超聲提取堿韭總黃酮及其抗氧化活性研究

高雪峰,高健,門中華,董貴成,李丹妮,趙鵬*

1(內蒙古科技大學包頭師范學院 生物科學與技術學院,內蒙古 包頭,014030)2(河套學院 醫學系,內蒙古 巴彥淖爾,015000)

堿韭(AlliumpolyrhizumTurcz.ex Regel)又名堿蔥、扎蒙,是百合科(Liliaceae)蔥屬(Allium)多年生草本植物。分布范圍較廣,我國北方幾乎所有省區均有天然堿韭分布,資源豐富,開發利用潛力巨大。堿韭既是西北地區人們日常生活中一種常見的、獨特的調味品,又是蒙古族飲食文化中主要的野生蔬菜植物,常以腌制和“奶+蔬菜植物”方式食用。除作為一種風味獨特的綠色食品外,全草及種子均可入藥,有解毒、化瘀、消炎消腫、健胃、利尿等功效,具有抑制“赫依”、補血強身等作用,是一種藥食同源植物[1-2]。對堿韭藥理研究發現,黃酮類化合物是堿韭的主要活性物質之一[3-4]。黃酮類化合物具抗菌消炎、抗腫瘤、抗氧化、延緩衰老、調節人體分泌等多種功效,且安全性能高[5-10]。但黃酮類化合物屬于一類植物次生代謝物質,在人體內不能直接合成,必須通過食物或藥物攝入。如今人們對添加了黃酮類物質的保健食品的需求日益增加,對黃酮類化合物的種類和純度也有了更高的要求。從營養和藥用角度來看,不同種類的黃酮類物質的功能不同,且不同生物中所含的黃酮類物質的種類及含量差異較大。因此,對從不同天然植物中提取、分離、純化獨特的黃酮類物質,以及如何能夠高效地提取相關黃酮類化合物的研究備受關注。

天然植物中黃酮類化合物的提取方法很多,有單一提取法[11]、輔助提取法[12],還有多種方法的耦合提取法[13],其中超聲波作為一種新型、高效的技術手段,由于具有提取效率高、操作相對簡便等特點,受到研究者的廣泛關注。其原理主要是利用超聲波產生的振動、熱作用、空化效應及攪拌等作用,對植物樣品施加強壓以促進其細胞壁破壞,釋放出胞內物質,促使黃酮類物質從植物組織內部溶解出來,提高提取效率。此外,與其他提取方法相比,超聲波提取法可有效減少高溫影響,顯著縮短提取時間,具有安全性高和效率高的優點[14-17]。由于不同植物具有各自的獨特性,超聲波輔助提取法在提取黃酮類物質的實際應用中,對不同材料的具體操作工藝具有不同的要求,需要依據實際情況進行優化探索[18-19]。已有研究結果表明,實驗室常用的總黃酮的優選方法有單因素法、正交設計法、Box-Behnken響應面法等[20-21]。其中,響應面法考慮了試驗的隨機誤差,在尋優時可對各個水平進行連續性分析,可采用相應數學模型擬合,具有簡便、精度高等優點,應用廣泛[22-24]。堿韭作為一種具有巨大開發潛力的“藥食同源”植物,超聲波輔助提取法加以正交試驗、響應面法優化對其黃酮類化合物的提取效果如何,尚未見報道。試驗對天然堿韭總黃酮的提取工藝進行探索優化,并測定和分析堿韭總黃酮的抗氧化活性和還原能力,旨在為進一步充分開發利用堿韭提供科學依據。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

材料:天然堿韭于2021年8月采自鄂爾多斯市達拉特旗,采后將根、葉、花清潔并分離,室內自然陰干,經粉碎后過60目篩,密封低溫冷藏備用。前期研究發現堿韭黃酮主要存在于葉中,因此取堿韭葉進行提取工藝研究。

試劑:蘆丁標準品(純度≥98%),西安匯普森亞環生物科技有限公司;無水乙醇、抗壞血酸、鄰菲羅啉、鐵氰化鉀、FeCl3、AlCl3、無水乙酸鈉、冰乙酸(分析純),國藥試劑有限公司;DPPH,Sigma公司;ABTS、二丁基羥基甲苯、三羥甲基氨基甲烷,Rhawn公司;NaH2PO4、K2S2O8、雙氧水、鄰苯三酚,天津南開允公和成技術有限公司;Na2HPO4、FeSO4、三氯乙酸,濟南高達通達化工有限公司;實驗用水為二次蒸餾水。

