超聲彈性成像在乳腺癌中的診斷價值及其與腫瘤細胞增殖凋亡基因的相關性分析

李正楠，張健，倪小京

海門市人民醫院1超聲科，2病理科，江蘇海門226100

有研究顯示，近年來，乳腺癌的發病率逐年增高，且呈現明顯的年輕化趨勢[1]。手術切除是治療乳腺癌的有效方法，但患者術后極易復發。因此，為了改善乳腺癌患者的預后并延長患者的生存期，早發現、早診斷對乳腺癌患者尤為重要。超聲、數字乳腺X線攝影及核磁共振成像等均為乳腺癌的常規診斷方法，并具有檢測效果明確、無創及不良反應少等優點[2]。但是，也有研究顯示，常規超聲對乳腺結節樣病灶的辨別難度較大，建議選擇超聲彈性成像進行診斷與鑒別[3]。目前，超聲彈性成像技術對于前列腺疾病、甲狀腺疾病等疾病的診斷效果較好，其作為一種新型超聲診斷技術，可通過比較病變組織加壓前后彈性信息超聲圖像的改變情況，對病變是否存在進行推斷，但是關于超聲彈性成像技術用于乳腺癌術前診斷的報道較少[4]。因此，本研究探討了超聲彈性成像在乳腺癌中的診斷價值及其與腫瘤細胞增殖凋亡基因的相關性，旨在為臨床乳腺癌的診斷提供參考依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2016年1月至2018年1月于海門市人民醫院就診的乳腺腫塊患者的臨床資料進行回顧性分析。納入標準：患者均經組織病理學檢查確診為乳腺良惡性腫瘤；患者均行超聲彈性成像檢查和病灶組織基因檢測。排除標準：乳腺膿腫、急性乳腺炎、乳腺囊腫等乳腺非實質性腫塊患者。根據納入和排除標準，本研究共納入80例乳腺腫塊患者，共102個病灶；患者的年齡為24～61歲，平均年齡為（48.54±12.13）歲。

1.2 超聲彈性成像檢查及評分

囑所有患者取仰臥位，充分暴露雙側腋窩和前胸，首先對患者行常規乳腺檢查，主要檢查患者乳腺病灶的形狀、大小、回聲情況，并推斷其與鄰近組織的關系，以及是否存在鈣化病灶等。然后通過彩色多普勒超聲檢查患者病灶的血流情況，待患者病情穩定后，對乳腺癌病灶進行超聲彈性成像檢查[5]。參考5分制改良評分法[6]對良惡性腫瘤進行評分：1分，病灶整體或大部分為綠色；2分，病灶中心為藍色，周圍為綠色；3分，病灶中心和周圍藍、綠色分布均勻；4分，病灶整體為藍色，其內有少許綠色；5分，病灶及周圍均為藍色，其內伴或不伴有綠色。其中，≥3分為惡性，＜3分為良性。

1.3 病灶組織基因檢測

取所有患者的病灶組織，Trizol試劑裂解；加入氯仿0.2 ml，離心10 min，離心速度為12 000 r/min。取上清并加入同體積的異丙醇混勻，沉淀總RNA；75%乙醇清洗RNA沉淀，去除乙醇溶液；紫外光吸收法測定RNA的濃度及純度；反轉錄得到cDNA；采用熒光定量聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）試劑盒檢測信號轉導及轉錄激活因子3（signal transduction and activator of transcription 3，STAT3）、存活蛋白（survivin）和B細胞淋巴瘤2（B cell lymphoma 2，Bcl-2）基因的表達水平；相應計算機軟件根據內參計算各基因mRNA的相對表達量[7]。

1.4 觀察指標

靈敏度=真陽性例數（/真陽性+假陰性）例數×100%；特異度=真陰性例數（/真陰性+假陽性）例數×100%；陽性預測值=真陽性例數（/真陽性+假陽性）例數×100%；陰性預測值=真陰性例數（/真陰性+假陰性）例數×100%。

1.5 統計學分析

采用SPSS 19.0軟件對數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗。以組織病理學診斷結果作為金標準，將超聲彈性成像結果與組織病理學診斷結果進行對照分析。采用Kappa一致性檢驗對超聲彈性成像診斷結果與組織病理學診斷結果的差異和一致性進行檢驗（Kappa值＜0.40，表示二者的一致性較差；Kappa值為0.40～0.75，表示二者的一致性尚可；Kappa值＞0.75，表示二者的一致性良好）。采用Spearman法分析良惡性腫瘤的超聲彈性成像評分與良惡性腫瘤細胞相關增殖基因mRNA相對表達量的相關性。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 乳腺組織病理學檢查結果

經組織病理學診斷后發現，102個病灶中，良性病灶41個，惡性病灶61個。良性病灶中，乳腺纖維腺瘤26個，導管內乳頭狀瘤15個；惡性病灶中，浸潤性導管癌52個，乳腺導管內癌4個，浸潤性乳頭狀癌3個，髓樣癌2個。

2.2 超聲彈性成像診斷

超聲彈性成像診斷良惡性病灶與病理組織診斷結果比較，一致性尚可（Kappa=0.461，P＜0.05）。超聲彈性成像診斷惡性病灶的靈敏度、特異度、陽性預測值和陰性預測值分別為81.97%（50/61）、63.41%（26/41）、76.92%（50/65）和70.27%（26/37）；診斷良性病灶的靈敏度、特異度、陽性預測值和陰性預測值分別為63.41%（26/41）、81.97%（50/61）、70.27%（26/37）和76.92%（50/65）。（表1）

