尿液分析儀在檢測男性外生殖器標本真菌中的價值

劉小平

(安徽中醫藥大學第一附屬醫院，合肥 230031)

男性外生殖器包括陰莖和陰囊。陰莖又分為龜頭、陰莖體和陰莖根。臨床上常見男性外生殖器處潮紅、炎性丘疹、脫屑和滲出物等，常為念珠菌感染導致。實驗室常采用鱗屑或分泌物直接鏡檢來輔助臨床診斷和鑒別診斷，但檢出率和準確率卻受很多因素影響，如實驗室方法、人員技術、取材方式及標本質量等。本研究收集161例皮膚科門診就診的男性患者外生殖器標本，應用尿液分析儀、熒光染色鏡檢及培養3種方法檢測真菌并對結果進行統計學比較分析。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2021年2月至2021年6月來自本院皮膚科門診男性外生殖器皮膚病患者161例，包括陰莖部136例和陰囊部25例。

實驗儀器 顯微鏡CX31(日本Olympus公司)；JD801真菌檢查圖文系統(南京大學)；尿液沉渣分析儀(日本SysmexUF-1000i)。

實驗試劑 真菌熒光染色液(批號20201010，有效期20211009)；安徽信靈檢驗醫學科技股份有限公司；沙堡弱平板(生產批號20210108、20210403，有效期3個月)鄭州安圖生物工程股份有限公司。

1.2 實驗方法

用鈍刀刮取或透明膠布粘貼患者外生殖器部位皮屑或分泌物放至加有1滴熒光染色液的載玻片上鏡檢。

旋開1支一次性男性拭子擦拭取材部位后再放回至試管中，以無菌操作方式分區劃線接種至沙堡弱培養基培養。再旋開1支一次性男性無菌拭子，向試管中加1 mL無菌生理鹽水，用蘸有無菌生理鹽水的拭子擦拭取材部位后，再放回至試管中充分混勻，用尿液分析儀檢測。

檢測方法對真菌的檢出率用率(%)表示。檢測方法間比較分析采用χ2檢驗，以P<0.05為差異有統計學意義。采用SPSS11.0軟件進行統計分析。

2 結 果

2.1 尿液分析儀散點圖

尿液分析儀采用紅色半導體激光技術、核酸染色技術及流式細胞術測定有形成分。產生3種類型信號，即提供大小信息的前向散射光信號(Fsc)、提供表面和內部復雜性信息的側向散射光信號(Ssc)及提供染色性信息的熒光信號(FI)形成脈沖信號波，形成不同的散點圖，如有酵母菌(YLC)存在的可能，分析儀上出現青色區域。根據散點圖提示來判斷有無真菌存在的可能,見圖1、2。

圖1 散點圖提示有真菌存在的可能圖2 散點圖提示無真菌存在的可能

2.2 161例男性外生殖器標本中真菌檢驗結果

161例男性外生殖器皮膚病患者標本中熒光染色鏡檢，檢出孢子或和菌絲的陽性33例，陽性率為20.5%；拭子鹽水液用尿液分析儀進行檢測，提示真菌陽性39例，陽性率為24.2%；拭子培養，念珠菌培養陽性35例，陽性率為21.7%。結果見表1，經統計學處理，尿液分析儀檢測提示率高于熒光鏡檢和培養檢出率，有統計學意義(χ2=17.11，P<0.05,χ2=15.71，P<0.05)。

33例熒光染色鏡檢真菌陽性中，分析儀檢測拭子鹽水液提示陽性33例，陽性率為100%；拭子培養出念珠菌26例，陽性率為78.8%。分析儀陽性提示率與熒光染色鏡檢率差異無統計學意義(χ2=10.9，P>0.05)。分析儀陽性提示率顯著高于培養檢出率，差異有統計學意義(χ2=16.33，P<0.05)；128例熒光染色鏡檢未檢出真菌中，分析儀檢測拭子鹽水液提示陽性6例，陽性率為0.05%(6/128)；念珠菌培養陽性9例，陽性率為0.07%(9/128)。尿液分析儀檢測提示率顯著低于培養檢出率，差異有統計學意義(χ2=16.33，P<0.05)。尿液分析儀散點圖真菌提示假陽性率為0%；假陰性率為0.02%(3/128)。結果見表1。

