血清ANGPTL4、EPO及TSGF水平與早期宮頸癌的關系及對淋巴結轉移的預測價值研究

秦 瑩，王 瓊

（閻良區婦幼保健計劃生育服務中心檢驗科，陜西 西安 710089）

宮頸癌是世界范圍內常見的婦科惡性腫瘤之一，其在我國的發病率逐漸上升，嚴重威脅婦女的生命健康［1］。近年來，隨著宮頸癌篩查的廣泛開展，使得早期宮頸癌的檢出率越來越高。在臨床上，子宮頸癌根治術治療早期宮頸癌效果可靠，但是否有必要行淋巴結切除，仍存在爭議。研究［2-3］表明，早期宮頸癌患者發生淋巴結轉移的概率＜15%，若一味進行淋巴結切除，可能額外增大并發癥發生風險，且未明顯增加患者的臨床獲益。尋找與早期宮頸癌密切相關的標志物，用于術前準確評估淋巴結轉移發生風險，將有助于診治策略的確立。血管生成素樣蛋白4（serum angiopoietin-like 4，ANGPTL4）是一種分泌型糖蛋白，在惡性腫瘤患者血清中表達上調，可促進腫瘤侵襲、轉移；紅細胞生成素（erythropoietin，EPO）在多種惡性腫瘤組織中表達增加，參與腫瘤血管形成；腫瘤特異性生長因子（tumor specific growth factor，TSGF）可促進癌細胞的生長、侵襲和轉移［4-7］。目前對于血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平與早期宮頸癌的關聯研究較少，三者聯合預測淋巴結轉移效能尚且不知。因此，本研究旨在探討分析血清ANGPTL4、EPO及TSGF與早期宮頸癌的關系及對淋巴結轉移的預測價值，以期為早期宮頸癌的診治及評估淋巴結轉移發生風險提供參考依據。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇西安市閻良區婦幼保健計劃生育服務中心2019年2月至2022年2月接診的102例早期宮頸癌患者作為病例組，另選同期手術治療的102例宮頸良性病變患者作為對照組。病例組年齡22～68歲，平均年齡（52.42±6.13）歲；身體質量指數22～27 kg/m2，平均（22.19±1.73）kg/m2；產次0～4次，平均（1.85±0.42）次；對照組年齡24～67歲，平均年齡（51.78±5.87）歲；身體質量指數21～28 kg/m2，平均（22.08±1.68）kg/m2；產次0～4次，平均（1.79±0.53）次。兩組一般資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

納入標準：①年齡20～68歲；②行子宮頸癌根治術及盆腔淋巴清掃術；③術前影像學評估未發現存在淋巴結轉移的跡象；④患者自愿參與研究，簽署知情同意書。

排除標準：①合并可能顯著增大手術風險的基礎性疾病者；②患有其他惡性腫瘤者；③術前接受放化療者；④不耐受手術治療者。

1.2 檢測方法

病例組患者術前32 h及術后60 d，對照組患者術前32 h，均進行肘靜脈血采樣10 mL，放置在抗凝管中，離心提取血清，儲存在-20℃冰箱中待測。使用酶聯免疫吸附試驗（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）檢測血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平，通過美國雷杜RT-2100酶標分析儀獲取檢測結果，檢測試劑盒分別來源于北京百奧萊博科技有限公司、上海信裕生物科技有限公司、湖南新大陸生物技術有限公司，嚴格按照試劑盒說明書及操作規范完成檢測操作。

1.3 觀察指標

比較兩組血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平，觀察病例組手術前后血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平的變化情況。根據術后病理學檢查結果，分析早期宮頸癌患者的淋巴結轉移情況。。

1.4 統計學方法

采用SPSS22.0軟件進行數據處理，符合正態分布且方差齊性的計量資料以（±s）表示，兩組間使用t檢驗；使用Delong檢驗比較兩組受試者工作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC）下面積（area under the curve，AUC）；以P＜0.05為差異有統計學意義。使用多因素Logistic回歸分析血清ANGPTL4、EPO及TSGF與早期宮頸癌合并淋巴結轉移的關系，通過ROC曲線下AUC評價血清ANGPTL4、EPO聯合TSGF診斷早期宮頸癌患者淋巴結轉移的效能。

