3%氯氟吡啶酯乳油高效液相色譜分析方法研究

鄭 楊，李 巖

(黑龍江省植檢植保站，黑龍江 哈爾濱 150090)

1 前言

氯氟吡啶酯是美國陶氏益農公司開發的新型芳香基吡啶甲酸類除草劑，化學名稱為4-氨基-3-氯-6-(4-氯-2-氟-3-甲氧基苯基)-5-氟吡啶-2羧酸苯甲酯，CAS：1390661-72-9[1]，分子式：C20H14Cl2F2N2O3。主要用于直播稻、移栽稻及其他作物田，具有高效廣譜的除草活性，能有效防除水稻田主要禾本科、闊葉及莎草科雜草，可通過葉片和根部吸收，具有使用劑量低、對環境友好和其他生物安全等特點，與其他除草劑無交互抗性，是防除抗性雜草的優選藥劑[2]。

目前國內對氯氟吡啶酯制劑的液相分析方法尚未見報道。本文采用高效液相色譜法對氯氟吡啶酯進行定性和定量分析。該方法操作快速、簡便、準確，分離效果好，準確度和精密度均能達到定量分析的要求，適用于農藥產品含量分析。

2 試驗部分

2.1 試劑和溶液 乙腈：色譜純；水：超純水(電阻率18.2 MΩ·cm，25℃)；氯氟吡啶酯：98.62%，試樣：3%氯氟吡啶酯乳油。

2.2 儀器 高效液相色譜儀：Agilent1260，具有二級管陣列檢測器和自動進樣器，色譜工作站；色譜柱：250 mm×4.6 mm(i.d)不銹鋼柱，內裝Zorbax SB-C18、5 μm填充物；過濾器：濾膜孔徑約0.45 um。

2.3 液相色譜操作條件 流動相：乙腈∶水=70∶30(V/V)(0～12 min)；流量：1.0 mL/min；柱溫：30℃；檢測波長：245 nm；進樣體積：5.0 μL；保留時間：氯氟吡啶酯約9.2 min。

上述液相色譜操作條件，系典型操作參數，可根據不同儀器特點，對給定的操作參數作適當調整，以期獲得最佳效果。非分析物空白、標樣和樣品高效液相色譜圖(圖1～3)。

圖1 非分析物空白高效液相色譜圖

圖2 氯氟吡啶酯標樣高效液相色譜圖

圖3 3%氯氟吡啶乳油高效液相色譜圖

2.4 測定步驟

2.4.1 標樣溶液的配制 稱取氯氟吡啶酯標樣38.4 mg(精確至0.2 mg)，置于100 mL容量瓶中，加入乙腈溶解，超聲10 min，恢復至室溫后用乙腈稀釋至刻度，搖勻，過濾備用。

2.4.2 試樣溶液的配制 稱取試樣約1 311.5 mg(精確至0.2 mg)，置于100 mL容量瓶中，加入乙腈溶解，超聲10 min，恢復至室溫后用乙腈稀釋至刻度，搖勻，過濾備用。

2.4.3 測定 在上述操作條件下，待儀器基線穩定后，連續注入數針標樣溶液，待各針相對響應值變化≤1.5%時，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進樣測定。

2.4.4 計算 將測得的2針試樣溶液及試樣溶液前后2針標樣溶液中氯氟吡啶酯的峰面積值分別進行平均，試樣中氯氟吡啶酯的質量分數ω，按式(1)計算：

(1)

式中：

A1—標樣溶液中氯氟吡啶酯峰面積的平均值；

A2—試樣溶液中氯氟吡啶酯峰面積的平均值；

m1—標樣的質量，g；

m2—試樣的質量，g；

P—標樣中氯氟吡啶酯的質量分數，%。

3 結果分析

3.1 色譜條件的選擇 通過Agilent1260高效液相色譜儀的光譜數據采集功能，獲得氯氟吡啶酯的紫外吸收圖(圖4)。從圖中看到氯氟吡啶酯有3個吸收峰，分別在193、215、245 nm附近，根據樣品中各成分含量及出峰時間，為減少溶劑的干擾，兼顧較大吸收波長，將檢測波長定為245 nm。

圖4 紫外光譜吸收圖

色譜柱選擇常用的反相填料ZORBAX SB-C18柱。依據氯氟吡啶酯理化性質，使用乙腈為溶劑溶解樣品，選擇乙腈和水為流動相，按不同比例在色譜柱上進行選擇比較。經測定，當流速為1.0 mL/min時，在乙腈∶水=70∶30(V/V)條件下，氯氟吡啶酯能有效分離，出峰時間較為合適；峰形對稱，基線平穩，分析時間較短。

3.2 方法的線性相關性試驗 稱取氯氟吡啶酯46.3 mg(精確至0.2 mg)置于50 mL容量瓶中，用乙腈超聲溶解并稀釋至刻度，靜止備用。用移液管分別移取上述標準溶液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL于10 mL容量瓶中，用乙腈定容至刻度搖勻后備用。按上述條件進行測定，以進樣濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線。氯氟吡啶酯線性方程為y=10 440.021x+8.201，線性相關系數為0.999 99。線性相關性試驗結果(表1和圖5)。

表1 分析方法的線性相關性實驗結果

圖5 氯氟吡啶酯線性關系圖

3.3 分析方法的精密度試驗 在上述色譜操作條件下，對同一產品平行測定5個次，氯氟吡啶酯的標準偏差為0.05，變異系數為1.55%(表2)。

表2 分析方法的精密度試驗結果

3.4 分析方法的準確度試驗 按照配方比例要求，將除原藥以外的所有填料助劑混勻，做制劑空白，按照制劑標稱值在制劑空白中添加有效成分，合成5個制劑樣品，在上述色譜操作條件下進行分析，測得氯氟吡啶酯的平均加標回收率為99.97%(表3)。

表3 分析方法的準確度試驗結果

3.5 方法特異性 對樣品組分色譜峰進行峰純度試驗，通過工作站軟件計算匹配度，氯氟吡啶酯的峰純度因子為999.91，特異性符合要求。

4 結論

試驗建立了高效液相色譜法檢測3%氯氟吡啶酯乳油中有效成分的分析方法。上述試驗結果表明，氯氟吡啶酯在測試濃度范圍內線性關系良好，方法準確度和精密度較高，具有簡便、快速的優點，是產品質量控制的有效可行的分析方法。