uVEGF、α1-mG及β2-MG水平變化在DN患者中的意義

周樹萍,何 琴

流行病學研究表明，糖尿病腎病(DN)的發病率可超過869/1萬人左右[1]，在合并有基礎性高血壓或者高脂血癥的群體中，DN的發病率可進一步上升[2]。臨床上DN的發生，不僅能夠導致患者生活質量的下降，同時還能夠增加遠期腎功能衰竭或者多器官功能障礙的發生風險。DN的早期診斷有重要的意義，其能夠在DN的早期臨床干預方面發揮作用。尿液細胞因子的分析能夠在DN的早期診斷過程中發揮作用。血管內皮細胞生長因子(uVEGF)是血管內皮生長因子家族成員，其能夠通過誘導血管內皮的損傷，加劇腎小球入球小動脈的痙攣，加劇腎臟組織的缺血缺氧性損傷，促進DN的發生[3]。α1微球蛋白(α1-mG)、β2微球蛋白(β2-MG)是紅細胞、間質細胞等有核細胞分泌的糖蛋白因子，在腎小球近端小管重吸收后被分解利用[4-5]。為了揭示uVEGF、α1-mG及β2-MG的表達與DN患者的病情關系，從而為臨床上DN的診療提供參考，本次研究選取我院確診的DN患者，探討了uVEGF、α1-mG及β2-MG的表達及其DN患者腎損害評估的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取我院確診T2DM伴微量清蛋白尿患者90例(微量組)、T2DM伴大量清蛋白尿患者90例(大量組)、健康對象90例作為對照組。微量組患者年齡50～75歲，平均年齡(60.2±8.1)歲，男53例、女37例，BMI(23.3±2.2) kg/m2。大量組患者年齡52～79歲，平均年齡(61.4±7.5)歲，男50例、女40例，BMI (23.2±2.5)kg/m2。對照組年齡45～79歲，平均年齡(59.6±10.2)歲，男50例、女40例；，BMI(22.9±3.0)kg/m2。三組研究對象的年齡、性別、BMI比較差異均無統計學意義(P>0.05)。

1.1.1 診斷及入選標準：①DN患者的診斷標準參考中華醫學會制定的標準[6]：尿清蛋白排泄率≥20 μg/min可確診為DN，其中UAER20～200 μg/min為微量組、UAER≥200 μg/min為大量組；②對照組為健康體檢對象；③本研究符合《赫爾透辛基宣言》相關醫學倫理規定，經我院醫學倫理委員會批準。

1.1.2 研究對象的排除標準：①惡性腫瘤患者；②腦血管疾病患者；③原發性腎臟疾病患者；④高血壓疾病患者；⑤長期應用免疫性制劑的患者；⑥嚴重的肝腎功能疾病患者。

1.2 指標檢測方法:采用一次性靜脈血采集器進行肘部靜脈血采集，采集5 mL靜脈血后自然放置，取上清液體進行檢測。采用杭州精密儀器公司生產的BIOSYS-2008全自動生化檢測儀器進行尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、空腹血糖(FPG)、糖化血紅蛋白(HbA1c)檢測，配套試劑盒購自北京博奧森生物公司；采用一次性采集器清潔中段尿液5 mL自然放置，1 000 r/min離心10 min，取上清液體進行檢測，采用貝克曼庫爾特公司UniCel DxI 800免疫發光儀器進行α1-mG及β2-MG的檢測，配套試劑盒購自北京九強生物公司；采用ELISA法進行uVEGF的檢測，配套儀器A4500酶標儀購自羅氏檢測公司。

2 結果

2.1 3組研究對象的uVEGF、α1-mG及β2-MG水平比較:微量組和大量組的uVEGF、α1-mG及β2-MG顯著高于對照組(P<0.05)；大量組的uVEGF、α1-mG及β2-MG顯著高于微量組(P<0.05)，見表1。

表1 3組研究對象的uVEGF、α1-mG及β2-MG水平比較

2.2 3組研究對象的血糖及腎功能指標水平比較:微量組和大量組的BUN、Scr顯著高于對照組(P<0.05)；大量組的BUN、Scr顯著高于微量組(P<0.05)；微量組和大量組的FPG及HbA1c顯著高于對照組(P<0.05)，見表2。

