基于耗散粒子動力學模擬輔助的納米結構脂質載體優化制備

趙雅平,解新安,李雁,李璐

(華南農業大學 食品學院,廣東 廣州,510642)

姜黃素類脂溶性生物活性物質有很強的生理活性,但由于它們自身結構的疏水性,基本不溶于水且穩定性很差,導致其應用受到限制[1-2]。納米結構脂質載體(nanostructure lipid carriers,NLC)是在固體脂質納米粒(solid lipid nanopaticals,SLN)的基礎上發展而來的一種具有特殊結構的納米脂質載體[3]。它在制備中使用液體脂質和固體脂質組成混合脂質作為油相,易形成不完美晶形,從而有負載率高、穩定性好及能夠控制活性物質釋放等突出優點[4]?；谝陨蟽烖c,目前NLC作為一種負載生物活性物質及營養物質的脂質載體在食品、醫藥、化妝品等方面都有廣泛的應用[5]。在NLC制備中,生物活性物質與載體原料及載體原料之間的相容性是影響體系穩定性和負載率的關鍵因素?；诖?近年來有很多的研究致力于NLC的工藝優化,通過單因素試驗、正交試驗等篩選優化實驗材料,使用差示掃描量熱(differential scanning calorimetry,DSC)、傅里葉紅外光譜(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)等方法對其相容性進行研究[6]。熊文慧[7]探究了番茄紅素的配方組成,得到了番茄紅素-單硬脂酸甘油酯-牡丹籽油-酪蛋白酸鈉的納米脂質體系,包封率高達(99.76±0.14)%,且穩定性較好,通過DSC和FTIR也表明番茄紅素可以很好地包埋在這個體系中。ARAUJO等[8]探究了固體脂質與液體脂質的比例對NLC結構的影響,使用2種不同的液體脂質探究與固體脂質的相容性,從而篩選出較優的液體脂質,并且證明在體系中加入表面活性劑吐溫-80利于形成更小的結構。但是這種實驗優化方法既費時又費力,對實驗結果也很難預測。因此,找到可以快速篩選材料種類以及配方配比的方法尤為重要。

分子模擬技術不僅能夠觀察到實驗可能產生的現象,而且可以探究實驗過程中分子間的相互作用機理,還能夠直觀地觀察到各個結構之間的連接狀態[9],因而在很多領域中得到廣泛關注和應用。耗散粒子動力學(dissipative particle dynamics,DPD)是分子模擬技術中的一種介觀模擬方法,用于模擬乳液、微乳液等復雜流體的行為,研究聚合物之間的聚集狀態和連接方式[10]。近年來,有研究者將其用于探究藥物分子與載體之間的相互作用,篩選適合特定藥物的載體物質,但在食品載體體系中運用DPD探究機理的研究很少。

據此,本研究選用符合國家食品安全標準的固液脂質原料和表面活性劑等,以姜黃素為負載營養物,利用DPD模擬來計算負載物與固液脂質以及表面活性劑之間的溶解度參數和相互作用力,預測它們的相容性來篩選適合的原料,再通過正交試驗驗證,并對制備的姜黃素NLC進行粒徑和微觀形態表征。研究結果可為NLC載運體系制備提供理論基礎及數據參考。

1 實驗部分

1.1 模擬方法

1.1.1 體系分子粗?；?/p>

在DPD模擬中首先要將體系中的分子進行粗?；?根據分子內官能團性質、體積等,將分子中的基團分成若干個珠子,并保持分子特性不變[11]。本實驗選用的固體脂質為單硬脂酸甘油酯,液體脂質為中鏈甘油三酯(medium chain triglycerides,MCT)油、葵花籽油、甜橙油,表面活性劑為卵磷脂、泊洛沙姆188、吐溫-80。將單硬脂酸甘油酯劃分為長鏈烴基(A)、極性基團(C)以及連接部分(B);表面活性劑具有兩親性,將卵磷脂劃分為親水基團(B、N、PS)和親油基團(A),泊洛沙姆分為(EO、PO)兩個珠子,吐溫-80分為親水基團(H、F、J)和親油基團(D);姜黃素是一個對稱結構,分成(Q、M)兩個珠子;分別用一個珠子代替MCT油(O1)、葵花籽油(O2)、甜橙油(O3)以及水(W)。各分子的粗?；鐖D1所示。

a-單硬脂酸甘油酯;b-中鏈甘油三酯;c-葵花籽油;d-甜橙油;e-大豆卵磷脂;f-泊洛沙姆;g-姜黃素;h-吐溫-80;i-水圖1 材料的分子結構及其粗?；疐ig.1 Molecular structure and coarse-granulation of materials