表1 超聲彈性成像與病理診斷結果對照

2.3 良惡性腫瘤細胞相關增殖基因mRNA相對表達量的比較

惡性腫瘤中STAT3mRNA、survivinmRNA和Bcl-2mRNA的相對表達量分別為（180.11±25.54）、（130.41±13.50）、（150.46±20.14），均高于良性腫瘤中的（112.01±22.41）、（106.24±16.64）、（100.41±14.54），差異均有統計學意義（t=13.856、8.067、13.686，P＜0.05）。

2.4 相關性分析

102個病灶中，超聲彈性成像評分1分病灶20個，2分病灶17個，3分病灶32個，4分病灶33個。將良惡性病灶的超聲彈性成像評分與良惡性腫瘤細胞相關增殖基因mRNA相對表達量的相關性進行Spearman秩相關分析，結果顯示，良惡性病灶的超聲彈性成像評分與STAT3mRNA、survivinmRNA和Bcl-2mRNA的表達均呈正相關（rs=0.511、0.606、0.554，P＜0.05）。

3 討論

乳腺癌可對絕大部分女性患者的身心健康產生嚴重的負面影響，但由于乳腺癌組織缺乏神經支配，患者于患病前期常無明顯不適，多于體檢時發現，從而耽誤了最佳治療時機[8]。目前，臨床尚未發現與乳腺癌密切相關的腫瘤標志物，因此，主要通過影像學數據為臨床醫師對乳腺癌的診斷提供參考依據。

超聲和乳腺鉬靶X線檢查是臨床乳腺癌檢查的主要方法，其中，乳腺鉬靶X線檢查在乳腺疾病的診斷中較為常用，且其操作簡便，數據可靠，對患者造成的痛苦較少，并具有較高的分辨率[9]。此外，由于乳腺鉬靶X線檢查方法幾乎不受體型和年齡的限制，因此，目前其已成為乳腺體檢篩查和常規檢查的主要方法。但亦有研究顯示，盡管乳腺鉬靶X線對于邊緣浸潤、形態不規則、星芒狀的高密度腫塊及存在惡性鈣化或刺狀邊緣的乳腺腫塊均有較高的陽性預測值，但其對病灶鈣化相當敏感，具有一定的誤診率[10]。此外，乳腺鉬靶X線攝影存在一定的重疊圖像，并對乳腺的輻射較大，尤其是未婚和未生育的女性患者不宜進行乳腺鉬靶X線重復性檢查[11]。

隨著超聲彈性成像技術的不斷發展與進步，其在宮頸癌和胃癌中的應用逐漸廣泛，并具有較好的臨床診斷效能。超聲彈性成像能夠使以病灶前后回聲的位移變化信號形成實時彩色圖像，當彈性系數較大時，位移受壓變小后組織呈現藍色；當彈性系數較小時，位移受壓變大后組織呈現紅色[12-13]。影像科醫師可通過直觀的色彩對不同組織的彈性屬性進行觀察而進行鑒別診斷。

本研究結果顯示，經病理組織診斷，102個病灶中，良性病灶41個，惡性病灶61個。超聲彈性成像診斷良惡性腫瘤與病理組織診斷結果比較，一致性尚可（Kappa=0.461，P＜0.05）。超聲彈性成像診斷惡性腫瘤的靈敏度、特異度、陽性預測值和陰性預測值分別為81.97%、63.41%、76.92%和70.27%。上述結果均提示超聲彈性成像診斷乳腺良惡性腫瘤具有較高的靈敏度和特異度。由于惡性腫瘤組織的硬度較高，彈性較強，腫瘤細胞活動較慢，而良性腫瘤組織的彈性特點正好與惡性腫瘤組織相反，因此，超聲彈性成像可為臨床醫師診斷惡性腫瘤提供準確的數據參考依據。乳腺組織出現病變后，腫瘤細胞發生過度增殖，腫瘤組織的異常促進乳腺病灶組織硬度升高[14]。目前，以病理學檢查結果作為診斷良惡性腫瘤的“金標準”，但由于乳腺癌患者多為女性，其對無創檢查具有更高的傾向性，因此，超聲彈性成像在乳腺癌診斷中的應用價值更高。

基因的異常表達是導致組織發生惡變的根本原因，細胞增殖促進基因的表達對腫瘤的惡性程度具有直接的決定作用。有研究證實，STAT3、survivin、Bcl-2與胃癌和宮頸癌細胞的惡性增殖密切相關，激活STAT3信號通路可導致細胞的惡性轉化和異常增殖；survivin是重要的凋亡抑制蛋白，在多種腫瘤中高表達；Bcl-2是重要的原癌基因，可抑制細胞的凋亡，在骨髓瘤及白血病患者中均表達異常[15-16]。本研究結果顯示，惡性病灶中STAT3、survivin和Bcl-2mRNA的相對表達量均高于良性病灶（P＜0.05）；超聲彈性成像評分與惡性病灶中STAT3、survivin和Bcl-2mRNA的表達均呈正相關（rs=0.511、0.606、0.554，P＜0.05）。上述結果提示超聲彈性成像評分與腫瘤細胞增殖凋亡基因的表達具有相關性，也證實乳腺腫瘤患者腫瘤組織中的STAT3、survivin和Bcl-2mRNA表達異常，提示增殖基因可作為判斷乳腺腫瘤良惡性的重要指標。

綜上所述，超聲彈性成像在乳腺癌的診斷中具有一定的應用價值，同時超聲彈性成像評分與腫瘤細胞增殖凋亡基因的表達具有一定的相關性。