

1.3 方法

對154份無償獻血者血液樣本分別進行酶聯免疫檢測、核酸檢測，檢測人員在檢測過程中需仔細觀察檢驗圖像、數據，保證數據準確、有效性。

核酸檢測：使用醫院提供的混樣儀、核酸提取擴增系統、試劑等進行檢查。將存儲在2～8℃條件下的血液標本取出，在室溫下對真空抗凝管中血液標本進行20 min離心、分離血清處理，結合后放于2～8℃條件下存儲。經檢查表明血液標本可進行實驗后，將合格的血液標本放在樣品條架上，根據分配試劑一級程序步驟進行操作。將100 μL A、B洗液，100 μL A、B洗脫液，加入B號96孔深孔板內，將50 μL磁珠、600 μL結合液體倒入A號96孔深孔板內。對樣品展開裂解，注意預防樣本污染。樣品裂解完成后，將程序使用三級核酸提取出來，對B號96孔深孔板、A號96孔深孔板使用核酸提取儀提取核酸，調配擴增核酸反應溶液。使用四級核酸擴增程序提取標本量中核酸，將核酸提取后結合液倒入八聯管內，在PCR儀器中擴增八聯管，詳細記錄檢測結果，將陽性匯集孔樣本挑出，予以拆分實驗，明確陽性樣本。

酶聯免疫檢測：使用醫院提供的檢測系統、處理系統、試劑等進行檢測，按照試劑內配套說明書進行操作。取出存儲在真空抗凝管內的樣本在室溫下進行20 min離心，分離血漿，放于適宜條件下保存。離心結束后，使用全自動加樣儀進行自動加樣，使用全自動酶免分析儀展開分析，記錄結果。

1.4 臨床評價

對比分析核酸檢測、酶聯免疫檢測方法等兩種檢測方式檢測血液病毒的結果，分析臨床檢驗血液病毒使用核酸檢測、酶聯免疫檢測方法等兩種檢測方式的應用價值。

1.5 統計學處理

數據錄入到SPSS 22.0軟件統計分析，計量資料對比采用t檢驗，以（）表示，而計數資料對比采用χ2檢驗，以率（%）進行表示，P＜0.05，差異有統計學意義。

2.結果

2.1 核酸檢測、酶聯免疫檢測方法等兩種檢測方式的檢測結果

核酸檢測方式檢測艾滋病病毒的陽性率8.44%（13/154），酶聯免疫檢測方式檢測艾滋病病毒的陽性率為2.60%（4/154），核酸檢測方式檢測艾滋病病毒陽性率高于酶聯免疫檢測（P＜0.05），差異有統計學意義；核酸檢測方式檢測乙型肝炎病毒的陽性率6.49%（10/154），酶聯免疫檢測方式檢測乙型肝炎病毒的陽性率為1.30%（2/154），核酸檢測方式檢測乙型肝炎病毒陽性率高于酶聯免疫檢測（P＜0.05），差異有統計學意義；核酸檢測方式檢測丙型肝炎病毒的陽性率9.74%（15/154），酶聯免疫檢測方式檢測丙型肝炎病毒的陽性率為3.25%（5/154），核酸檢測方式檢測丙型肝炎病毒陽性率高于酶聯免疫檢測（P＜0.05），差異有統計學意義，見表1。

表1 核酸檢測、酶聯免疫檢測方法等兩種檢測方式的檢測結果[n（%）]

3.討論

艾滋病又可以稱為獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS），是因機體感染人類免疫缺陷病毒（HIV）導致的全身性疾病。感染HIV病毒后人體會出現不同程度的免疫功能缺陷，沒有接受治療的患者在疾病晚期容易并發多種嚴重感染、惡性腫瘤，最終走向生命盡頭。艾滋病、乙型肝炎等疾病通過血液傳播病毒，對人們生命健康安全造成較大威脅。使用有效的檢測方式檢驗血液有利于減少醫院糾紛、降低輸血傳播風險。酶聯免疫檢驗為臨床多見抗體、抗原測定方式?；谙嚓P聯的酶對免疫復合物發生酶催化反應進行測定?，F如今多數血站使用基于2次酶聯免疫檢驗方式對血液展開檢測，發現該方式檢出率不高，且漏診、錯診較高，對血液檢測效率產生較大影響，導致安全隱患增加[5]。核酸檢測方式有利于控制輸血有關因素導致正常人群感染、感染性疾病擴散，提高社會安全性。

本研究使用核酸檢測方式檢測艾滋病病毒陽性率、乙型肝炎病毒陽性率、丙型肝炎病毒陽性率均高于酶聯免疫檢測。提示核酸檢測可有效提高臨床檢驗血液病毒的準確性、減少漏診，具有較高靈敏度、特異度。核酸檢測方式運用病毒核酸擴增技術，將病毒擴增至陽性匯集孔，使檢測病毒的靈敏度大幅度升高。并且在病毒窗口階段也可進行檢驗，對減少漏診、錯診率、縮短病毒窗口階段具有極大臨床意義。酶聯免疫檢測方式為臨床多見的抗體、抗原測定方式，基于相關聯的酶對免疫復合物發生酶催化反應測定。檢測艾滋病病毒、乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒等靈敏度較低與免疫靜默感染、病毒變異、窗口期等有關。乙型肝炎病毒感染和季節有關，冬天氣溫較低，人體乙型肝炎表面抗原活性較低，表達水平低，導致酶聯免疫檢測方式發生漏檢。

李玉泉[6]對血站檢驗科500例血液樣本展開研究，發現核酸檢測得到乙型肝炎病毒（HBV）陽性率高于酶聯免疫檢測，核酸檢測得到人類免疫缺陷病毒（HIV）陽性率高于酶聯免疫檢測，表明對血液樣本使用核酸檢測方式進行檢驗有助于提高臨床醫療質量、檢驗準確性。曹華琳[7]對26 325份無償獻血者血液樣本發現核酸檢測方式可檢出酶聯免疫檢測無法檢出的病毒變異，隱性感染、窗口期等情況，指出核酸檢測方式利用擴增相應病毒顆粒RNA，并使用聚合酶鏈式反應檢查基因擴增產物，降低疾病傳播風險。核酸檢測的臨床應用效果良好，本結果與之一致。核酸檢測方式對檢測環境、檢驗工作者、血液標本等具有較高要求，若血液標本質量無法得到保證，將對核酸檢測方式準確性產生直接影響。因此后續需加強血液樣本質量監測,提高檢驗工作者技術水平，進一步保證臨床血液檢測質量。

綜上所述，使用核酸檢測方式檢驗血液病毒效果確切明顯，有效提高檢測準確率、血液制品安全性，篩選血液病毒效果良好，減少漏檢率，適用于臨床檢驗血液病毒。