儀器:N4S紫外可見分光光度計,上海儀電分析儀器有限公司;TB-114電子分析天平,河南信陵儀器設備有限公司;S30L數控超聲波清洗器,上海儀天科學儀器有限公司;H/T16MM臺式高速離心機,南北儀器有限公司;QE-200高速多功能粉碎機,上海羅納迪科學儀器有限公司;LGJ-10A真空冷凍干燥機,上海利薩德儀器制造有限公司。

1.2 試驗方法

1.2.1 堿韭總黃酮的提取及含量的測定

準確稱取1.0 g堿韭葉粉末,以乙醇為溶劑采用超聲波輔助提取法對堿韭黃酮進行提取。提取后過濾,收集濾液至棕色瓶中,得到試驗的樣品提取液。

依據前期堿韭總黃酮測定方法的研究結果,選擇乙醇作為提取溶劑進行超聲波輔助提取,采用AlCl3比色法[25]進行總黃酮含量測定并計算總黃酮提取率。測定條件為:將1 mL提取液置于10 mL具刻度試管中,加入0.1 mol/L的AlCl3溶液0.8 mL,再加入pH 4.4的NaAC-HAC緩沖液2 mL,用30%(體積分數)乙醇定容至10 mL,以1 mL蒸餾水代替樣品提取液作為相應的空白對照。搖勻后,室溫下靜置25 min,在405 nm下測定吸光度值。以蘆丁為標樣,回歸方程A=0.102 8c+0.007 4,相關系數R2=0.999 4。

總黃酮提取率按公式(1)計算:

式中:Y,總黃酮提取率,%;ρ1,標準曲線計算得出的待測液中總黃酮質量濃度,mg/mL;V1,測定樣品液體積,mL;V,樣品提取液總體積,mL;V2,顯色液總體積,mL;m,稱取堿韭粉末質量,g。

1.2.2 單因素提取方法

準確稱取1.0 g堿韭葉進行超聲波輔助提取,每個水平做3次重復。單因素及水平設定如下:

乙醇濃度(A):提取溫度60 ℃,提取時間20 min,料液比1∶40(g∶mL),功率300 W(固定反應條件)。對設定乙醇體積分數(10%、40%、60%、70%、80%)的黃酮提取率進行測定考察分析。

提取溫度(B):提取時間20 min,乙醇體積分數70%,料液比1∶40(g∶mL),功率300 W(固定反應條件)。對設定不同溫度(30、40、50、60、70 ℃)的黃酮提取率進行考察分析。

提取時間(C):提取溫度60 ℃,乙醇體積分數70%,料液比1∶40(g∶mL),功率300 W(固定反應條件)。對設定不同提取時間(10、20、30、40、50、60 min)的黃酮提取率進行考察分析。

料液比(D):提取溫度60 ℃,提取時間20 min,乙醇體積分數70%,功率300 W(固定反應條件)。對設定不同料液比[1∶10、1∶20、1∶30、1∶40、1∶50(g∶mL)]的黃酮提取率進行考察分析。

提取功率(E):提取時間40 min,提取溫度60 ℃,乙醇體積分數70%,料液比1∶40(g∶mL)(固定反應條件)。對設定不同功率(250、300、350、400、450 W)的黃酮提取率進行考察分析。

1.2.3 正交試驗優化總黃酮提取工藝

在單因素試驗基礎上,以總黃酮的提取率為指標,采用L16(45)正交試驗設計,見表1,確定乙醇濃度(A)、提取溫度(B)、提取時間(C)、料液比(D)和超聲功率(E)的最佳組合,從而對堿韭總黃酮的提取條件進行優化。

表1 總黃酮提取的正交試驗因素水平Table 1 Factors and levels of orthogonal experiment for total flavonoids extraction

1.2.4 響應面優化總黃酮提取工藝

在單因素試驗、正交試驗的基礎上,經顯著性分析,采用Design Expert 12.0建立5因素3水平的Box-Behnken模型,以乙醇濃度(A)、提取溫度(B)、提取時間(C)、料液比(D)和超聲功率(E)為試驗因素,總黃酮提取率為響應值,進一步確定最佳提取工藝,自變量因素編碼及水平(表2)。

