增菌
- 改良增菌條件應用于Soleris系統對食品中沙門氏菌的檢驗
驗的操作程序,其增菌步驟采用胰蛋白胨大豆肉湯(trypticase soy broth,TSB)于36 ℃培養24 h。隨后將增菌培養物以1.0 mL體積轉移到氯化鎂孔雀綠肉湯(Rappaport-Vassiliadis broth,RV)中42 ℃選擇性增菌 8 h。相較于使用TSB的增菌方法,我國國家標準方法中緩沖蛋白胨水(buffered peptone water,BPW)的使用更廣泛,配制成本也更低廉。本試驗以保證Soleris系統沙門氏菌檢驗檢
中國調味品 2023年11期2023-11-22
- 5 種致瀉大腸埃希氏菌不同濃度下的國標法檢出率分析
、營養肉湯、腸道增菌肉湯、麥康凱瓊脂（MacConkey Agar，MAC）、 伊紅美藍瓊脂（Eosin-Methylene Blue，EMB），均購于廣東環凱微生物科技有限公司。1.2 儀器與設備恒溫培養箱，上海一恒科學儀器有限公司；Bio-II-Advance4 生物安全柜，Telstar；微量移液槍（10 ～100 μL、100 ～1 000 μL），eppendorf。1.3 實驗方法1.3.1 前增菌將5 種致瀉大腸埃希氏菌標準菌株分別接種于BH
食品安全導刊 2023年28期2023-11-11
- 變質食物中的微生物是這樣被檢驗出來的
禍首”了。增 菌增菌，顧名思義就是增加細菌的數量。食品中病原菌的數量較少，想要針對其進行研究，就必須想辦法使其大量繁殖。檢驗人員一般會選取多份25克的食品樣品，采用能抑制多數非病原菌生長的選擇性增菌培養基，將樣品分別放置在相應的選擇性增菌培養基中，進行培養。病原菌對于營養的需求各有特點。比如，金黃色葡萄球菌耐受高濃度鹽的環境，可以在7.5%濃度的氯化鈉肉湯中生存繁殖。想分析食物中毒是不是金黃色葡萄球菌導致的，就可以用高鹽環境的培養基，進行細菌增殖，而其他不
食品與健康 2023年9期2023-09-20
- 低溫乳制品中沙門氏菌實時熒光PCR檢測方法體系的建立
求較高，需要2步增菌，時間較長[16]。本研究是要建立一套更嚴格、簡單、適合企業操作的沙門氏菌實時熒光PCR方法，以滿足低溫乳制品生產加工過程及終產品快速放行、及時糾偏的需求，提高致病菌檢測技術能力，降低食品安全風險。1 材料與方法1.1 材料與試劑ATCC 14028鼠傷寒沙門氏菌、CICC 21498鴨沙門氏菌、CMCC（B）50071傷寒沙門氏菌、CMCC（B）50093甲型副傷寒沙門氏菌、CMCC（B）50094乙型副傷寒沙門氏菌、CMCC（B）5
食品安全導刊 2022年19期2022-07-22
- 糞便沙門菌、志賀菌和副溶血弧菌分離培養方法研究
放置時間以及使用增菌肉湯時的增菌時間關系到檢驗分析前和分析中的質量控制，與檢出率密切相關。本文就糞便懸液放置溫度、放置時間以及增菌肉湯增菌時間對沙門菌、志賀菌和副溶血性弧菌檢出率的影響進行研究，以期優化糞便的分離培養方法，現將結果報道如下：1 材料與方法1.1 菌株 沙門菌、志賀菌和副溶血弧菌各20株。其中標準菌株或室間質評菌株16株，來源于國家或廣東省衛計委臨床檢驗中心，包括腸炎沙門菌ATCC13076等6株沙門菌、福氏志賀菌ATCC51572等7株志賀
海南醫學 2022年12期2022-06-30
- 食品中單核細胞增生李斯特氏菌 改良增菌液的研究
驗[14]。李氏增菌肉湯（LB1）為選擇性增菌液體培養基，含有萘啶酮酸，廣譜抗菌，尤其對革蘭氏陰性桿菌的抑制生長能力明顯[15]。但單純的選擇性富集培養基可能不利于損傷的單核細胞增生李斯特氏菌恢復。因此，對于受到非致死性損傷的單核細胞增生李斯特氏菌需要高營養的選擇性培養基進行恢復。丙酮酸鈉有助于受損細胞的修復[16]。酵母浸膏中富含蛋白質、氨基酸類、肽類、核苷酸、B族維生素和微量元素，能夠補充氮源和提供微生物生長的多種維生素、氨基酸及生長因子[17]。本研
現代食品 2022年9期2022-06-16
- 酸奶弱后酸化菌株搖瓶增菌工藝及發酵罐擴培試驗
菌株的選育、廉價增菌培養基的篩選、細胞增菌培養；菌體細胞濃縮分離；高效保護劑篩選與干燥工藝；高效直投式發酵劑的貯藏穩定性等。本實驗室研究人員前期對弱后酸化乳酸菌株進行選育，并對選育的菌株進行廉價增菌培養基的篩選。關于乳酸菌細胞增菌培養技術，考慮到乳酸菌生長繁殖速度較快，采用分批式培養，對培養設備要求簡單，易于控制。為獲得高濃度細胞培養物，采用分批補料式培養，主要有化學中和法、緩沖鹽法、膜滲析法?；瘜W中和法可獲得高密度菌體，簡便易行，是目前應用最廣泛的一種方
中國食品學報 2022年1期2022-02-18
- 單增李斯特菌國標檢驗培養基質量的比較