2 結果

2.1 兩組手術前血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平比較

病例組術前血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平均高于對照組，差異有統計學意義（P＜0.05，表1）。

表1 兩組術前血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平比較（n=120，±s）

表1 兩組術前血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平比較（n=120，±s）

組別對照組病例組t P ANGPTL4（ng/mL）20.18±3.59 142.51±25.63 26.349＜0.001 EPO（ng/mL）3.58±1.12 8.47±5.84 8.792 0.026 TSGF（U/mL）20.42±3.58 81.45±9.76 19.785＜0.001

2.2 病例組手術前后血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平比較

病例組術后血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平均較術前降低，差異有統計學意義（P＜0.05，表2）。

表2 病例組手術前后血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平比較（n=120，±s）

表2 病例組手術前后血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平比較（n=120，±s）

組別術前術后t P ANGPTL4（ng/mL）142.51±25.63 24.58±5.87 23.461＜0.001 EPO（ng/mL）8.47±5.84 5.61±3.09 6.453 0.037 TSGF（U/mL）81.45±6.76 31.33±5.48 17.694＜0.001

2.3 淋巴結轉移組與非淋巴結轉移組術前血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平比較

在102例早期宮頸癌患者中，經術后病理活檢確診淋巴結轉移15例，占14.71%；其中淋巴結轉移組血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平均高于非淋巴結轉移組，差異有統計學意義（P＜0.05，表3）。

表3 淋巴結轉移組與非淋巴結轉移組術前血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平比較（±s）

表3 淋巴結轉移組與非淋巴結轉移組術前血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平比較（±s）

組別非淋巴結轉移組淋巴結轉移組t P n 87 15 ANGPTL4（ng/mL）71.45±15.64 189.36±38.71 26.345＜0.001 EPO（ng/mL）6.09±3.65 15.78±8.12 10.764 0.012 TSGF（U/mL）50.47±6.75 112.34±13.08 20.126＜0.001

2.4 血清ANGPTL4、EPO及TSGF與早期宮頸癌患者發生淋巴結轉移的關系分析

以早期宮頸癌患者是否發生淋巴結轉移為因變量，以血清ANGPTL4、EPO及TSGF為自變量。經多因素Logistic回歸分析，血清ANGPTL4、EPO及TSGF均是早期宮頸癌患者發生淋巴結轉移的獨立預測因素（P＜0.05，表4）。

表4 血清ANGPTL4、EPO及TSGF與早期宮頸癌患者發生淋巴結轉移的關系分析

2.5 血清ANGPTL4、EPO聯合TSGF預測早期宮頸癌患者發生淋巴結轉移的ROC曲線分析

經ROC曲線分析，血清ANGPTL4、EPO聯合TSGF預測早期宮頸癌患者發生淋巴結轉移的AUC為0.924（95%CI∶0.000～1.000），明顯大于單一指標ANGPTL4的0.767（95%CI∶0.539～0.995）、EPO的0.738（95%CI∶0.509～0.967）和TSGF的0.686（95%CI∶0.418～0.954），Z值分別為2.428、2.813、3.076，P＜0.001，ROC曲線見圖1。

圖1 血清ANGPTL4、EPO聯合TSGF預測早期宮頸癌患者發生淋巴結轉移的ROC曲線

3 討論

尋找與早期宮頸癌密切相關的標志物，用于準確評估早期宮頸癌是否存在淋巴結轉移發生風險，從而指導手術方案的制訂，對于早期宮頸癌患者的治療意義重大。ANGPTL4歸屬于血管生成素家族，參與調控腫瘤血管形成、癌細胞遷移、侵襲、轉移等病理學過程［8］。近年來，國外研究［9］發現，ANGPTL4在早期宮頸癌組織中呈高水平表達，并且與腫瘤惡性程度呈正相關，另有研究［10］表明，高表達的ANGPTL4可促進早期宮頸癌細胞的增殖并抑制其凋亡。由此認為，早期宮頸癌的發生、發展伴隨著血清ANGPTL4水平異常，檢測其表達水平，可能有助于評估早期宮頸癌的增殖狀態及手術預后。本研究結果顯示，早期宮頸癌患者血清ANGPTL4表達水平高于宮頸良性病變患者，且早期宮頸癌患者術后血清ANGPTL4表達水平較術前明顯降低，提示血清ANGPTL4表達水平與早期宮頸癌的病情演變有關。