表2 Box-Behnken試驗設計因素水平Table 2 Factors and levels of Box-Behnken experiment design

1.2.5 抗氧化指標測定

稱取堿韭葉、花、根粉末,按照最優提取工藝,得到各部位總黃酮提取液。提取液去乙醇后以真空冷凍干燥得到各部位總黃酮提取物。分別準確稱取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mg對照品維生素C和各部位總黃酮提取物溶于100 mL水中,配制0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mg/mL質量濃度梯度的維生素C溶液和各部位堿韭總黃酮溶液。分別以DPPH法、鄰二氮菲法、鄰苯三酚法、ABTS法對應測定DPPH自由基、·OH、·O2-、ABTS陽離子自由基清除率;以鐵氰化鉀法檢測其還原能力[26-27]。

1.3 數據分析

試驗結果以平均值±標準差表示,采用Design Expert 12.0、SPSS 20.0軟件統計分析試驗數據。采用Excel 2016軟件制圖。

2 結果與分析

2.1 堿韭總黃酮提取的單因素試驗結果

從堿韭總黃酮提取的單因素試驗結果(圖1)可以看出:從單因素的角度出發,70%乙醇體積分數為堿韭總黃酮提取最佳體積分數,最佳提取溫度60 ℃,最佳提取時間40 min,最佳料液比1∶30 (g∶mL),超聲功率400 W。利用SPSS 20.0軟件對單因素的5個因素進行方差分析,由表3可知,5個因素在單因素試驗中均P<0.01,差異極顯著。

a-乙醇體積分數;b-料液比;c-提取溫度;d-提取時間;d-提取功率圖1 各因素水平對總黃酮提取率的影響Fig.1 Effects of various factors and levels on extraction rate of total flavonoids

表3 單因素試驗方差分析Table 3 Variance analysis of single factor experiment

2.2 正交試驗優化堿韭總黃酮的提取工藝

正交試驗優化堿韭總黃酮的提取工藝如表4所示,提取工藝優化過程中,以L16(45)正交試驗設計,并對結果進行直觀分析。R值與該因素對提取率影響呈正相關。提取率受各因素的影響程度由大到小依次為:B>C>A>E>D。最佳工藝組合為A1B2C1D1E1,乙醇體積分數60%,提取溫度55 ℃,提取時間30 min,料液比1∶30(g∶mL),超聲功率250 W,在該提取條件下堿韭葉總黃酮提取率(4.86±0.11)%,相對標準偏差(relative standard deviation,RSD)為2.32%,表明精密度良好。

對正交試驗結果進行方差分析,結果如表5所示。通過F臨界值和F比可判定該因素對堿韭總黃酮提取率的差異顯著與否。5個因素均對堿韭總黃酮提取率的影響不顯著。

表4 正交試驗結果及直觀分析Table 4 Orthogonal experiment results and range analysis of extraction of total flavonoids

表5 正交試驗結果方差分析Table 5 Variance analysis of orthogonal experiment results

2.3 響應面法對提取工藝的優化

響應面法試驗結果見表6,為降低試驗中不可控制因素對試驗的干擾,中點試驗重復BLOCK設置為2個,由表可知試驗共有46個試驗點(包括40個因析點和6個零點),采用軟件Design Expert 12.0對所得數據進行回歸分析,分析結果見表7。

利用多元回歸擬合,得到總黃酮提取率(Y)與乙醇體積分數(A)、提取溫度(B)、提取時間(C)、料液比(D)和超聲功率(E)的回歸方程為Y(%)=4.680-0.136 5A-0.152 1B+0.057 9C+0.086 9D-0.124 4E+0.075 8AB+0.003 5AC+0.032 5AD+0.034 2AE+0.074 5BC-0.054 0BD-0.042 2BE+0.000 3CD+0.020 3CE+0.011 2DE-0.125 5A2-0.267 0B2-0.159 8C2-0.072 2D2-0.238 2E2,對該回歸方程進行方差分析,擬合度和可信度較高,該模型差異達到極顯著水平(P<0.01),失擬項不顯著(P>0.05),決定系數R2為0.84,變異系數值=3.42%<10.00%,可用于設計范圍內的預測。通過5個影響因素的F值大小可得各因素對堿韭葉總黃酮提取率的影響大小為:B>A>E>D>C。模型一次項中具極顯著水平(P<0.01)的有A、B和E,顯著水平(P<0.05)的有D;二次項A2達到顯著水平(P<0.05),B2和C2的回歸系數均達到極顯著水平(P<0.01)。響應曲面坡度陡峭與平滑程度對應因素改變敏感程度[28],各因素交互作用對堿韭葉中總黃酮提取率影響的等高線以及響應曲面如圖2所示。堿韭葉總黃酮的提取率受各因素交互影響作用不明顯。