016中使用李氏增菌肉湯（LB1、LB2）對食品中可能污染的單增李斯特菌進行兩步選擇性增菌，再劃線到 PALCAM 瓊脂培養基和李斯特氏菌顯色培養基上對可疑菌落進行分離，并進行生化鑒定。其中 LB1、LB2增菌肉湯和選擇分離培養基是影響單增李斯特菌分離效果的重要因素。GB 4789.28-2013《食品微生物學檢驗培養基和試劑的質量要求》[15]（以下簡稱 GB 4789.28-2013）選用了一株單增李斯特菌（ATCC19115）和2株非目標菌（大腸埃希
現代食品科技 2022年1期2022-02-15
- 基于LAMP技術檢測速凍肉糜類制品中單增李斯特菌的增菌方法研究及應用
，其中復雜成分對增菌、DNA提取、后續LAMP反應的影響尚不明確。本研究基于已建立的速凍肉糜類制品單增李斯特菌LAMP檢測技術基礎上，通過四種增菌培養基的比較，篩選出一種增殖效果最佳的增菌培養基，以降低LAMP方法的檢出限，并實現單增李斯特菌LAMP檢測方法在速凍肉糜類制品中的應用，預期一個工作日完成檢測，以期為食品企業快速檢測速凍肉糜類制品中單増李斯特菌提供技術支撐。1 材料與方法1.1 材料與儀器單核細胞增生李斯特氏菌（Listeria monocyt
食品工業科技 2021年24期2021-12-16
- 細菌培養法與熒光定量聚合酶鏈反應(FQ-PCR)對妊娠晚期B族鏈球菌篩查的應用價值比較
規檢測前進行標本增菌培養對GBS感染檢出率的影響，報道如下。1 資料和方法1.1 一般資料本次研究對象均為接受GBS感染篩查的妊娠晚期孕婦，共計300例，納入時間介于2019年3月—2019年9月，產婦孕期介于35周～37周之間；年齡介于22歲～41歲之間，平均年齡為（29.72±1.30）歲。納入標準：孕周經B超核實相符；一周內無性生活；兩周內無抗生素藥物治療史；不存在陰道流血癥狀；單活胎；孕婦對本研究知情同意；經本院倫理委員會批準。排除標準：取樣部位曾
生物醫學工程學進展 2021年2期2021-07-02
- 不同檢測方法對妊娠晚期B族鏈球菌的篩查比較
選擇性肉湯培養基增菌進行前后檢測，并統計分析各方法的檢測結果，為臨床不同GBS檢測需求提供合理的檢測方案，現報道如下。1 資料與方法1.1 一般資料選取2018年4月～2019年7月于深圳市鹽田區人民醫院接受產檢的702例妊娠晚期孕婦作為研究對象，年齡22～39歲，平均（28.3±3.9）歲；孕齡35.2～37.1周，平均（35.9±0.6）周。納入標準：35周≤孕齡＜38周；孕婦知情同意且簽署同意書。排除標準：1周內使用過抗菌藥或陰道周圍外用清洗劑的孕婦
中國當代醫藥 2021年14期2021-06-26
- 一種軟水鹽的抑菌效果研究
不同濃度軟水鹽的增菌肉湯結果(培養24 h)圖2 大腸桿菌接種到含不同濃度軟水鹽的增菌肉湯中的平板結果表1 大腸桿菌接種到含不同濃度軟水鹽的增菌肉湯中的結果從表1可見，26.5%的軟水鹽抑菌效果較好，大腸桿菌完全不生長。最初接種到200 mL含26.5%軟水鹽培養液的大腸桿菌濃度為1.2×103CFU/mL,經過24 h的培養，細菌濃度不但沒有增加，下降至0，說明26.5%的軟水鹽殺菌效果較好。6.6%軟水鹽，同樣最初接種到200 mL含6.6% 軟水鹽培
鹽科學與化工 2021年5期2021-06-17
- 不同檢測方法在孕婦B 族鏈球菌篩查中的應用效果比較
。選擇性T-H 增菌肉湯由英國OXOID 公司提供。1.3 方法1.3.1 標本采集 對所有孕婦均采集其陰道和肛周分泌物標本。陰道和肛周分泌物樣本采集的位置在陰道口1/3 處、括約肌上面3 cm 左右處。使用無菌拭子,小心旋轉1 圈取得分泌物樣本。1.3.2 樣本檢測 采集樣本分別采用常規細胞培養法、顯色培養法及熒光PCR 法進行GBS 篩查,并以T-H 肉湯增菌培養法為參考標準。①常規血瓊脂培養法：將標本接種至哥倫比亞血瓊脂培養基上,分區劃線后,放入CO
中國現代藥物應用 2021年10期2021-06-12
- 食品中單核細胞增生李斯特氏菌能力 驗證結果及分析
、試劑及耗材李氏增菌肉湯（LB1、LB2）基礎（陸橋）、LB1及LB2添加劑（陸橋）；李斯特氏菌顯色培養基（科瑪嘉）、PALCAM 瓊脂培養基（環凱）、羊血瓊脂平板（陸橋）、TSA-YE 瓊脂培養基（陸橋）、SIM 培養基（陸橋）、單核細胞增生李斯特氏菌生化鑒定盒（環凱）；VITEK 2 革蘭氏陽性細菌GP 鑒定卡（梅里埃）。1.3 儀器及設備立式壓力蒸汽滅菌器（YXQ-LS-50SII）、電熱恒溫培養箱（BPX-272）、生化培養箱（BSP-150）、生
現代食品 2021年6期2021-05-18
- 嬰幼兒奶粉中阪崎腸桿菌增菌培養對PCR快速檢測的影響
是對待檢樣本進行增菌培養[16-17]。據調查，實際流通食品中致病菌的含量通常較低，多數奶粉中阪崎腸桿菌的污染水平小于1 CFU/100 g[18]，目前與阪崎腸桿菌相關的快速測方法都達不到如此低的檢出限。已報道的基于DNA檢測的阪崎腸桿菌快檢方法的檢出限達到103CFU/mL（g）[19-20]，因此，采用傳統的增菌培養方法對目標菌進行增殖，使其快速達到一定的數量是目前各快速檢測方法必不可少的關鍵步驟。據報道，阪崎腸桿菌的最適生長溫度為35～40℃，在3
