農藥產品中順式二溴菊酰氯的分析方法研究

成夢可，尹秀娥，曹仲杰，奚 望

(沈陽沈化院測試技術有限公司，遼寧 沈陽 110021)

1 前言

溴氰菊酯是一種低毒、高效的擬除蟲菊酯類殺蟲劑，由于具有用量小、對光穩定、低殘留、廣譜性和高效性等特點得到廣泛應用于農林害蟲和衛生殺蟲的防治中[1-2]?？蓡为毷褂?，也可與其他有效成分配制成復配制劑使用。

順式二溴菊酰氯是溴氰菊酯有效成分的相關雜質，而農藥產品中的相關雜質是與有效成分相比，對人類和環境具有明顯毒害、或對施用作物產生藥害，或引起農產品污染，或影響農藥產品質量穩定性，或引起其他不良影響，因此，農藥中的相關雜質一直是農藥產品質量的重要控制指標[3-4]。

目前關于溴氰菊酯有效成分的分析方法有很多，主要有氣相色譜法[5]、正相液相色譜法[6]、反相高效液相色譜法[7]、超高效液相色譜串聯質譜法[8]、近紅外光譜法[9]、紫外分光光度法[10]。但是針對順式二溴菊酰氯雜質的分析方法研究較少，只檢索到一種一篇關于“溴氰菊酯乳油中順式二溴菊酰氯的高效液相色譜分析”[11]的相關文獻，該文獻中所述方法采用正相高效液相色譜法測定順式二溴菊酰氯，并且需要使用手性色譜柱，該方法適用范圍較窄，難于在復雜的制劑劑型和混配制劑中應用，且使用手性色譜柱分析成本極高?；诖?，本研究建立了一種反相高效液相色譜法對順式二溴菊酰氯進行定量分析，該方法僅需使用極其常見的甲醇和磷酸水溶液流動相和普通的C18色譜柱即可對復雜制劑中的順式二溴菊酰氯進行分離和定量檢測，大大降低了分析檢測成本、且具有簡單快捷、綠色環保的特點，為溴氰菊酯相關產品的質量控制和標準制定提供了有力的技術支撐。

2 實驗部分

2.1 試劑和溶液 順式二溴菊酰氯標樣：質量分數為98.2%；

12%氯蟲苯甲酰胺·溴氰菊酯懸浮劑：氯蟲苯甲酰胺含量為10%，溴氰菊酯含量為2%；

甲醇：色譜純；磷酸：色譜純；水：超純水；

0.1%磷酸水溶液：移取1.0 mL磷酸于盛有1 000 mL超純水的試劑瓶中，搖勻，超聲脫氣。

2.2 主要儀器 液相色譜儀：Thermo U3000型，具有二極管陣列檢測器；過濾器：濾膜孔徑約0.22 μm；

色譜柱：150 mm×4.6 mm (i.d.)不銹鋼柱，內裝Eclipse XDB C18，5 μm填充物；

分析天平：XS205 DU型，梅特勒-托利多實驗室稱量科技有限公司，精確至0.000 01 g；

超聲波清洗器；移液器。

2.3 色譜操作條件 流動相為甲醇和0.1%磷酸水溶液，按照(表1)進行梯度洗脫。

表1 流動相梯度

流速：1.0 mL/min；柱溫：30 ℃；檢測波長：220 nm；進樣體積：5 μL；保留時間：11.5 min。

順式二溴菊酰氯標樣溶液和12%氯蟲苯甲酰胺·溴氰菊酯懸浮劑試樣溶液的典型色譜圖(圖1、2)。

圖1 順式二溴菊酰氯標樣溶液的高效液相色譜圖

圖2 12%氯蟲苯甲酰胺·溴氰菊酯懸浮劑試樣溶液的高效液相色譜圖

2.4 測定步驟

2.4.1 標樣溶液的配制 稱取順式二溴菊酰氯標樣0.01 g(精確至0.000 01 g)于50 mL容量瓶中，加入40 mL甲醇超聲振蕩3 min，取出后冷卻至室溫，用甲醇稀釋至刻度，室溫下衍生化反應30 min，搖勻，此為標樣母液。移取0.5 mL上述母液于50 mL容量瓶中，甲醇定容，搖勻，此為標樣溶液。

2.4.2 試樣溶液的配制 稱取試樣約2 g(精確至0.000 1 g)于50 mL容量瓶中，加入40 mL甲醇超聲振蕩3 min，取出后冷卻至室溫，用甲醇稀釋至刻度，室溫下衍生化反應30 min，搖勻，過濾。