EPO是一種活性糖蛋白，對紅細胞生成的調控起著關鍵作用，能夠促進紅細胞的分化、增殖，穩定外周循環中紅細胞含量［11］。相關研究［12］顯示，EPO在多種惡性腫瘤細胞中均可表達，促進腫瘤細胞的增殖和腫瘤血管的生成，對腫瘤的發生、發展發揮促進作用。Susantad等［13］研究認為，血清EPO表達水平可用于判斷早期宮頸癌的惡性程度，若患者血清EPO表達水平明顯升高，預示著宮頸癌細胞的增殖、侵襲和轉移能力不斷增強。本研究發現，病例組血清EPO表達水平明顯高于對照組，與Dávila-González等［14］的研究結果相符；與此同時，早期宮頸癌患者術后血清EPO表達水平較術前明顯降低，提示早期宮頸癌患者血清EPO表達水平明顯升高，隨著腫瘤負荷的減小而明顯降低。出現上述結果的原因，可能與血清EPO表達水平與早期宮頸癌細胞的抗凋亡、抗低氧及侵襲轉移有關。有研究［15］表明，TSGF對惡性腫瘤血管生成具有顯著的促進作用，在惡性腫瘤初期即可高水平表達。劉月芬等［16］研究指出，早期宮頸癌患者血清TSGF表達水平明顯升高，且與癌細胞分化程度、肌層浸潤程度有關。本研究結果顯示，病例組血清EPO表達水平明顯高于對照組，且病例組術后血清EPO表達水平明顯降低，提示血清EPO表達水平對早期宮頸癌的病情具有一定監測價值。

在本研究的102例早期宮頸癌患者中，經術后病理學檢查確診淋巴結轉移15例，占14.71%，與文獻［17］報道結果相似，進一步說明準確評估早期宮頸癌是否存在淋巴結轉移的重要性。由于早期宮頸癌的淋巴結轉移具有多向性和復雜性，是影響患者生存的重要因素，在確保手術治療效果的基礎上，減少不必要的淋巴結清掃術，是提高手術安全性、減少并發癥發生和促進術后康復的關鍵所在。本研究結果顯示，早期宮頸癌患者血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平均明顯升高，說明血清ANGPTL4、EPO聯合TSGF在預測早期宮頸癌發生淋巴結轉移方面具有一定作用。另外，淋巴結轉移組血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平均高于非淋巴結轉移組，經多因素Logistic回歸分析，發現三者均是早期宮頸癌患者發生淋巴結轉移的獨立預測因素。該結果提示早期宮頸癌血清ANGPTL4、EPO及TSGF表達水平與患者合并淋巴結轉移風險呈正相關。ROC曲線分析結果顯示血清ANGPTL4、EPO聯合TSGF預測早期宮頸癌患者發生淋巴結轉移的AUC為0.924，充分說明三者聯合預測淋巴結轉移的效能較好。究其原因可能是ANGPTL4、EPO和TSGF協同促進了癌細胞增殖、分化和癌灶局部新生血管生成，為癌細胞侵襲轉移創造了有利條件。但本研究存在樣本量不足、缺乏隨訪數據等局限，有待日后進一步深化研究。

綜上所述，血清ANGPTL4、EPO及TSGF水平聯合預測淋巴結轉移的效能較好，對于判斷患者的病情演變具有積極作用。有可能成為早期宮頸癌合并淋巴結轉移的輔助診斷標志，為研究宮頸癌的發病機制及治療靶點提供新方向。