中國乳品工業 2021年11期2021-03-31
- 嬰幼兒奶粉中阪崎腸桿菌增菌培養對PCR快速檢測的影響
是對待檢樣本進行增菌培養[16-17]。據調查，實際流通食品中致病菌的含量通常較低，多數奶粉中阪崎腸桿菌的污染水平小于1 CFU/100 g[18]，目前與阪崎腸桿菌相關的快速測方法都達不到如此低的檢出限。已報道的基于DNA檢測的阪崎腸桿菌快檢方法的檢出限達到103CFU/mL（g）[19-20]，因此，采用傳統的增菌培養方法對目標菌進行增殖，使其快速達到一定的數量是目前各快速檢測方法必不可少的關鍵步驟。據報道，阪崎腸桿菌的最適生長溫度為35～40℃，在3
中國乳品工業 2021年11期2021-03-31
- 濃縮配制BPW增菌液對沙門氏菌檢測效果的影響
法中都缺少不了前增菌步驟。在《食品安全國家標準 食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗》 （GB 4789.4—2016）中要求使用傳統分離法進行沙門氏菌檢驗：取25 g/mL樣品置于225 mL BPW中（36±1）℃培養8～18 h進行非選擇性前增菌后再經二次選擇性增菌，最后進行分離檢測[5]。因此，需要提前配制大量BPW增菌液并每份分裝225 mL，經121 ℃，15 min滅菌處理后備用，如先大量配制經滅菌后再分裝會導致因容量過大而造成滅菌不徹底，直接購買
食品安全導刊 2021年36期2021-03-14
- 不同培養基在沙門氏菌檢驗中的檢出效果觀察
究，本文主要針對增菌后在不同培養基中對沙門氏菌檢出效果進行分析。1.材料1.1 標本來源選取2018 年1 月—12 月在陽江市人民醫院因急性腹瀉送檢的肛拭樣本200 例，納入標準：患者糞便如水樣便、稀便、膿血便、黏液便；大便鏡檢白細胞≥5/高倍視野）、可見紅細胞和巨噬細胞；不考慮采集樣本前患者是否使用過抗菌藥物。1.2 儀器與試劑SBG增菌液、木糖賴氨酸Tergitol 4（XLT4）培養基、SS平板、木糖賴氨酸脫氧膽鹽（XLD）、沙門菌顯色培養基（CA
醫藥前沿 2020年20期2020-11-10
- 3種改良B族鏈球菌檢測方法的檢測效果比較▲
告，選擇性的肉湯增菌能提高GBS的陽性檢出率[5]，而免疫層析法、PCR法可快速檢測GBS，且檢出率相對較高[4-5]。美國疾病預防控制中心推薦的檢測方法是先對樣本進行增菌，再進行再次培養或者抗原、核酸檢測[6]。但在實際工作中，對樣本增菌后再進行抗原及核酸檢測費時費力，成本高，因此很少采用該方法。本研究結合本院GBS檢測開展情況及相關文獻，比較采用不同方法進行直接檢測及增菌后檢測的檢測效果，為臨床GBS檢測需求提供合理的方案。1 資料與方法1.1 臨床資
廣西醫學 2020年18期2020-10-28
- 圍產期孕婦B群鏈球菌三種篩查方法的評估
檢測標本，也可對增菌或分離后的標本進行檢測，有報道稱其敏感性較顯色肉湯增菌培養法提高10%～15%[5]。為了對上述GBS篩查方法進行合理評估，筆者對1063份圍產期孕婦生殖道或直腸標本進行同時檢測，以顯色肉湯增菌培養法作為GBS篩查的“金標準”，對Xpert GBS LB法、免疫層析法和普通培養法進行診斷效能評價。1 材料與方法1.1研究對象 選取2019年4—6月湖北醫藥學院附屬醫院產科門診行GBS篩查圍產期孕婦(35～37周)1063例,年齡21～4
臨床誤診誤治 2020年7期2020-07-29
- 一種快速鑒別牛肉中大腸桿菌O157∶H7檢測方法的建立及應用
N公司，新生霉素增菌肉湯購自北京陸橋公司，PCR儀為美國ABI公司，電泳儀、凝膠成像系統均為上海天能公司，酶標儀為西班牙基立福公司。1.3PCR引物設計與合成 以大腸桿菌O157∶H7的菌體抗原基因rfbE[17-18]為目的基因，參考陳雅君等[19]報道的引物序列(表1)，委托金斯瑞生物技術有限公司合成。表1 rfbE基因引物序列及預計擴增長度 Tab.1 Primer sequence of rfbE and expected amplificatio
中國人獸共患病學報 2020年4期2020-05-08
- 通過突變甲醇脫氫酶啟動子提高甲基營養菌吡咯喹啉醌產量
2 株突變菌株在增菌培養基中MDH 活性下降，PQQ 合成水平高于J1-1，且在生長穩定期（96 h）PQQ 合成水平較起始菌株J1-1 分別提高約9.76%和11.6%。1 材料與方法1.1 材料甲基營養菌J1-1、質粒pCM66-lacZ、自殺質粒pGX 由本實驗室保存；大腸桿菌DH5α、λ-pir感受態購自上海唯地生物技術有限公司；快速質粒小提試劑盒購自北京天根生化科技有限公司；限制性內切酶、瓊脂糖凝膠DNA 回收純化試劑盒購自Thermo 公司；D
生物技術通訊 2019年5期2019-12-25