表1 3種檢查方法真菌檢驗陽性結果

3 討 論

陰莖頭和陰莖交界處為冠狀溝，此處脫落的上皮細胞、腺體分泌物、塵埃和尿液殘余物積聚可形成皮垢，易引起念珠菌感染導致發炎[1-2]。念珠菌性龜頭炎是皮膚性病科常見病，主要發生在龜頭部位，典型病例取鱗屑或分泌物直接鏡檢可找到大量的孢子和或假菌絲，但相當部分病例直接鏡檢為陰性。本研究應用3種檢測方法對161例皮膚科門診男性患者的外生殖器皮屑或分泌物的真菌進行了檢測，將尿液分析儀散點圖的提示結果與熒光染色鏡檢及培養結果進行比較，觀察分析儀對男性皮膚病患者外生殖器標本真菌的檢測情況，結果認為可以通過分析儀散點圖提示有無真菌存在的可能，再確定是否需要進行鏡檢和培養。文獻[3-4]分析了臨床尿培養標本中酵母樣真菌檢測陽性且同時檢測尿液常規分析的病例，以真菌鏡檢和培養結果為標準。尿液分析儀通常用于尿液分析，雖在一定程度上取代了鏡檢及尿液培養，能及早發報告，大大減少了人力和物力，但分析儀通過散點圖只能提示尿液中有無真菌存在的可能，還受尿液中其他成分的干擾，真菌孢子易被誤認為紅細胞和白細胞[5-6]。本研究用的拭子鹽水液則沒有類似尿液其他成分的干擾，可通過分析儀散點圖提示拭子鹽水液中有真菌存在的可能，33例熒光染色鏡檢陽性中，分析儀散點圖提示陽性率為100%(33/33)。有研究[6-7]將其檢測極限進行了評估，用生理鹽水把酵母菌臨床分離株稀釋成11種McFarland濃度，調至McFarland 0.5的菌液，所含酵母菌數為1.5×104/μL,UF-1000i自動尿液分析儀的檢測值為2 680 CFU/uL,相當于McFarland 0.5的酵母菌菌液稀釋1 000倍時,UF-1000i無法測出酵母菌的存在。指出UF-1000i與手工鏡檢結果的相關性極佳。33例熒光染色鏡檢真菌陽性中，拭子標本被培養出念珠菌僅26例，可能和患者就診前外用藥有關，特別是抗真菌藥[3]。128例鏡檢陰性者而培養陽性9例中，分析儀散點圖提示陰性3例(24.7%)，這可能與標本中菌含量少有關。有研究[6-7]發現鏡檢的高倍數視野(HPF)酵母菌平均少于1 CFU時,儀器無法測出。本研究的結果發現分析儀檢測拭子鹽水液，散點圖真菌提示假陽性率為0%；假陰性率為0.02%(3/128)，可認為分析儀散點圖只要提示有真菌存在時，可不需要熒光染色鏡檢和或培養證實。只有在分析儀散點圖提示真菌陰性且熒光染色鏡檢陰性情況下需要進行培養。換言之，分析儀檢測的散點圖陽性時可提示男性患者外生殖器皮屑及分泌物中有真菌存在，分析儀檢測的散點圖陰性不能說明男性患者外生殖器皮屑及分泌物中無真菌。分析儀檢測有操作簡便、快速靈敏重復性好及易于自動化等優點，被廣泛應用于疾病的診斷和鑒別診斷[3-4]，其自動化可用于多個樣本真菌檢測的篩查，還能選擇出需要進行培養的標本，能大大減少標本需要鏡檢和培養的頻次。值得注意的是拭子鹽水液制備必須用拭子用力擦拭患處及其邊界，盡可能地提高菌的數量。日常實驗室檢查順序應該是先熒光染色鏡檢，陽性可直接報告菌絲和或孢子；陰性者用分析儀檢測拭子鹽水液，分析儀散點圖提示陽性時需結合臨床或進一步培養。倡導所有臨床病例標本做培養，培養不但能鑒定菌株還能提供藥敏，對防止濫用抗生素減少耐藥菌株的發生具有重要價值。