1.1.2 相互作用參數

對各組分粗?；瓿珊?用Materials Studio 6.0軟件中的Amorphous Cell模塊計算各珠子在298 K的溶解度參數以及各珠子的摩爾體積,進而計算珠子間的相互作用參數。

同種珠子之間的相互作用參數aiiρ=75kBT,當珠子密度ρ=3時,可得aii=25。珠子間的相互作用力aij與Flory-Huggins參數xij之間存在線性關系[12],如公式(1)所示:

aij=aii+3.27xij

(1)

式中:xij,Flory-Huggins參數。

主要用分子動力學計算溶解度參數的方法來求Flory-Huggins參數,其計算方式如公式(2)所示:

式中:δi和δj,各個珠子的溶解度參數;V,珠子的摩爾體積;R,理想氣體常數;T,熱力學溫度。

對于NLC中各珠子的溶解度參數和摩爾體積如表1所示:

表1 DPD模擬中各珠子的溶解度參數及摩爾體積Table 1 Solubility parameters and molar volume of beads in DPD simulation

根據表1中各個珠子的溶解度參數和摩爾體積,用公式(2)計算出Flory-Huggins參數,然后再進一步利用公式(1)計算出相互作用參數aij,結果如表2所示。

1.2 實驗方法

1.2.1 材料與試劑

單硬脂酸甘油酯(純度≥95%)、卵磷脂(純度≥90%),廣州市齊湘生物技術有限公司;中鏈甘油三酯,廣州耶商貿易公司;姜黃素(純度≥90%),上海源葉生物科技有限責任公司;無水乙醇,廣東光華科技股份有限公司。

1.2.2 儀器與設備

AH-BASIC高壓均質機,江蘇ATS工業系統有限公司;FJ200高速分散均質攪拌機,上海弗魯克流體機械制造有限公司;UV-2500紫外可見分光光度計,德國斯派克分析儀器公司;納米粒度及Zeta電位分析儀,英國Malvern公司;高速離心機,美國Beckman Coulter公司;MP41+MDX4光學顯微鏡,廣州市明美光電技術有限公司。

1.2.3 NLC制備

量取蒸餾水置于燒杯中,在水中加入表面活性劑卵磷脂,混勻即得到水相,備用。稱取姜黃素、單硬脂酸甘油酯和MCT油混合后,將混合物加熱到85 ℃(比固體脂質熔點高5 ℃)制得姜黃素懸液。將加熱后的油相立即與加熱到相同溫度的水相按比例混合,將混合液在14 000 r/min下剪切處理3 min后,利用高壓均質機在一定壓力下均質后迅速冷卻即得到NLC。

1.2.4 包封率的測定

姜黃素對照品:準確稱取姜黃素10.2 mg,置于100 mL棕色容量瓶中,無水乙醇溶解并定容至刻度,混勻,即得0.102 mg/mL的姜黃素溶液。

標準曲線繪制:精密量取上述姜黃素溶液100、200、300、400、500、600、700 μL于100 mL棕色量瓶中,加無水乙醇稀釋,定容、搖勻,即得1.02、2.04、3.06、4.08、5.10、6.12、7.14 μg/mL的系列標準溶液。以無水乙醇作空白,在432 nm處測定吸光度,以吸光度(A)對濃度(C)進行線性回歸。

包封率測定:將姜黃素脂質體溶液1 mL離心30 min,分離下層沉淀,加無水乙醇溶解定容至100 mL,測得姜黃素含量(A1);另外,將相同姜黃素脂質體溶液1 mL直接加無水乙醇溶解定容至100 mL,測得姜黃素含量(A2),包封率的計算如公式(3)所示:

包封率/%=A1/A2×100

(3)

1.2.5 NLC粒徑的測定

利用納米粒度及Zeta-電位分析儀測定姜黃素NLC的粒徑。樣品在測試前先使用去離子水對原乳液稀釋100倍,潤洗后吸取適量(約為比色皿的1/3)的待測液加入石英比色皿中,測試的參數為:水的折射率1.33,測試溫度25 ℃,每個樣品平行測定3次,取平均值。

1.2.6 NLC電位的測定

利用納米粒度及Zeta電位分析儀測定NLC的電位。樣品在測試前先使用去離子水對原樣稀釋100倍,潤洗后吸取適量(約恰好將比色皿裝滿)的待測液加入專用的比色皿中,測試參數為:水的折射率1.33,測試溫度25 ℃,每個樣品平行測定3次,取平均值。