- 禽沙門氏菌鑒別培養基和PCR檢測方法的建立
品，分別經BPW增菌，SC和TTB分別增菌后，再利用XLD鑒別培養基培養后，利用PCR方法進行沙門氏菌的分離鑒定。同時，所有樣品均按照國家標準檢測方法(國標法)進行沙門氏菌的分離鑒定。結果顯示，本研究建立的沙門氏菌快速檢測方法與國標法相比，沙門氏菌檢出率均為41.2%，吻合率100%；血清分型試驗顯示，該49株沙門氏菌均為雞白痢沙門氏菌；本研究建立的檢測方法用時3d-6d，而國家標準檢測方法需要6d-9d。本研究表明，禽沙門氏菌鑒別培養基和PCR檢測技術可
山東畜牧獸醫 2019年10期2019-10-30
- 羊乳活性發酵飲品中益生元增菌特性及發酵工藝優化
篩選和復配，得到增菌效果較好的益生元；同時對活性益生菌羊乳發酵飲品的發酵工藝進行優化，為活性益生菌羊乳發酵飲品的開發提供理論支撐，以促進羊乳制品種類多樣化發展，滿足消費者需求。1 材料與方法1．1 材料與試劑1．1．1 材料西北農林科技大學西農薩能乳山羊畜牧基地生產的羊乳；新西蘭恒天然（中國）有限公司生產的脫脂乳粉；陜西百躍優利士乳業有限公司提供的低聚果糖（純度≥95%）、菊粉（純度≥90%）、低聚半乳糖（純度≥55%）、低聚異麥芽糖（純度≥50%）；發酵
中國乳業 2019年8期2019-09-11
- 食源性相關腹瀉患者糞彎曲菌檢測結果分析
彎曲菌，以了解與增菌培養分離法檢測結果的關系，為臨床診療與公衛服務提供技術支持。1 材料與方法1.1 菌株來源 對2015年1月至2017年12月本系統12家社區衛生服務中心就診的食源性相關腹瀉患者糞便（或肛拭子）標本采用直接分離與增菌分離相結合的方法常規培養分離獲得200株致瀉菌，其中空腸彎曲菌4株、結腸彎曲菌1株。1.2 儀器與耗材 VITEK-2 compact全自動微生物分析系統（法國bioMérieux公司）及其苛養菌（NH）配套鑒定卡，基因擴增
浙江臨床醫學 2019年6期2019-07-30
- GBS自動培養檢測與普通細菌培養的對比分析
細菌培養法，肉湯增菌法，選擇增菌培養自動檢測系統及 PCR 法等。由于普通培養方法存在漏檢的弊端，本院采用珠海迪爾研制的GBS選擇性增菌顯色培養自動檢測系統，現將二者檢測情況報告如下：1 資料與方法1.1 一般資料收集新疆維吾爾自治區人民醫院2017年4—12月門診和住院妊娠35～37周孕婦 672例，患者年齡為19～45歲。納入標準：新疆維吾爾自治區人民醫院住院及門診的常規產檢者，單胎宮內妊娠經B超證實胎兒存活，且自愿加入本研究的同時簽署知情同意書的孕婦
中國衛生標準管理 2019年5期2019-04-15
- 多重PCR 同時檢測食品中4 種細菌與常見霉菌
]通過12 h的增菌培養可將雞肉等食品中PCR檢測沙門氏菌、大腸桿菌O157:H7與單核細胞增生李斯特氏菌的檢出限由增菌前的102CFU/mL降低至101CFU/mL。閆琳等[11]將人工染菌的禽肉食品樣本在增菌12 h后，利用PCR檢測沙門氏菌的檢出限可低至100CFU/25 g。增菌-PCR檢測方法可顯著提高致病菌的檢出限，然而由于不同微生物生長特性存在差異，需要研究開發通用型培養基應用于多種致病菌的同時增菌培養，并抑制其他非靶標菌的生長，而且增菌-P
食品科學 2019年4期2019-03-11
- 韓國開發出農產品致病菌快速檢測方法和工具
在現場使用的優化增菌及快速檢測方法。負責本次研究的中央大學研究組表示，“目前食物致病菌的檢查通過增菌培養→分離培養→確認試驗，需要7～14 天的時間，而本次研究開發的方法通過增菌培養→Multiplex Real time PCR kit 試驗，可將試驗時間縮短到8 個小時內。本研究開發的工具價格比美國及歐洲低50%左右（3～4 萬韓元），1 次檢查可減少1～2 萬韓元的食物致病菌檢查費用。另外，借鑒AOAC（國際分析化學家協會）方法的鑒定實驗結果確認，該
中國食品學報 2019年11期2019-01-14
- 高通量測序分析不同增菌溫度下冷鮮雞肉細菌的群落多樣性
量測序技術對不同增菌溫度下的冷鮮雞肉細菌群落多樣性的研究鮮見報道。冷鮮雞肉樣品在進行高通量測序前，首先需采集樣品的細菌并提取DNA。為提取較高質量的DNA，提高細菌的檢出率，需對不同貯藏時間的冷鮮雞肉的細菌進行增菌處理，取其增菌液進行細菌總DNA提取。目前現行的標準GB 4789.2—2010《食品微生物學檢驗 菌落總數測定》中規定培養溫度為（36±1）℃，該條件下培養所得結果只包括嗜中溫性需氧微生物菌落總數。目前采取的細菌增菌溫度多為37 ℃，而對于以嗜
食品科學 2018年24期2019-01-07
- 冰鮮鴿肉貯藏過程中的微生物菌群多樣性