表6 Box-Behnken試驗結果Table 6 Box-Behnken experimental results

續表6

表7 Box-Behnken試驗結果方差分析Table 7 Variance analysis of Box-Behnken experiment results

通過軟件對二次多項式回歸方程進行分析預測,堿韭葉總黃酮超聲波輔助提取法的最佳提取工藝條件:提取溫度50.00 ℃,提取時間39.30 min,乙醇體積分數62.28%,料液比1∶38.04 (g∶mL),超聲功率389.44 W,在該條件下堿韭葉總黃酮提取率為5.24%。結合實際操作情況,將最佳提取工藝再次優化改為:提取溫度50 ℃,提取時間40 min,乙醇體積分數60%,料液比1∶40 (g∶mL),超聲功率400 W,以此工藝建立的數學模型,設置6次重復驗證試驗,獲得的堿韭葉總黃酮提取率的實際測得值為(5.47±0.035)%,預測值為5.22%,RSD為0.65%。按照上述修正條件提取堿韭葉總黃酮,將提取液濃縮,冷凍干燥得到總黃酮粉末,按照AlCl3比色法檢測并計算純度,總黃酮純度(%)=堿韭葉總黃酮質量/堿韭葉總黃酮粉末質量×100,計算得堿韭葉總黃酮純度為(34.59±0.13)%。

a-乙醇體積分數和提取溫度;b-乙醇體積分數和提取時間;c-乙醇體積分數和料液比;d-乙醇體積分數和超聲功率; e-提取溫度和提取時間;f-提取溫度和料液比;g-提取溫度和超聲功率;h-提取時間和料液比; i-提取時間和超聲功率;j-料液比和超聲功率圖2 各因素交互作用總黃酮提取率的等高線與響應面圖Fig.2 Contour and response surface plots showing the interactive effects of extraction conditions on total flavonoids extraction rate

2.4 體外抗氧化活性檢測

2.4.1 堿韭總黃酮對DPPH自由基、ABTS陽離子自由基、·O2-和·OH的清除作用

如圖3所示,0.2～1.2 mg/mL堿韭總黃酮能夠有效清除DPPH自由基、ABTS陽離子自由基、·O2-和·OH,最高清除率分別為87.87%、98.86%、91.68%和98.35%。堿韭不同部位提取的總黃酮對DPPH自由基和ABTS陽離子自由基的清除作用隨濃度的增加而降低,對·O2-和·OH的清除作用則隨濃度的增加而增加。各部位總黃酮的總體清除效果為葉>花>根。在質量濃度≤0.4 mg/mL時,堿韭葉總黃酮對DPPH自由基的清除作用最佳,與維生素C清除效果相近(P>0.05)。經SPSS 20.0軟件計算堿韭葉、花、根總黃酮和維生素C對DPPH自由基清除的IC50值分別為2.490、1.116、0.555、5.543×10-11mg/mL。在質量濃度≤0.6 mg/mL,堿韭葉和花總黃酮對ABTS陽離子自由基的清除作用明顯,清除效果顯著高于維生素C(P<0.05)。IC50值分別為3.23、2.08、34.19、0.10 mg/mL。在質量濃度≥0.6 mg/mL,堿韭葉、花、根總黃酮對·O2-的清除作用均明顯高于維生素C(P<0.05)。IC50值分別為0.320、0.426、0.638、0.770 mg/mL。在質量濃度≥0.6 mg/mL,堿韭葉、花總黃酮對·OH的清除作用均高于維生素C,隨著濃度增加其清除效果顯著高于維生素C(P<0.05)。堿韭葉、花、根總黃酮和維生素C對·OH的IC50值分別為0.025、6.567×10-6、0.021、861.345 mg/mL。表明,堿韭黃酮對4種自由基均有一定的清除作用,葉和花的清除效果優于根。IC50值是指自由基清除率為50%時,抗氧化劑的濃度值,IC50值越小抗氧化能力越好。由IC50值可知,堿韭總黃酮的自由基清除能力十分顯著,對·O2-和·OH的清除率高于維生素C,清除效果優于對DPPH自由基和ABTS陽離子自由基的清除效果。