1.2.7 NLC的微觀結構

將姜黃素NLC用去離子水稀釋10倍后,取15 μL的稀釋液滴到顯微鏡載玻片的中間位置并蓋上蓋玻片,靜置10 s,使用光學顯微鏡在10倍的放大倍數下觀察姜黃素NLC的微觀狀態,并用數字圖像分析軟件MS Shot軟件拍照保存圖像。

1.3 統計分析

本文涉及到的實驗和模擬如無特殊說明均進行3組平行實驗或3次模擬,使用Origin 2019 Pro軟件計算標準差并作圖,使用SPSS軟件對數據進行差異顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 液體脂質種類對NLC形成的影響

圖2是以單硬脂酸甘油酯為固體脂質,分別以MCT油、葵花籽油、甜橙油為液體脂質所得3種姜黃素NLC體系的聚集狀態以及截面圖。為了更好地觀察載體結構,隱藏了水分子。模擬中設置脂質總量占體系的9%(質量分數,下同),單硬脂酸甘油酯與液體脂質比例設置為1∶3(質量比,下同),液體脂質占總脂質含量的25%(質量分數,下同),姜黃素含量占脂質含量的1%。

a-MCT油NLC的聚集圖;b-葵花籽油NLC的聚集圖;c-甜橙油NLC的聚集圖;d-MCT油NLC的截面圖; e-葵花籽油NLC的截面圖;f-甜橙油NLC的截面圖圖2 不同液體脂質形成NLC的聚集圖與截面圖Fig.2 Aggregation and cross section of NLC formed by different liquid lipids

從圖2中可以看出,3個體系都能很好的聚集成球,但單硬脂酸甘油酯-葵花籽油NLC和單硬脂酸甘油酯-甜橙油NLC兩種體系所負載的姜黃素大部分分布在脂質載體的表面,而單硬脂酸甘油酯-MCT油NLC負載的姜黃素大部分被包埋在脂質載體中間,僅有少量在載體表面。從截面圖中也可以看出單硬脂酸甘油酯-MCT油體系形成的NLC更為緊密,這可能是由于MCT油作為一種通過化學合成方法獲得的油脂,溶解性、黏度、表面張力與天然的植物油有所區別,而且MCT油脂肪酸鏈長比較短,親水性也比較高,能夠更好地與單硬脂酸甘油酯結合[13]。

2.2 液體脂質含量對NLC形成的影響

液體脂質含量對NLC形成有很大的影響,液體脂質對營養物的溶解度比固體脂質要高,所以在脂質體系中液體脂質的含量越高,營養物的負載率就越高,但是液體脂質的添加量也不可以無限增加[14]。有研究表明,過高的液體脂質含量可能會造成營養物質的突釋,使營養物暴露在載體體系的表面,達不到最佳的效果[15]。根據上述實驗結果,選擇MCT油作為液體脂質,設置3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3(質量比,下同)的固液脂質比例,采用DPD模擬的方法,探究不同液體脂質含量對NLC形成的影響,以篩選單硬脂酸甘油酯-MCT油NLC中適合的固液脂質比例。

從圖3中可以看出,不同比例的固液脂質影響脂質載體的粒徑。固體脂質含量較高時,形成的脂質載體的粒徑較大,隨著液體脂質含量的增加,引起脂質載體表面張力的改變,粒徑變小。APOSTOLOU等[14]研究中表明固體脂質含量高時,顆粒大小有增加的趨勢。圖3所示,當固液脂質比例在1∶1時,形成的粒徑最小,但是所形成的球狀結構不規則。從截面圖中可以看出,固液脂質比例為3∶1和2∶1時,單硬脂酸甘油酯不只是分布在NLC的表面,在球狀結構的內部也存在。固液脂質比例在1∶2和1∶3時形成的球狀結構較好,但當比例為1∶2時,有少量的姜黃素分布在NLC的表面。熊文慧[7]的研究也表明,NLC載體體系中液體脂質含量越高時體系的平均粒徑越小,穩定性越好。麥琬婷等[16]的研究結果也表明液體脂質比固體脂質含量高時粒徑小、包封率和載藥量高。綜上所述,選擇1∶3作為合適的固液脂質比例。

a-3∶1比例形成的NLC聚集圖;b-2∶1比例形成的NLC聚集圖;c-1∶1比例形成的NLC聚集圖;d-1∶2比例形成的NLC聚集圖; e-1∶3比例形成的NLC聚集圖;f-3∶1比例形成的NLC截面圖;g-2∶1比例形成的NLC截面圖; h-1∶1比例形成的NLC截面圖;i-1∶2比例形成的NLC截面圖;j-1∶3比例形成的NLC截面圖圖3 不同固液脂質比例形成的NLC聚集形態圖及截面圖Fig.3 NLC aggregation morphology and section of different solid-liquid lipid ratios