行研究，分析不同增菌溫度下冰鮮鴿肉中微生物菌群的菌相構成情況、貯藏過程中各種微生物菌群數量的變化特點以及貯藏過程中肉質新鮮度的變化規律。為了提高DNA的得率，需對細菌進行增菌處理。目前的國家強制性標準中測定菌落總數時的培養溫度為（36±1） ℃，但是該條件下培養時的菌落總數測定對象只包括嗜溫性需氧微生物。對于低溫貯藏冷鮮肉來說，嗜冷菌也可能是優勢菌群，如果能對嗜冷菌和嗜溫菌進行同時檢測，綜合評價會更合理。因此，本研究選取4 ℃和37 ℃ 2 種增菌溫度，綜
肉類研究 2018年9期2018-10-25
- 沙門氏菌及副溶血性弧菌的 共增菌培養基的研制
致病菌有特定的前增菌步驟,沙門氏菌等菌株更是需要進行多步增菌過程,較為費時、費力[8]。因此,研制可同時富集多種致病菌的共增菌培養基成為研究的熱點,這對于提高致病菌共檢技術的效率具有重要意義。沙門氏菌和副溶血性弧菌均為食品中重要的致病菌,研究其共增菌技術對于控制其疾病的傳播及預防相應的食物中毒具有重大意義。目前國內外研究中,涉及多種致病菌共增菌培養基的研究已有:沙門氏菌、志賀氏菌和金黃色葡萄球菌的共增技術[9],沙門氏菌、大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的共增技術
食品工業科技 2018年19期2018-10-22
- 流式細胞技術檢測酸性飲料中菌落總數的研究
.2.3FCM法增菌:將含菌飲料手動搖勻,在無菌操作環境下,抽濾250 mL含菌飲料,用無菌鑷子將濾膜轉移至100 mL TSB肉湯,于(36±1) ℃培養箱中正置培養。檢測:用無菌移液器移取上述增菌后的菌液100 μL加入20 mL無菌試管中,依次加入90 μL CS13,于無菌環境靜置30～60 min。開機清洗校正完成后將含樣品的20 mL試管置于SPU樣品架,試劑Cleaning 5、還原劑(CSR+DR+隔離油)、CSV和B24放置在試劑架,V2
食品工業科技 2018年4期2018-04-13
- 緩沖蛋白胨水前增菌對冷鮮雞表面微生物變化的影響
均需選擇特定的前增菌介質進行菌體修復和富集，以獲得相對豐度較高的目標菌體[6]。常見的非選擇性前增菌介質主要是緩沖蛋白胨水(buffer peptone water，BPW)、胰酶大豆肉湯(trypticasesoy broth，TSB)、營養肉湯(nutrient broth，NB)等[7]。其中BPW是食品安全國家標準GB4789.4-2016《食品微生物學檢驗 沙門氏菌檢驗》和《食品微生物學檢驗 克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)檢驗》 中用于沙門氏菌和克羅
微生物學雜志 2018年6期2018-02-26
- 一次巧克力中沙門氏菌檢驗能力驗證結果與分析
基及試劑①BPW增菌液、BS平板、SC增菌液、三糖鐵瓊脂培養基（干粉）、沙門氏菌篩選顯色平板、TTB增菌液、營養瓊脂（干粉），購自北京陸橋技術有限責任公司。②氧化酶試劑、API 20E，購自法國梅里埃公司。③沙門氏菌診斷血清OMG、O60、He，n，x，購自泰國S& A reagentsLab Ltd, part。④沙門氏菌診斷血清Hr、Hz15、HMC，購自丹麥Statens Serum Institut。以上所用培養基及試劑均在保質期內，并已經質控合。
現代食品 2018年23期2018-02-22
- 從一名三歲女童帶菌者直腸拭子中分離出0139群霍亂弧菌
.2.1 第一次增菌 將所有樣本接種于堿性蛋白胨水，37℃，6～8h進行第一次增菌。2.2.2 分離培養、第二次增菌和快診試驗 取表層增菌液分別劃線接種于堿性瓊脂、四號瓊脂、TCBS瓊脂，37℃，20～24h分離培養；接種堿性蛋白胨水，37℃，6～8h進行第二次增菌；同時用O1群、O139群霍亂弧菌檢測試劑盒（膠體金法）做快診試驗。2.2.3 觀察菌落特征、涂片染色、血清學試驗、純培養 挑取四號瓊脂平板上2～4mm、微凸、圓形、中心黑色、光滑、濕潤菌落；T
醫藥前沿 2018年27期2018-01-16
- 飼料中沙門氏菌的測定方法
他菌，因此選擇性增菌是必須的，而且為了激活受傷的沙門氏菌，常進行預增菌。增菌使沙門氏菌抗原濃度增加，更有利于檢驗結果的呈現。沙門氏菌快速檢測試劑盒是專門用來檢測飼料中沙門氏菌抗原的。沙門氏菌特異性抗體是快速定性檢測的基礎，經過增菌（選用營養肉湯進行預增菌，使“致傷”、冷凍的沙門氏菌復蘇）和選擇性增菌（使用選擇性培養基RV進行增菌，使沙門氏菌大量繁殖，同時抑制其它雜菌生長）的陽性樣品與染色劑標記的抗體結合形成抗原-抗體復合物，其沿著膜移動，被固定的抗體將使復
課程教育研究·新教師教學 2015年8期2017-09-27
- 不同結核桿菌檢測方法的臨床應用價值
）、痰涂片試驗、增菌聚合酶鏈反應技術（PCR）四種檢測方法對結核桿菌檢測的臨床應用價值。方法選取我院2015年6月～2016年6月收治的結核病患者60例分為觀察組，將同期收治的非結核病患者40例作為對照組。采集所有患者的痰液標本先后進行羅氏培養、PCR技術、痰涂片試驗、增菌PCR技術檢測，記錄檢測結果，比較不同檢測方法的檢測價值。結果觀察組患者檢測結果顯示，羅氏培養檢出痰液標本陽性14例，陽性率為23.33%；PCR技術檢出痰液標本陽性33例，陽性率為55