a-DPPH自由基清除率;b-ABTS陽離子自由基清除率;c-·O2-清除率;d-·OH清除率圖3 不同濃度堿韭總黃酮對自由基的清除率Fig.3 Free radical scavenging rate of total flavonoids from Allium polyrhizum Turcz.ex Regel at different concentration

2.4.2 堿韭總黃酮的還原能力

堿韭總黃酮的還原能力的測定結果如圖4所示。

圖4 不同濃度堿韭總黃酮的還原能力Fig.4 Reducing ability of total flavonoids from Allium polyrhizum Turcz.ex Regel at different concentration

在0.2～1.2 mg/mL,堿韭不同部位提取的總黃酮的還原能力隨濃度的增加而增加,通過試驗得出,提取物質量濃度與總黃酮還原能力存在劑量效益關系,隨著質量濃度在0.2～1.0 mg/mL范圍內的升高,堿韭總黃酮還原能力逐漸增強。各部位總黃酮的還原能力均大于維生素C,且還原能力為根>花>葉。

3 討論

天然堿韭在我國整個北疆分布廣泛,營養和藥用價值突出,其所富含的黃酮類化合物尤其引人關注[3, 29]。探索出安全高效、得率較高的提取工藝是堿韭黃酮有效開發利用的基礎。前期研究顯示,超聲波輔助提取堿韭總黃酮的方法效果較好且安全便捷[14-16]。試驗采用超聲波輔助提取堿韭總黃酮,通過單因素、正交試驗、響應面法分析,各因素對提取率的影響程度由大到小分別為:單因素:提取溫度>提取時間>料液比>乙醇體積分數>超聲功率;正交試驗:提取溫度>提取時間>乙醇體積分數>超聲功率>料液比;響應面法:提取溫度>乙醇體積分數>超聲功率>料液比>提取時間。影響堿韭總黃酮提取率的主要因素是提取溫度,這可能與溫度對平衡濃度的影響較大有關,溫度升高使質量傳遞過程加快,黃酮在堿韭表面的脫附作用增強,達到平衡的時間縮短[30],而溫度過高則引起黃酮類化合物結構被氧化破壞導致其提取率降低,這與響應面法提取溫度與提取時間的交互作用結果相一致。同時,溫度升高有助于加速超聲波產生的熱作用、空化效應等作用,促進其細胞壁破壞,釋放出胞內物質,提高黃酮的提取效率。對比正交試驗和響應面法,各因素對提取率的影響程度變化基本一致,唯一的差別在于提取時間,造成這種差異可能與提取時間在正交試驗中對總黃酮提取率的影響不顯著,在響應面試驗中與其他因素交互作用不明顯有關。由響應面曲線可以看出當提取時間在30～40 min時,黃酮提取率變化趨于平緩,變化幅度較小。

許多研究報道中對植物黃酮的提取采用乙醇熱回流法,但通過堿韭黃酮提取試驗[參照洋蔥最優試驗條件進行[31],準確稱取1.0 g堿韭葉粉加80%(體積分數)乙醇30 mL,在80 ℃下回流提取2.5 h,總黃酮提取率達(3.46±0.71)%]表明,無論是用正交試驗,還是用響應面法,黃酮提取率均極顯著(P<0.01)高于乙醇熱回流法,分別達到其1.55倍和1.74倍。由于溫度是影響堿韭總黃酮提取的主要因素,而乙醇熱回流法存在遇熱不穩定的情況,由此可能導致提取率較低且提取效果不穩定。超聲波輔助提取技術可有效解決這一缺陷,試驗穩定性和可重復性明顯提升。由試驗結果可知,響應面法總黃酮提取率較正交試驗提高了0.60%,極顯著優于正交試驗(P<0.01)。超聲波輔助提取可有效提高堿韭總黃酮的提取率,響應面法確定的提取工藝參數模型具有代表性,通過該法得到的總黃酮提取率高于同樣超聲波輔助提取法測得的《中國藥典》記錄植物韭菜籽[19]以及洋蔥[31]、沙蔥[32]的總黃酮提取率,能夠高效提取堿韭中的黃酮類化合物,且堿韭黃酮具有較高的開發利用價值。與其他提取方法相比,該法通過超聲波空穴作用和加速介質質點運動過程,促進乙醇穿透植物組織,使黃酮類物質獲得較高的加速度和動能,加速黃酮溶解于乙醇中?？捎行p少高溫影響,顯著縮短提取時間,具有安全性高和效率高的優點,隨著超聲波技術的不斷發展和完善,必將在天然產物有效成分提取領域發揮更大的作用。