2.3 姜黃素用量對NLC形成的影響

在制備納米結構脂質載體時,因營養物的加入會影響脂質載體的成型,營養物的添加量也是影響脂質載體結構及其性能的一個重要因素,用量過大或過少都可能會造成營養物的突釋,導致營養物分布不均甚至不能包埋在載體中[17]。設置姜黃素含量分別占脂質含量的1%、3%、5%(質量分數,下同)作為模擬條件,用DPD模擬探究不同含量的姜黃素對NLC形成的影響,結果見圖4。

a-姜黃素1%NLC的聚集圖;b-姜黃素3%NLC的聚集圖;c-姜黃素5%NLC的聚集圖;d-姜黃素1%NLC的截面圖; e-姜黃素3%NLC的截面圖;f-姜黃素5%NLC的截面圖圖4 不同姜黃素含量形成的NLC的聚集圖與截面圖Fig.4 Aggregation and cross section of NLC with different curcumin contents

從圖4中可以看出,在相同的盒子大小下,姜黃素添加量不同所形成的NLC的粒徑也有很大差別,姜黃素含量在3%時粒徑相對較小。在體系中加入的營養物會與其他組分相互作用,可能導致形成的脂質載體的形態各不相同,同時營養物添加量不同也可能導致其在脂質載體中的分布位置發生改變。根據已有文獻可知,營養物的添加量對載體體系的負載率影響較為明顯,李達鴻[18]探究了不同番茄紅素添加量對番茄紅素納米乳液包封率的影響,結果表明營養物添加量過低或過高都會導致負載率較低。在單硬脂酸甘油酯-MCT油體系中,姜黃素含量占脂質含量1%和3%時,姜黃素都基本上被包埋在NLC中。姜黃素含量過多就會使過剩的部分被排除到脂質載體的表面。營養物本身也是參與形成NLC的一個部分,所以適當的添加量不僅能夠形成良好的球狀結構,而且不會造成營養物浪費。

2.4 表面活性劑種類及用量對NLC形成的影響

為了使脂質載體更加穩定,在制備脂質載體的過程中通常會加入表面活性劑,以降低溶液的表面張力[19]。表面活性劑的種類包括離子型表面活性劑、非離子型表面活性劑以及兩親性表面活性劑。本實驗選擇卵磷脂、泊洛沙姆188、吐溫-80三種表面活性劑,探究其種類和用量對基于單硬脂酸甘油酯-MCT油的NLC體系形成的影響。

2.4.1 卵磷脂作為表面活性劑對NLC形成的影響

卵磷脂是一種兩親性表面活性劑,也是比較溫和的表面活性劑,它在分子的一端同時存在酸性基團和堿性基團[20]。卵磷脂的碳氫鏈可以鑲嵌入單硬脂酸甘油酯中,形成外殼包裹固體脂質和液體脂質,其親水基團帶有負電荷,與單硬脂酸甘油酯的羥基作用,產生靜電斥力來穩定體系[11]。從圖5中可以看出,卵磷脂在脂質載體表面分布比較均勻,在含量為4%時就能很好地將脂質載體覆蓋住,說明其是較適宜制備NLC的表面活性劑。卵磷脂含量也會影響脂質載體的聚集形態以及粒徑,當卵磷脂的含量升高至8%時,粒徑明顯增大,而且形成的球形結構沒有含量為4%和6%時好。

a-4%卵磷脂NLC的聚集圖;b-6%卵磷脂NLC的聚集圖;c-8%卵磷脂NLC的聚集圖;d-4%卵磷脂NLC的截面圖; e-6%卵磷脂NLC的截面圖;f-8%卵磷脂NLC的截面圖圖5 不同卵磷脂含量對NLC形成的影響Fig.5 Effects of different lecithin contents on NLC formation