臨床醫藥文獻雜志(電子版) 2017年29期2017-08-16
- 食品微生物快速檢測問答匯總
，必須經歷培養、增菌等階段，無法實現在1～2個小時內出結果。2 食品中微生物快速檢測方法具備的特點？食品中微生物快速檢測方法具有如下一個或者幾個特點：（1）操作簡便，檢測速度快，檢測時間短；（2）靈敏度高、特異性強，檢測結果更為精確；（3）自動化程度高，減少人為參與，降低人工成本；（4）對檢驗人員經驗依賴程度低，操作簡單，易于標準化；（5）產品更小、更輕、更便攜，更適合現場檢測。3 目前常用的食品微生物快速檢測方法有哪些？常用的食品微生物快速檢測技術從大類
食品安全導刊 2017年3期2017-04-28
- B群鏈球菌顯色培養基在孕產婦B群鏈球菌篩查中的性能評價
，分別直接接種或增菌后接種于血平皿和GBS顯色培養基，記錄鑒定結果。以篩查出的GBS總陽性數為參考，分別比較直接接種和增菌接種時，顯色培養基篩查GBS的敏感性和特異性。結果顯色培養基對GBS的檢出率、敏感性和特異性優于常規血平皿。標本增菌后接種法孵育24 h得到的陽性率為7.05%(22/312)高于直接接種法(6.41%，20/312)，對GBS篩查的敏感性高于直接接種法(95.65%vs86.96%)，特異性一致(99.65%)。結論顯色培養基對GBS
首都醫科大學學報 2016年5期2016-11-10
- 大腸桿菌O157：H7快速增菌培養基檢測效果的研究
157：H7快速增菌培養基檢測效果的研究□ 宮春波 煙臺市疾病預防控制中心□ 劉磊 陶文靖 北京良潤生物科技有限公司□ 王覃 北京智云達科技股份有限公司為了驗證對于大腸桿菌O157:H7菌株特異性、復蘇效果以及快速生長的特點，比較了3種培養基對于大腸桿菌O157:H7的增菌效果。研究結果表明，8h培養時間內，MicroFast?快速增菌培養基對于冷損傷和熱損傷的大腸桿菌O157:H7菌株具有良好的修復和增殖效果。MicroFast?快速增菌培養基營養組分適
食品安全導刊 2016年22期2016-10-10
- 食源性致病菌快速檢測的前增菌培養的研究進展
病菌快速檢測的前增菌培養的研究進展錢紅玫1,胡文忠2,*,馮可3,薩仁高娃3,邵文俊2(1.大連工業大學食品學院,遼寧大連 116600;2.大連民族大學生命科學學院,遼寧大連 116600;3.大連理工大學生命科學與技術學院,遼寧大連 116024)近年來,由食源性致病菌污染食物導致中毒或死亡事件在全球頻發,嚴重危害人類健康,食源性微生物引起的疾病已成為危害人類健康的頭號殺手。目前,食源性致病菌快速檢測技術研究已成為國際學者關注的熱點,研究的焦點主要集中
食品工業科技 2016年13期2016-09-13
- 沙門菌定性檢驗方法的關鍵環節分析
利用BPW進行前增菌，采用TTB和SC實施二次增菌?；诖?，通過3種分離培養基，鑒定分離培養。同時，通過實時熒光PCR方法，對比分析前增菌和二次增菌后的增菌效果。結果基于分離培養方法作用下，15件考核樣品中有12件樣品可檢測到沙門菌?；趯崟r熒光PCR檢測方法作用下，15件考核樣品中有14件樣品可檢測到沙門菌。結論在優化沙門菌檢測方案的基礎上，特別是篩查大規模樣本或監測時，前增菌后直接進行檢測，或者利用SC二次增菌后鑒定分離培養，有助于減少工作量，減低資源
系統醫學 2016年7期2016-09-10
- 大腸桿菌O157：H7快速增菌培養基檢測效果的研究
O157：H7的增菌效果。研究結果表明，8h培養時間內，MicroFast?快速增菌培養基對于冷損傷和熱損傷的大腸桿菌O157：H7菌株具有良好的修復和增殖效果。MicroFast?快速增菌培養基營養組分適合O157菌株的生長需求，在MicroFast?快速增菌培養基中，大腸桿菌O157：H7菌株的倍增時間為13.5min，遠高于mEC+n的28min，且MicroFast?快速增菌培養基能夠完全抑制部分G+細菌以及部分G-細菌的干擾，對于大腸桿菌O157
食品安全導刊 2016年8期2016-05-14
- 良潤生物：技術引領市場
門氏菌檢測需要前增菌、增菌、平板分離、生化鑒定、血清型鑒定5大步驟，需要3～7天的時間，檢測時間較長、效率低，市場對快速檢測技術的需求不斷加大。目前沙門氏菌快速檢測技術主要分為3大塊：培養改良法、免疫學方法、分子學方法。免疫學方法優勢是特異性高，操作時間短、檢測結果可靠，適合批量檢測和自動化檢測（VIDAS），略勢為高質量抗體獲得困難、產品開發周期長、檢測靈敏度受靶標蛋白的影響大。分子學方法優勢是靶標明確，操作時間短、檢測結果可靠，核酸提取效率和系統穩定性
食品安全導刊 2016年4期2016-05-14
- 沙門菌和志賀菌通用增菌液增菌效果實驗觀察