表2 3組研究對象的血糖及腎功能指標水平比較

2.3 uVEGF、α1-mG及β2-MG水平診斷DN的價值:uVEGF水平診斷DN的ROC曲線下面積(AUC值)為0.936，截斷值為24.08 mg/24h，靈敏度為88.24%(60/68)、特異度為86.36%(19/22)；α1-mG水平診斷DN的AUC值為0.866，截斷值為23.16 mg/L，靈敏度為84.29%(59/70)、特異度為85.00%(17/20)；β2-MG水平診斷DN的AUC值為0.844，截斷值為2.38 mg/L，靈敏度為87.69%(57/65)、特異度為84.00%(21/25)，見圖1(目錄后)、表3。

表3 uVEGF、α1-mG及β2-MG水平診斷DN的價值

3 討論

臨床觀察發現，通過糖皮質激素及免疫抑制劑等治療措施，能夠顯著改善DN患者的臨床結局，降低DN進展為終末期腎功能衰竭的風險。半胱氨酸或者胱抑素C等指標能夠在DN腎損害評估過程中發揮一定的早期參考價值。本次研究通過對DN患者尿液中uVEGF、α1-mG及β2-MG的表達分析研究，在揭示DN腎損害進展機理的同時，也為臨床上DN腎損害診斷提供了理論方面的參考。

uVEGF是血管內皮生長因子調控成員，其能夠通過誘導血管內皮細胞的凋亡，加劇腎臟血管內皮細胞的損傷，進而參與腎小球的損傷及腎單位的損傷過程?；A方面的研究認為，uVEGF的表達上升還能夠增加血管內皮細胞的氧化應激性損傷，影響到血管內皮細胞的損傷修復能力[6]。α1-mG及β2-MG是有核細胞分泌的細胞外糖蛋白成分，在體細胞正常生理代謝的過程中，α1-mG及β2-MG可顯著釋放，并能夠通過腎小球進行濾過和重吸收。在腎小球早期濾過功能損傷的過程中，α1-mG及β2-MG的漏出明顯增多，同時腎小球對于α1-mG及β2-MG的重吸收明顯增加。部分研究者探討了微球蛋白的表達與DN的關系，認為在DN患者中微球蛋白的表達濃度明顯上升[7]，但缺乏對于uVEGF的分析研究。

本次研究發現，在尿蛋白組患者中，uVEGF、α1-mG及β2-MG的表達濃度均明顯上升，特別是在大量尿蛋白組患者中，uVEGF、α1-mG及β2-MG的表達濃度的上升更為顯著，提示了uVEGF、α1-mG及β2-MG的高表達均能夠影響到DN腎損害進程。分析其內在的原理，可能與uVEGF、α1-mG及β2-MG的下列幾個方面的病理性作用有關[ 8]：①uVEGF的表達濃度的上升，能夠加劇腎小球入球小動脈的痙攣程度，加劇腎臟血管的代償性纖維化改變，影響腎單位的血流灌注水平，進而參與到DN腎損害進展過程；②α1-mG及β2-MG的表達上升，主要是由于DN患者局部腎小球近端小管生理功能的下降，導致α1-mG及β2-MG的滅活分解減少，未經吸收的α1-mG及β2-MG通過尿液排出體外，增加了尿液中α1-mG及β2-MG水平。劉利祥等[9]研究者也發現，在DN患者中，尿液β2-MG的表達濃度可上升30%～45%，同時在肌酐值上升較為明顯和腎小球濾過率下降顯著的患者中，β2-MG的表達濃度的上升更為顯著。BUN、Scr是反應患者腎功能的指標，FPG、HbA1c是反映患者體內血糖控制程度的指標，可以發現在尿蛋白組特別是大量蛋白組患者中，相關血糖及腎功能指標的波動較為顯著，提示大量組患者的腎功能損傷較為嚴重，同時其血糖控制情況較差。診斷學價值分析可見，uVEGF、α1-mG以及β2-MG水平診斷DN腎損害的AUC值、靈敏度、特異度均較高，提示uVEGF、α1-mG及β2-MG在DN腎損害評估中均具有一定的價值，臨床上對于uVEGF、α1-mG及β2-MG超過臨界值的患者，應早期進行臨床干預，進而改善DN患者的臨床結局。