2.5 測定 在上述條件下，待儀器穩定后，連續注入數針標樣溶液，直至相鄰2針順式二溴菊酰氯衍生物的峰面積相對變化<5.0%后，按照標樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標樣溶液的順序進行測定。

2.6 計算 試樣中順式二溴菊酰氯的質量分數按式(1)計算：

(1)

式中：

ω——試樣中順式二溴菊酰氯的質量分數，%；

A2——試樣溶液中順式二溴菊酰氯的峰面積的平均值；

m1——標樣的質量，g；

p——標樣中順式二溴菊酰氯的質量分數，%；

A1——標樣溶液中順式二溴菊酰氯的峰面積的平均值；

m2——試樣的質量，g；

100——標樣溶液的稀釋倍數。

3 結果與討論

3.1 溶劑的選擇 本方法選用甲醇作為溶劑，同時作為順式二溴菊酰氯的衍生化試劑，順式二溴菊酰氯性質活潑，在甲醇溶液中很快轉化為順式二溴菊酰氯衍生物，通過測定順式二溴菊酰氯衍生物峰面積來計算順式二溴菊酰氯的含量。

3.2 色譜條件的選擇 通過二極管陣列檢測器的光譜數據采集功能獲得順式二溴菊酰氯衍生物的紫外吸收光譜圖(圖3)。選擇順式二溴菊酰氯衍生物的最大吸收波長(220 nm)作為檢測波長，以甲醇和0.1%磷酸水溶液為流動相進行梯度比例篩選。本研究最終確定的方法，空白溶劑和助劑在待測組分出峰位置不干擾檢測，待測組分峰純度值為99.9%，符合定量分析要求。

圖3 順式二溴菊酰氯標樣溶液的紫外吸收光譜圖

3.3 分析方法的特異性試驗 稱取約2 g的試樣(試樣中不含順式二溴菊酰氯)，加入已知量的順式二溴菊酰氯標樣，配制成一個含有已知順式二溴菊酰氯質量的模擬試樣溶液。對該模擬試樣溶液用二極管陣列檢測器進行光譜掃描，通過工作站軟件得到待測組分色譜峰純度為99.9%，表明分析方法的特異性符合要求(圖4)。

3.4 分析方法的線性關系試驗 配制一系列不同質量濃度的標樣溶液，按2.3方法進行測定，以順式二溴菊酰氯質量濃度為橫坐標，順式二溴菊酰氯衍生物峰面積為縱坐標繪制線準曲線，得到線性回歸方程為Y=8.394 1X+1.367 5，相關系數r=0.998 8。結果表明順式二溴菊酰氯在測試濃度范圍內線性關系良好(表2)。

3.5 分析方法的檢出限和定量限 將順式二溴菊酰氯標樣溶液按照一定的比例進行稀釋，直到待測組分的信號值為基線噪音的10倍時作為定量限濃度，繼續將定量限濃度的順式二溴菊酰氯標樣溶液進行稀釋，直到待測組分的信號值為基線噪音的3倍時作為檢出限濃度。

順式二溴菊酰氯的定量限濃度為0.599 μg/mL，檢出限濃度為0.200 μg/mL，定量限和檢出限譜圖(圖5、6)。

圖5 順式二溴菊酰氯的定量限譜圖

3.6 分析方法的準確度和精密度試驗 稱取試樣2 g，置于50 mL容量瓶中，再加入已知量的標樣，按2.4.2方法配制成一個含有已知量順式二溴菊酰氯的模擬試樣溶液，按2.3的方法測定試樣溶液中順式二溴菊酰氯的質量，將測得質量與理論加入質量進行比較，計算添加回收率。順式二溴菊酰氯的回收率在98.6%～102.7%之間，平均回收率為99%(表3)。

表3 順式二溴菊酰氯回收率試驗結果

將上述測定結果以順式二溴菊酰氯占試樣的質量分數表示，計算其標準偏差為0.000 09%，變異系數為1.9%，<霍爾茲方程計算值6.0%，結果表明該方法的精密度可以滿足定量分析要求(表4)。

表4 順式二溴菊酰氯精密度試驗結果

4 結論

本文建立了高效液相色譜法測定12%氯蟲苯甲酰胺·溴氰菊酯懸浮劑中的順式二溴菊酰氯雜質。實驗結果表明，該方法操作簡便，具有良好的線性關系、精密度和準確度，且靈敏度高，適用于12%氯蟲苯甲酰胺·溴氰菊酯懸浮劑中順式二溴菊酰氯相關雜質的質量控制。本文建立的分析方法，也可作為其他農藥產品中順式二溴菊酰氯檢測方法的開發依據。