志賀菌檢驗所用的增菌液不同， 即使是對同一份標本也只能分別增菌， 分別劃線分離， 使實驗室的工作量成倍增加， 同時由于兩者增菌時間不相同， （ 沙門菌前增菌 8～ 18 h，TTB、SC增菌18～24h 志賀菌厭氧16～ 20 h） ， 給實驗測定的工作安排帶來一定困難， 因此， 研究和選擇合適的可同時用作沙門、志賀菌增菌的通用增菌液， 對提高實驗室的工作效率具有重要的現實意義。選擇了市售的 2 個牌號的沙門、志賀菌增菌液與 SC 增菌液及 GN 增菌液分
健康之路（醫藥研究） 2015年2期2015-10-21
- 如何實現快速檢測及有效控制沙門氏菌
的實驗員多次轉接增菌及生化鑒定才能完成沙門氏菌的初步判斷。Micro Fast沙門氏菌快速檢測系統由沙門氏菌快速增菌培養基和金標檢測卡組成，可實現樣品中沙門氏菌最短24小時檢測。在沙門氏菌增菌的過程中運用的技術主要是抑制競爭菌的生長，從而達到沙門氏菌的快速增殖，在低菌及高菌環境都能快速有效的實現沙門氏菌快速增菌?？焖贆z測卡應用“雙抗體夾心法”的原理，沙門氏菌和金標記的特異性單克隆抗體結合及預包被于NC膜T線位置的特異性多克隆抗體結合，金顆粒的聚集而顯示明顯
食品安全導刊 2015年4期2015-07-15
- 不同培養基及B族鏈球菌增菌肉湯檢測B族鏈球菌效果評價
養基及B族鏈球菌增菌肉湯檢測B族鏈球菌效果評價陸庭嫣，沈俐，唐振華(上海交通大學醫學院附屬國際和平婦幼保健院，上海200030)目的通過分析B族鏈球菌(GBS)檢測的陽性檢出率和平板選擇性能來評價GBS篩查培養基、哥倫比亞血瓊脂培養基和GBS增菌肉湯檢測結果的可靠性和臨床應用的可行性。方法收集妊娠晚期35～37周孕婦陰道下端及肛周樣本242例、中段尿樣本15例，同時直接接種及經GBS增菌肉湯增菌后接種哥倫比亞血平板和GBS篩查平板，觀察各培養基上GBS的生
檢驗醫學 2015年9期2015-01-12
- 提高飼料中志賀氏菌檢測準確性的技術方法研究
制品檢定所；腸道增菌肉湯、GN增菌液、志賀氏菌增菌液、XLD培養基、HE培養基、EMB培養基、SS培養基、沙門氏菌生化鑒定管、志賀氏菌生化鑒定管、大腸埃希氏菌生化鑒定管，青島海博生物工程公司。全自動微生物鑒定系統（BIOLOG MicroStationTM）、GENⅢ細菌鑒定板（GEN III MicroPlateTM），美國BIOLOG公司。電熱恒溫培養箱、生物顯微鏡、電子天平等。1.2 方法1.2.1 增菌培養基的優化試驗分別取沙門氏菌、志賀氏菌、大腸
飼料工業 2014年1期2014-12-04
- 基于可視化抗體宏陣列技術的出血性大腸桿菌O157∶H7定量檢測
1.3.5 模擬增菌實驗按照GB/T 4789.36—2008《食品衛生微生物學檢驗：大腸埃希氏菌O157∶H7/NM檢驗》中的規定，對超市購買的食品面包、果凍、牛奶進行前處理，在處理好的250 mL樣品中加入事先培養并且稀釋106倍的標準菌液1 mL，經計數為380 個/mL，然后于37 ℃進行增菌培養，分別于2、4、6、8、10、12、14、16 h后進行宏陣列檢測，并同步用大腸桿菌O157∶H7顯色培養基涂布平板計數，之后分析平板計數結果與標準曲線推
食品科學 2014年20期2014-01-18
- 細菌性食物中毒回顧性檢測分析
選擇性平板與運用增菌液增菌后分離相應選擇性平板相結合的方法, 篩選優勢菌(可疑菌落)進行鑒定。三種方法相結合的檢測處理過程加快了檢出速度,提高了檢出率?，F具體介紹如下。1 材料與方法1.1 標本來源 過往18起細菌性食物中毒患者的肛拭、剩余食物等材料114份。1.2 標本采集 肛拭子采集于保存菌種管內, 剩余食物及其他留樣材料采集于無菌留樣容器內。1.3 檢測試劑 PCR儀與PCR細菌檢測試劑盒由西安天隆科技有限公司提供； GN腸道增菌液、副溶增菌液、SF
中國實用醫藥 2013年29期2013-02-02
- 食品中熱損傷沙門氏菌選擇性增菌及實時熒光聚合酶鏈式反應檢測
傷沙門氏菌選擇性增菌及實時熒光聚合酶鏈式反應檢測索 標1,2，滕要輝1，史賢明2，艾志錄1(1.河南農業大學食品科學技術學院，河南 鄭州 450002；2.上海交通大學農業與生物學院，上海 200240)為了能夠高效檢測食品中的亞致死損傷沙門氏菌，首先采用熱激脅迫的方法得到亞致死損傷沙門氏菌細胞，進而基于選擇性增菌培養液SEL建立一種實時熒光聚合酶鏈式反應檢測技術。結果表明：在SEL中經過20h增菌培養后，無論是否經過修復培養，1～2CFU/5mL SEL
食品科學 2012年10期2012-10-25
- 吸水性樣品對沙門氏菌和O157檢測影響研究
在食品致病菌檢驗增菌培養過程中，具有較強的吸水性，使增菌液含量明顯減少的樣品，諸如大豆分離蛋白粉［1］、面包、干海菜等。因為此類樣品的吸水作用，使增菌液含量明顯減少，發生吸水膨脹成糊現象，進而對增菌液的培養環境，如pH值、含鹽量等形成一定的影響。在常見致病菌的檢驗過程中，前增菌過程是其中一個重要環節，一般常規方法為取具有代表性樣品25 g，加入225 mL相應增菌液，培養8～24 h。然而對于一些特殊樣品例干海菜、面包、大豆分離蛋白粉等，由于其自身固有屬性