2.4.2 泊洛沙姆作為表面活性劑對NLC形成的影響

親水親油平衡值(hydrophilic-Lipophilic Balance,HLB)表示表面活性劑分子中親水基和親油基之間的大小和力量平衡程度的量。泊洛沙姆188是一類HLB值為16的高分子非離子表面活性劑,有較強的表面活性,它的聚氧乙烯鏈具有相對親水性,聚氧丙烯鏈具有相對親油性[21]。從圖6中可以看出,3個不同濃度的泊洛沙姆188均與單硬脂酸甘油酯和MCT油混溶在一起,并沒有作為表面活性劑覆蓋在球形結構的表面,反而是姜黃素大都分布在表面。從表1的溶解度參數中可以看出泊洛沙姆188兩個珠子的溶解度分別為18.26、17.50(J/cm3)1/2,與單硬脂酸甘油酯和MCT油珠子的溶解度參數非常相近,這可能是導致這幾種物質混溶在一起,沒有形成球殼結構的原因。從模擬結果初步判斷泊洛沙姆188可能不適合作為單硬脂酸甘油酯-MCT油這一體系的表面活性劑。

a-4%泊洛沙姆NLC的聚集圖;b-6%泊洛沙姆NLC的聚集圖;c-8%泊洛沙姆NLC的聚集圖;d-4%泊洛沙姆NLC的截面圖; e-6%泊洛沙姆NLC的截面圖;f-8%泊洛沙姆NLC的截面圖圖6 不同泊洛沙姆188含量對NLC形成的影響Fig.6 Influence of different poloxamer 188 contents on NLC formation

2.4.3 吐溫-80作為表面活性劑對NLC形成的影響

吐溫-80是一種非離子型小分子表面活性劑,因其極易在油水界面展開,降低表面張力能力強,形成的脂質載體的粒徑也較小,且對pH和離子強度不敏感,因此在有關載體的制備研究中被廣泛使用[22]。本實驗在模擬時設置吐溫-80用量分別為4%、6%、8%,結果發現吐溫-80加入到脂質載體中后,與泊洛沙姆類似,也出現了與單硬脂酸甘油酯和MCT油的混溶現象。從表1溶解度參數中也可以看出,將吐溫-80根據性質劃分的4個珠子的溶解度參數與單硬脂酸甘油酯以及MCT油的溶解度參數數值相差不大,各個珠子之間的相互作用力也較小,所以極易混到一起,產生了圖7中所出現的混溶現象。ROHMAH等[23]以棕櫚硬脂和棕櫚油為固液脂質,以吐溫-80為液體脂質制備負載β-胡蘿卜素的納米結構脂質載體通過響應面法就可以得到粒徑為166 nm的良好載體體系,可能是由于棕櫚硬脂、棕櫚油與吐溫-80之間有較強的相互作用,能夠形成較好的球殼結構將β-胡蘿卜素包封在脂質載體中。

綜上所述,對于姜黃素-單硬脂酸甘油酯-MCT油體系來說,在這3種表面活性劑中,效果較好的是兩親性表面活性劑卵磷脂,能夠穩定在NLC的表面,從而形成很好的球殼結構。另外,從模擬結果可以看出,表面活性劑的含量并不是越高越好,較高的表面活性劑含量也會造成體系的不穩定。就卵磷脂而言,在姜黃素-單硬脂酸甘油酯-MCT油體系中含量到達8%時,體系粒徑增大,而且在表面分布不均勻,形成的球形也不規則,所以在選擇一種較好的表面活性劑的同時也要注意其用量。

2.5 負載姜黃素NLC的制備

根據DPD模擬得到的結果進行正交試驗。在制備NLC時采用高壓均質的方法,壓力的過大和過小都會對原料的物理、化學及結構性質產生不同的影響進而影響負載量,所以在正交試驗時將均質壓力也作為一個實驗因素。本實驗選用L9(34)正交試驗表,考察固液脂質比例、姜黃素含量、卵磷脂含量、高壓均質壓力4個因素對姜黃素負載率的影響,結果及分析如表4、表5所示。

表3 正交試驗因素水平表Table 3 Level table of orthogonal experimental factors

a-4%吐溫-80 NLC的聚集圖;b-6%吐溫-80 NLC的聚集圖;c-8%吐溫-80 NLC的聚集圖;d-4%吐溫-80 NLC的截面圖; e-6%吐溫-80 NLC的截面圖;f-8%吐溫-80 NLC的截面圖圖7 不同吐溫-80含量對NLC形成的影響Fig.7 Influence of different Tween-80 content on NLC formation