自由基是影響細胞衰老凋亡的最重要的因素之一,如何有效清除體內過量自由基是營養學領域的一個研究熱點。IC50值可以有效評價黃酮類化合物的抗氧化活性,通常將IC50值低于10 mg/mL作為黃酮類化合物具有良好抗氧化活性的重要指標[33]。通過體外抗氧化活性試驗研究表明,堿韭總黃酮對4種自由基均有一定的清除作用,其中葉和花的清除效果優于根,這與堿韭總黃酮在不同部位的含量分布相一致。由IC50值可知,堿韭總黃酮對·O2-和·OH的清除率明顯高于維生素C,表明堿韭黃酮與維生素C相比,在清除不同自由基方面各有優劣,堿韭黃酮具有成為一種優質天然抗氧化劑的潛質,有望從食品抗氧化劑及防腐劑等方面得到開發利用。除了自由基清除能力以外,還原能力也是物質衡量抗氧化能力的重要指標。對堿韭不同部位還原能力測定結果顯示,堿韭葉、花、根提取的總黃酮的還原能力均大于維生素C,表明堿韭黃酮的抗氧化性總體上優于維生素C。然而,與總黃酮含量及對·O2-等4種自由基清除能力表現不同的是,堿韭各部分還原能力表現為根>花>葉的情況,根部黃酮含量低卻顯示出最高的還原力。這可能與堿韭不同部位黃酮類化合物的種類和分子結構不同有關。不同分子抗氧化的機制不同,如采用直接清除自由基、螯合金屬離子、抑制脂質氧化作用、激活體內抗氧化酶活性等[34]。如果根部黃酮類化合物分子的結構是某種高活力形式的分子,在不同的抗氧化性測定方法中,其有可能在含量低的情況下反而在某些抗氧化指標方面表現出高活性[35-36]。植物不同部位黃酮類化合物抗氧化性在不同指標上出現不同表現,這種情況不僅堿韭上如此,前人在沙蔥[32]、金蓮花[37]、粉綠鐵線蓮[38]等相關研究中均有類似報道。然而,堿韭黃酮類分子如何具體分類,不同黃酮分子實現抗氧化性的機制如何,許多研究目前還不夠清晰,需要進一步深入探討。

4 結論

試驗通過單因素、正交試驗、響應面法設計的綜合比較,確定了超聲波輔助提取堿韭總黃酮最佳提取工藝條件為:乙醇體積分數60%,提取溫度50 ℃,提取時間40 min,料液比1∶40 (g∶mL),超聲功率400 W。此時總黃酮提取率可達(5.47±0.035)%。該法優于傳統乙醇熱回流法,與其他提取方法相比,具有減少高溫影響,安全性能高,提取時間短的優勢。體外抗氧化活性研究表明,堿韭總黃酮有較強的體外抗氧化作用,能夠有效清除DPPH自由基、ABTS陽離子自由基、·O2-和·OH,對·O2-和·OH的清除效果優于對DPPH自由基和ABTS陽離子自由基的清除效果,葉和花的清除效果優于根。各部位總黃酮的還原能力均大于維生素C,且還原能力根>花>葉。天然堿韭總黃酮含量較為可觀,有較強的體外抗氧化作用,且資源量充足,是一種值得開發利用的藥用和食用植物資源。本試驗為進一步分離、鑒定黃酮單體成分和其生物活性成分提供最優提取方案。在后期的研究中可以使用堿韭葉作為研究對象進行總黃酮的提取,并進一步研究發掘堿韭總黃酮的其他生物功效,為堿韭黃酮的深入開發利用提供理論依據和實踐參考,也可為其他植物中的黃酮類化合物提取提供有益參考。