微生物學雜志 2012年6期2012-10-25
- 一起O139群霍亂弧菌感染的病原學檢測分析
密切接觸者扛拭子增菌液以及相關甲魚的一二次增菌液各2～3滴，滴入檢測條加樣端15 min內觀察結果。1.3.2 常規菌株分離 按《霍亂防治手冊》（5版）進行[1]患者腹瀉物、可疑者肛拭子直接接種10 mL堿性蛋白胨水中增菌6～8 h后，劃線接種慶大霉素瓊脂平板，井水和甲魚養殖水標本450 mL，調pH9.0加50 mL 10倍濃縮堿性胨水，以無菌方式采集甲魚內臟25 g接種225 mL堿性胨水，增菌6～8 h，劃線接種慶大霉素瓊脂平板分純培養，同時取0.1
中外醫療 2012年36期2012-08-20
- 提高雙歧桿菌活力的優化增菌發酵技術研究
歧桿菌活力的優化增菌發酵技術研究何楓媛，葛武鵬，衛偉，朱紅，劉銳(西北農林科技大學食品科學與工程學院，陜西楊凌 712100)以MRS為基礎培養基，選取添加4種不同的增菌因子，即：魔芋膠水解物、薏苡仁浸提液、山藥浸提液、菊粉，以單因素實驗篩選出較優的3種增菌因子，通過正交實驗以活菌數為活力評價指標，確定最佳增菌配方。結果表明，單因素實驗中，魔芋膠水解物增菌效果最佳，當其在MRS培養基中添加體積分數為35 mL/L時，雙歧桿菌的活菌數可達1.21×109mL
中國乳品工業 2012年5期2012-01-08
- 響應曲面法優化鼠李糖乳桿菌L7-13增菌因子
乳桿菌L7-13增菌因子胡博，梁金鐘（哈爾濱商業大學食品工程學院，哈爾濱150076）采用響應面方法對鼠李糖乳桿菌L7-13的增菌因子進行了優化。以MRS培養基作為基礎培養基，在此基礎上添加增菌因子；采用單因素實驗設計法，對幾種乳酸菌生長促進因子對鼠李糖乳桿菌L7-13的增菌影響進行評價；篩選出對鼠李糖乳桿菌L7-13增菌效果顯著的3種物質以其最佳添加量；然后用旋轉中心組合設計及響應面分析法確定了3種顯著增菌因子的最佳配比。在優化后的培養基中，鼠李糖乳桿菌
中國乳品工業 2011年1期2011-10-19
- 小腸結腸炎耶爾森菌前增菌方式的選擇
結腸炎耶爾森菌前增菌方式的選擇牛 蕾1，祝長青1,2，周光宏1,*，徐幸蓮1，李 彬1，江 蕓1(1.南京農業大學 國家肉品質量安全控制工程技術研究中心，江蘇 南京 210095；2.江蘇出入境檢驗檢疫局，江蘇 南京 200001)小腸結腸炎耶爾森菌作為一種食源性致病菌逐漸引起了關注。本實驗利用胰蛋白胨培養基、改良磷酸鹽緩沖液和氯苯酚-替卡西林-氯酸鉀培養基對小腸結腸炎耶爾森菌前增菌，并采用實時熒光PCR方法對增菌效果進行檢驗。結果表明：在純菌體系中胰蛋白
食品科學 2011年5期2011-10-18
- 食品沙門氏菌檢測方法的發展
法是食物樣品分步增菌，以增加病原的可檢出率，這種培養方法總體可分4個不同階段或步驟。第一步（預增菌），將樣品加到一種高營養、無選擇性的培養基中，溫度37℃，使那些“致傷”的細菌復蘇及使所有微生物生長。雖然緩沖胨水被建議常規使用（由于其可保持溶液pH值穩定），但對培養基的選擇仍存有爭論。第二，是選擇性增菌步驟，它使沙門氏菌生長而使肉湯中同時存在的微生物數量減少，與預增菌培養基相似，對選擇性培養基的選擇，也存在許多不同的觀點。目前應用的主要有如下3種類型：連四
河南科技 2011年5期2011-08-15
- 外環境樣本中產毒型O1群霍亂弧菌雙重熒光定量PCR快速檢測方法的建立＊
接種于營養肉湯,增菌6h,用“煮沸法”提取核酸:即取1mL上述增菌液加入1.5mL離心管中,4 000r/min離心 6min富集,去上清,加入 100μL DEPC水重懸,煮沸 10min,10 000r/min離心 2 min,吸取上清液作為模板DNA,-80℃保存備用。1.4 病原菌的定量標準 純培養增菌6h,取一份菌液,煮沸 10min后測 OD492nm值,調節濃度使OD492nm=0.1(相當于 1.0 ×107cfu/mL)[6],依次作10
中國人獸共患病學報 2011年1期2011-01-24
- 乳制品常見致病菌選擇性共增菌技術研究
見致病菌選擇性共增菌技術研究張巧艷1，何騰飛2，范萍3，平麗英3，周育1（1.浙江省農業科學院農產品質量標準研究所，杭州 310021；2.浙江工業大學藥學院，杭州 310014；3.中美華東制藥有限公司發酵工程實驗室，杭州 310011）以乳制品常見致病菌大腸桿菌、沙門氏菌和金黃色葡萄球菌為目標菌，研究6種基礎培養基、2種培養模式、20種培養基添加劑對增菌的影響，并以無顯著抑制效應的添加劑對背景微生物進行了抑菌效應研究，建立了一種選擇性富集目標菌的ESS
中國乳品工業 2011年5期2011-01-08