表4 正交試驗結果Table 4 Orthogonal experimental results

表5 正交試驗方差分析表Table 5 Analysis of variance of orthogonal experiment

從表4中可以得到RA>RB>RC>RD,表明這4個因素中,對姜黃素負載率影響大小順序是:固液脂質比例>姜黃素含量>卵磷脂含量>均質壓力,其中固液脂質比例對姜黃素負載率的影響較為明顯。從方差分析表5中可以看出固液脂質比例的sig.<0.05,說明固液脂質比例對姜黃素負載率的影響顯著,而其他因素的sig.>0.1,說明其他3個因素對姜黃素負載率影響較小。DPD模擬結果與正交試驗結果均表明固液脂質比例為1∶3,姜黃素占總脂質含量3%時形成的NLC效果最好。另外,在DPD模擬中發現,隨著卵磷脂含量的增大,形成的NLC的粒徑也隨著增大,最適宜的含量為4%,但在正交試驗中得到的最佳卵磷脂含量為5%。由于模擬中沒有設置卵磷脂含量為5%這一條件,所以根據正交試驗結果,選擇卵磷脂含量為5%,再次進行模擬,結果如圖8所示。從圖中可以看出以5%卵磷脂為乳化劑形成的姜黃素NLC結構更規則,姜黃素分布較集中,基本被包裹在脂質中心。ZHU等[24]也在研究中使用卵磷脂作為乳化劑代替蛋白,結果表明卵磷脂含量為5%和7%時提高了乳液的物理穩定性,降低了平均粒徑,提高了ζ電位值,特別是含量為5%的卵磷脂顯示出更高的脂肪消化率和程度。綜上,選定A2B2C2D1即固液脂質比例為1∶3,姜黃素含量3%,卵磷脂含量5%,均質壓力60 MPa作為制備姜黃素納米結構脂質載體的優化工藝條件。

a-聚集圖;b-截面圖圖8 卵磷脂含量為5%形成的姜黃素NLCFig.8 Curcumin NLC formed by 5% lecithin

2.6 姜黃素NLC的粒徑、Zeta電位及微觀形態

根據DPD模擬與正交試驗得到的最優原料配比進行NLC的制備。一般來說,粒徑<500 nm時,體系就可以被認定為納米結構。從圖9-a中可以看出,姜黃素NLC的平均粒徑在(233.8±2.4) nm,體系PDI值為0.19±0.2,表明制備的姜黃素NLC體系粒徑較小且均勻。圖9-b可以看出,新鮮制備的姜黃素NLC液滴清晰可見,分散均勻,體系中沒有明顯的液滴聚集現象。

a-粒徑分布圖;b-光學顯微鏡圖(×10)圖9 姜黃素NLC的粒徑分布圖及光學顯微鏡圖Fig.9 Particle size distribution and optical microscopy of curcumin NLC

使用納米粒徑及Zeta電位分析儀測定新鮮制備的姜黃素NLC的電位。王佳麗等[25]研究認為當Zeta電位低于-30 mV或者高于30 mV時,體系傾向于靜電穩定;當電位處于-30 mV～30 mV時,體系更容易聚集或凝結。本實驗制備的姜黃素NLC電位為(-38.2±0.6) mV,體系帶有比較高的表面負電荷,體系由靜電斥力以及空間位阻共同發揮作用對其進行穩定。

3 結論

本研究利用DPD模擬與正交試驗結合篩選適合制備NLC的固液脂質和表面活性劑等原料種類以及用量,并對其進行表征。結果表明:姜黃素在單硬脂酸甘油酯-MCT油脂質載體中能較好地包封在液體脂質中,不會明顯地暴露在表面;隨著液體脂質含量的增加,引起脂質載體表面張力的改變,粒徑也會隨之改變,固液脂質含量比例為1∶3時,形成NLC粒徑較小;姜黃素含量過多或過少都可能會造成NLC突釋,本實驗中選擇3%含量較為合適;在單硬脂酸甘油酯-MCT油脂質載體中,選擇4%的卵磷脂作為表面活性劑能很好地形成球殼結構附著在脂質載體表面;正交試驗結果表明模擬結果與實驗結果相符,因此選擇單硬脂酸甘油酯-MCT油-卵磷脂制備脂質載體,當固液脂質比例為1∶3,姜黃素含量3%,卵磷脂含量5%,均質壓力60 MPa時,姜黃素包封率最高為85.06%。此時NLC粒徑為(233.8±2.4)nm,Zeta電位為(-38.2±0.6)mV,微觀結構表明體系均勻分散,無聚集現象。